|
|
Studium biologického chování derivátů kyseliny hyaluronové
Svanovský, Evžen ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Tilšer, Ivan (oponent) ; Mičuda, Stanislav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Evžen Svanovský Školitel: Prof. PharmDr. Ing. Milan Lázníček, CSc. Název disertační práce: Studium biologického chování derivátů kyseliny hyaluronové Dizertační práce se zabývá studiem biodistribuce a farmakokinetiky hyaluronové kyseliny značené izotopem 111 In a možných rozdílů v závislosti na molekulové hmotnosti HA. HA je v organismech přirozeně se vyskytující glykosaminoglykan s řadou důležitých funkcí jak na orgánové, tak na buněčné úrovni, při fyziologických i patologických dějích. Její charakter fyziologické látky zároveň velmi znesnadňuje možnosti jejího sledování v organismu. Vytvořením vhodného derivátu a reprodukovatelného postupu značení této molekuly izotopem se stalo stěžejním bodem celé práce. V experimentální části byla molekula DTPA-HA, vytvořená na pracovišti společností CPN Dolní Dobrouč, značena známou metodou používanou běžně pro vazbu 111 In na molekulu DTPA. Byl vytvořen reprodukovatelný postup, při kterém je 0,4M acetátový pufr pH 5,5 smíchán se stejným objemem, gelovou filtrací přečištěné, DTPA-HA a požadovaným množstvím izotopu 111 In a celá směs je míchána 0,5h. Takto byly značeny molekuly DTPA- HA o třech molekulových hmotnostech 10, 100 a 400kDa, které se...
|
|
|
Studium transportních mechanismů receptorově specifických radiofarmak v ledvinných buňkách.
Cihlo, Jan ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent) ; Komárek, Pavel (oponent)
Souhrn Renální akumulace radioaktivně značených specificky působících látek může být klinickým problémem při diagnostice, ale především při léčbě disponovaných malignit kvůli potencionální radionefrotoxicitě těchto látek. Jedním z cílů této práce bylo navržení vhodného in vitro modelu, který by umožňoval posuzování kumulačních charakteristik jednotlivých látek v ledvinách a hledání možných opatření vedoucích ke snížení míry zpětné reabsorpce buňkami renálního tubulu. Navržený model využívající renální OK buněčnou linii ke studiu transportních mechanismů radioaktivně značených specificky působících látek poskytuje další možnost posuzování radionefrotoxicity těchto látek. Diskutovaná in vitro metoda byla standardizována a využita při studiu transportních závislostí zástupců radioaktivně značených analogů somatostatinu (111In/125I/90Y/177Lu-DOTA-Tyr3-oktreotát, 111In/90Y/177Lu-DOTA-1-Nal3-oktreotid), protilátek (111In/90Y/99mTc-AntiCD66) a značeného albuminu (FITC-albumin, 99mTc-albumin). U všech studovaných radioaktivně značených látek byla zvládnuta technika radioaktivního značení a následné radiochemické analýzy pomocí metod HPLC a/nebo ITLC-SG. U studovaných specificky působící látek (radioaktivně značené peptidy a protilátky) nebyl prokázán podstatný vliv radioaktivního značení na buněčnou internalizaci....
|
|
|
Studium ledvinné akumulace receptorově specifických radiopeptidu
Kubačková, Tereza ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Lázníček, Milan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Tereza Kubačková Konzultant: doc. PharmDr. František Trejtnar, CSc. Název rigorózní práce: Studium ledvinné akumulace receptorově specifických radiopeptidů Radionuklidy značené, na cholecystokininové/gastrinové receptory zaměřené peptidy jsou slibnými sloučeninami pro radiodiagnostiku a radioterapii některých malignit. Zvláště zajímavé jsou deriváty gastrinu s kratším řetězcem zvané minigastriny. Limitem použití těchto látek je nefrotoxicita způsobená kumulací radiopeptidů v ledvinné tkáni. Cílem této práce bylo zkoumat míru ledvinné kumulace a mechanismy ledvinného uptake nových receptorově specifických peptidů ze skupiny analogů gastrinu s využitím in vitro modelů. Zkoumání bylo zaměřeno na porovnání ledvinné akumulace DOTA-minigastrinu 48 (DOTA- MG48) a DOTA-minigastrinu 11 (DOTA-MG11), které byly značeny indiem-111. Dále byl zkoumán možný vliv použitého radioligandu na ledvinnou akumulaci porovnáním uptake DOTA-MG11 značeného indiem-111 nebo luteciem-177 a bylo provedeno porovnání akumulace značených minigastrinů s látkami z jiné skupiny receptorově specifických radiopeptidů - analogů somatostatinu, jako jsou 111 In-DOTA-NOC a 111 In-DOTA-TATE. Ke stanovení podílu aktivních...
|
|
|
Modifikace fragmentů protilátek, jejich značení nekonvenčními pozitronovými zářiči a biologické testování pro diagnostiku PET.
Čepa, Adam ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Komárek, Pavel (oponent) ; Melichar, František (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmakiologie a toxikologie Kandidát Mgr. Adam Čepa Školitel Prof. PharmDr. Ing. Milan Lázníček, CSc. Název disertační práce Modifikace fragmentů protilátek, jejich značení nekonvenčními pozitronovými zářiči a biologické testování pro diagnostiku PET Zvláštní onkologická diagnostika vyžaduje nové typy selektivních radiofarmak, zejména těch, které jsou vhodné pro molekulární PET zobrazování a terapii potažmo teranostiku. Cílem této práce je představit nová radiofarmaka s cílenou distribucí pro diagnostiku immunoPET a terapii založenou na monoklonální protilátce IgG M75 zaměřené na humánní karboanhydrázu IX, nimotuzumab (hR-3) cílící receptor pro epidermální růstový faktor (EGFR) a jeden z derivátů bombesinu (BBN) cílící GRP receptory. Tyto molekuly byly značeny radionuklidy 64Cu (t1/2 12,70 hod.), 61Cu (t1/2 3,33 hod), 68Ga (t1/2 68 min) a 177Lu (t1/2 6,71 dne). Tato potenciální radiofarmaka byla hodnocena in vitro a in vivo. Protilátka IgG M75 a její fragment scFv-Fc M75, připravený genetickou modifikací, byly konjugovány s nekomerčním chelátorem specifickým pro měď tzv. "fosfinátem" (PHS) a následně značeny radionuklidy 61,64Cu. Stabilita značeného konjugátu byla testována v lidském séru. Imunoreaktivita značeného konjugátu...
|
|
|
Modifikace fragmentů protilátek, jejich značení nekonvenčními pozitronovými zářiči a biologické testování pro diagnostiku PET
Čepa, Adam ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Komárek, Pavel (oponent) ; Melichar, František (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmakiologie a toxikologie Kandidát Mgr. Adam Čepa Školitel Prof. PharmDr. Ing. Milan Lázníček, CSc. Název disertační práce Modifikace fragmentů protilátek, jejich značení nekonvenčními pozitronovými zářiči a biologické testování pro diagnostiku PET Zvláštní onkologická diagnostika vyžaduje nové typy selektivních radiofarmak, zejména těch, které jsou vhodné pro molekulární PET zobrazování a terapii potažmo teranostiku. Cílem této práce je představit nová radiofarmaka s cílenou distribucí pro diagnostiku immunoPET a terapii založenou na monoklonální protilátce IgG M75 zaměřené na humánní karboanhydrázu IX, nimotuzumab (hR-3) cílící receptor pro epidermální růstový faktor (EGFR) a jeden z derivátů bombesinu (BBN) cílící GRP receptory. Tyto molekuly byly značeny radionuklidy 64Cu (t1/2 12,70 hod.), 61Cu (t1/2 3,33 hod), 68Ga (t1/2 68 min) a 177Lu (t1/2 6,71 dne). Tato potenciální radiofarmaka byla hodnocena in vitro a in vivo. Protilátka IgG M75 a její fragment scFv-Fc M75, připravený genetickou modifikací, byly konjugovány s nekomerčním chelátorem specifickým pro měď tzv. "fosfinátem" (PHS) a následně značeny radionuklidy 61,64Cu. Stabilita značeného konjugátu byla testována v lidském séru. Imunoreaktivita značeného konjugátu...
|
|
|
Analýza biologického chování receptorově specifických radiofarmak v in vitro podmínkách
Melicharová, Ludmila ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent) ; Komárek, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Farmakologie a toxikologie Kandidátka: PharmDr. Ludmila Melicharová Školitel: Prof. PharmDr. Ing. Milan Lázníček, CSc. Název dizertační práce: Analýza biologického chování receptorově specifických radiofarmak v in vitro podmínkách V předložené práci byla studována problematika receptorově specifických radiofarmak a jejich biologického chování na buněčné úrovni. Studie byly prováděny s radioaktivně značenými analogy somatostatinu a gastrinu. Všechny tyto látky jsou potenciálně využitelné v diagnostice a terapii nádorů neuroendokrinního původu. Testované analogy somatostatinu byly: DOTA-TATE a DOTA-NOC značené 111 indiem, 177 luteciem, 90 ytriem a 125 jodem. Studie byly prováděny na buněčné linii AR42J, což jsou buňky potkaní, pankreatické nádorové. Byla studována míra internalizace zmíněných analogů, dále externalizace a specifická vazebnost. Získané údaje byly porovnány s hodnotami získanými aplikací stejných peptidů potkanům. Bylo sledováno vychytávání radioaktivních peptidů ve tkáních, ve kterých očekáváme výskyt somatostatinových receptorů a také způsob vylučování peptidů. Testované peptidy, které se vážou na CCK/gastrinové receptory byly tzv. minigastriny, konkrétně MG 11, 45, 47, 48. Tyto minigastriny byly označeny 111...
|
|
|
Studium plazmatické vazebnosti radiofarmak
Hafinec, Václav Matyáš ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Ramos Mandíková, Jana (oponent)
Studium plazmatické vazebnosti radiofarmak Abstrakt Tato práce je věnována studiu vazebnosti látek (177 Lu-DOTA-[Lys3]bombesin, 177 Lu- NOTA-[Lys3]bombesin, 177 Lu-PCTA-[Lys3]bombesin a 177 Lu-DOTA-MG47) na bílkoviny krevní plazmy metodou rovnovážné dialýzy při 37 ℃ pro vzorky krevní plazmy hovězího skotu, králíka, potkana a člověka. V rámci této skupiny pak byly jednotlivé látky mezidruhově porovnávány. Látky 177 Lu-DOTA-[Lys3]bombesin, 177 Lu-NOTA-[Lys3]bombesin, 177 Lu-PCTA- [Lys3]bombesin a 177 Lu-DOTA-MG47 jsou nově vyvíjená receptorově specifická, peptidová radiofarmaka. U všech nově získaných dat bylo provedeno mezidruhové srovnání a následné statistické vyhodnocení. Značené deriváty bombesinu byly porovnány a statisticky zpracovány i mezi sebou. Při mezidruhovém srovnání a určení statistické významnosti dat, byly u některých zkoumaných vzorků nalezeny statisticky významné i vysoce významné rozdíly. Porovnáváním a statistickým hodnocením byla zjištěna statisticky vysoce významná rozdílnost při porovnávání se vzorky 177 Lu-NOTA-[Lys3]bombesin. I přes nalezené rozdíly je jasné, že plazmatická vazebnost u všech látek hodnocených v této práci natolik nevýznamná, že nebude farmakokinetiku ovlivňovat.
|
|
|
Studium plazmatické vazebnosti nově vyvíjených radiofarmak
Šejnová, Barbora ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Melicharová, Ludmila (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE FARMACEUTICKÁ FAKULTA V HRADCI KRÁLOVÉ Katedra farmakologie a toxikologie DIPLOMOVÁ PRÁCE: Studium plazmatické vazebnosti nově vyvíjených radiofarmak ABSTRAKT: Metodami rovnovážně dialýzy při 37řC a ultrafiltrace byla studována vazebnost dvou receptorově specifických peptidů - 111 In - DOTA - minigastrinu a 177 Lu - DOTA - bombesinu z hlediska mezidruhového srovnání. U zvolených živočišných druhů (potkan, králík, skot, člověk) byla vazebnost různá. Vyšší vazebnost byla zjištěna u 111 In - DOTA - minigastrinu. V porovnání metod byla větší vazebnost naměřena u obou peptidů a všech živočišných druhů metodou ultrafiltrace než metodou rovnovážné dialýzy. KLÍČOVÁ SLOVA: radiofarmaka, plazmatická vazebnost, rovnovážná dialýza, ultrafiltrace, 111 In - DOTA - minigastrin, 177 Lu - DOTA - bombesin Barbora Šejnová Hradec Králové 2011
|
|
|
Stanovení plazmatické vazebnosti nově vyvíjených radiodiagnostik Alzheimerovy nemoci
Hyršová, Lucie ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Melicharová, Ludmila (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmakologie a toxikologie Studentka: Lucie Hyršová Školitel: Prof. PharmDr. Ing. Milan Lázníček CSc. Název diplomové práce: Stanovení plazmatické vazebnosti nově vyvíjených radiodiagnostik Alzheimerovy nemoci Abstrakt: Stanovení vazebnosti na bílkoviny krevní plazmy u nově zkoumaných léčiv patří mezi základní parametry, které se provádějí již v raných stádiích klinického testování. Vazebnost léčiv totiž ovlivňuje veškeré farmakokinetické parametry a samozřejmě má vliv i na farmakodynamiku. V této práci je zkoumána vazebnost látek 99m Tc-5C-2-BOC a 99m Tc-5C-5-BOC, které patří mezi potenciální radiodiagnostika Alzheimerovy nemoci. Testována je krevní plazma čtyř živočišných druhů (jmenovitě lidská, králičí, hovězí a potkaní plazma) a je provedeno jejich vzájemné porovnání. Vazebnost byla v obou případech stanovována pomocí dvou metod - rovnovážné dialýzy a ultrafiltrace. S využitím metody rovnovážné dialýzy byla určena nejnižší vazebnost obou látek v lidské a hovězí plazmě. Vazebnost 99m Tc-5C-2-BOC stanovená metodou ultrafiltrace je nejnižší v hovězí plazmě a jenom o málo vyšší v lidské, vazebnost látky 99m Tc-5C-5-BOC je nejnižší v lidské plazmě. Z dosažených výsledků vyplývá, že vazebnost studovaných látek na plazmatické bílkoviny...
|
|
| |
host ::
RSS.