Název: Řízení enzymatické aktivity molekuly kreatinkinázy změnami její konformace
Překlad názvu: Control of creatine kinase activity due to structural changes of the enzyme molecule
Autoři: Horníková, Daniela ; Mejsnar, Jiří (vedoucí práce) ; Amler, Evžen (oponent) ; Kolář, František (oponent)
Typ dokumentu: Disertační práce
Rok: 2009
Jazyk: cze
Abstrakt: 74 5. ZÁVĚR Práce prokázala adekvátními chemickými a fyzikálními metodami následující vlastnosti myofibrilární kreatinkinázy (EC 2.7.3.2) (CK), vyčistěné z čisté myofibrilární frakce krysího a králičího svalu m. psoas. 1) Sekvenční 2D SDS elektroforéza odhalila tři izoelektrické body v úzkém rozsahu fyziologického pH 7.17, 7.28 a 7.47. Specifická enzymatická aktivita CK byla 82.35 IU/mg. 2) Rychlost výměny fluorescenčně značené CK-IAF mezi M-linií izolovaných myofibril a okolím (nepřímo úměrně vypovídající o síle vazby CK molekuly v M-linii), měřená v rovnovážném stavu metodou FLIP, se zpomaluje okyselováním okolního prostředí v rozmezí pH 6.5 - 7.2. 3) Rychlost výměny CK-IAF molekuly je ovlivněna přítomností substrátů (pH 7.10 - 7.17), když rychlosti CK se substráty (konformace "closed" a "intermediary") jsou průkazně sníženy oproti rychlosti CK bez substrátů (v konformaci "open"). Specifická enzymatická aktivita při těchto pokusech se snižovala podle vazby v myofibrilách až o dva řády k hodnotě 0.40 IU/mg. 4) Měření steady-state fluorescence vnitřních tryptofanových zbytků neznačené CK prokázala a) trojí pokles fluorescence v čase podle vazby substrátů, b) změnu střední doby života lifetime 2.72 ns volné CK, vlivem vazby ATP (2.38 ns) a vazbou ATP+Cr (2.42 ns). 5) Zhášení fluorescence vnitřních...

Instituce: Fakulty UK (VŠKP) (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Dostupné v digitálním repozitáři UK.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/20.500.11956/6858

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-454273


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Univerzita Karlova > Fakulty UK (VŠKP)
Vysokoškolské kvalifikační práce > Disertační práce