|
|
Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC V.
Kokošková, Denisa ; Pilařová, Pavla (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC V. Diplomová práce Denisa Kokošková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Byla optimalizována metoda stanovení kyseliny salicylové jako hlavního rozkladného produktu kyseliny acetylsalicylové v tabletách Acylpyrinu, Acylcoffinu a Acifeinu. K hodnocení byla použita vysokoúčinná kapalinová chromatografie s elektrochemickou detekcí. Pro analýzu byla využita monolitická kolona Phenomenex 100 x 4,6 mm, Onyx monolitic C8. Optimalizace a ověření již navržených podmínek elektrochemické detekce bylo zaměřeno na nalezení vhodného složení mobilní fáze a rozpouštědla vzorku. Jako vhodná mobilní fáze byl použit 50 mM roztok fosfátového pufru o pH 2,5 a acetonitrilu v poměru 80 : 20. Průtok kolonou byl 1 ml/min, teplota 25 řC, injikovaný objem 10 μl. Elektrický potenciál byl nastaven na hodnoty E1= 300 mV, E2= 850 mV. Rozsah byl 1 μA. Optimalizovaná metoda byla validována, parametry validace byly přesnost, správnost, linearita, selektivita, robustnost, kvantitativní a detekční limit. Byla sledována stabilita vzorku tablet Acylpyrinu po dobu 48 hodin.
|
|
|
HPLC hodnocení fumagillinu v léčivém přípravku
Strýčková, Kristýna ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Sochor, Jaroslav (oponent)
Rigorózní práce Mgr. Kristýna Strýčková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv V této rigorózní práci bylo vypracováno analytické hodnocení fumagillinu s využitím HPLC a stanoven obsah fumagillinu v léčivém přípravku. Měření bylo prováděno na chromatografické koloně o rozměrech 3x150 mm I.D. s náplní Separon SGX NH2, 7µm. Byla použita mobilní fáze ve složení methanol : octan amonný (vodný roztok 0,005 mol/l, v/v ) v poměru 60:40, průtoková rychlost 1 ml/min při tlaku 2,5 až 2,6 MPa. Detekce byla prováděna při 335 nm pomocí UV detektoru. Vzorky byly nastřikovány v objemu 20 µ/l. Pro stanovení fumagillinu v léčivém přípravku byla vypracována metoda vnitřního standardu. Při zvolených podmínkách nejvíce vyhovoval nimesulid. Z validačních parametrů byla ověřena linearita, přesnost, správnost, robustnost, selektivita a detekční limit. Dále byla zkoušena stabilita při pokojové teplotě a při teplotě 2 až 8 žC. Bylo stanoveno 0,0238 g fumagillinu na 1 g léčivého přípravku, což odpovídá 95,2 % deklarovaného množství
|
|
|
Studium možností využití stacionárních fází na bázi oxidů kovů pro analýzu polárních látek
Slaninová, Jitka ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Studentka: Jitka Slaninová Školitelka: Doc. PharmDr. Petra Kovaříková, Ph.D. Název diplomové práce: Studium možností využití stacionárních fází na bázi oxidů kovů pro analýzu polárních látek V diplomové práci byly zkoumány možnosti využití stacionární fáze na bázi oxidu zirkoničitého (kolona ZirChrom®-PHASE, 150 x 4,6 mm; 5 µm) a oxidu titaničitého (kolona Sachtopore®-NP, 150 x 4,6 mm; 5 µm) pro analýzy za podmínek chromatografie hydrofilních interakcí (HILIC). Během analýz byl zkoumán vliv síly mobilní fáze, vliv pH mobilní fáze a vliv síly pufru na separaci biologicky významných polárních látek: adenosinmonofosfát (AMP), adenosindifosfát (ADP), adenosintrifosfát (ATP), cyklický adenosinmonofosfát (cAMP), kreatin (C) a kreatinfosfát (CP). Analýzy byly prováděny za podmínek izokratické eluce. Mobilní fáze se vždy skládala z organické složky - acetonitrilu (ACN) a z vodné složky - pufru (hydrogenfosforečnan disodný - Na2HPO4 s fluoridem sodným - NaF) v různých poměrech. Rychlost průtoku mobilní fáze byla 1 ml/min. Detekce analytů byla prováděna pomocí detektoru diodového pole při vlnových délkách 215 nm pro C a CP a 254 nm pro AMP, ADP, ATP a cAMP. S rostoucím podílem organické složky v...
|
|
|
Hodnocení vybrané účinné látky v přípravku VII.
Šalamounová, Anna ; Kastner, Petr (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
SOUHRN Hodnocení vybrané účinné látky v přípravku VII Diplomová práce Anna Šalamounová Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Byly hledány vhodné metody pro stanovení cinchokainu hydrochloridu a pro hodnocení čistoty dexamethasonu v tekutém přípravku za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Použila se monolitická kolona Chromolith Speed ROD RP- 18e 50-4.6. Pro cinchokain se jako mobilní fáze zvolila směs vody, acetonitrilu, triethylaminu v poměru 50:50:0,1575; pH mobilní fáze se nastavilo kyselinou fosforečnou na hodnotu 7,0. Průtoková rychlost byla 3 ml/min, teplota kolony 25 řC, nástřik 5 µl a UV detekce při 325 nm. Za těchto podmínek byla prozkoušena linearita, selektivita, přesnost a správnost metody. Pro hodnocení čistoty dexamethasonu byla zvolena gradientová eluce . Mobilní fáze A: Voda, acetonitril (80:20) a mobilní fáze B v poměru 93:7; pH mobilní fáze nastaveno kyselinou fosforečnou na hodnotu 7,0. Mobilní fáze B: Voda, acetonitril v poměru 75:25; 1,05 ml triethylaminu na 250ml vody; pH mobilní fáze nastaveno kyselinou fosforečnou na hodnotu 7,0. Průtok byl 4 ml/min, teplota kolony 25 řC, nástřik 50 µl a UV detekce při 238 nm. Prokázala se přesnost metody, selektivita a linearita. 67
|
|
|
Hodnocení kafru v masti s využitím monolitické kolony
Voříšková, Michaela ; Kastner, Petr (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
SOUHRN Hodnocení kafru v masti s využitím monolitické kolony Rigorózní práce Mgr. Michaela Voříšková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Byla vyvinuta HPLC metoda pro stanovení kafru v léčivém přípravku Unguentum camphoratum 10% s použitím monolitické stacionární fáze. Oproti metodě na klasické náplňové koloně došlo ke zkrácení doby analýzy na cca 1,3 minut. Byla použita chromatografická kolona Chromolith Speed rod, RP-18e 50-4,6 mm a chromatografická předkolonka Chromolith, RP-18e 10-4,6 mm s mobilní fází voda a methanol v poměru 35 : 65. K detekci byl použit UV detektor s nastavenou vlnovou délkou 289 nm. Metoda byla validována z hlediska správnosti (recovery = 99,03 %), přesnosti (RSD = 0,83 %), linearity (R = 0,9995 ) a selektivity. Na závěr byla vyvinutá metoda otestována při analýze kafru v dalších přípravcích.
|
|
|
HPLC hodnocení vybraných léčiv V.
Kašková, Jana ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Sochor, Jaroslav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: Jana Kašková Konzultant: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Název diplomové práce: HPLC hodnocení vybraných léčiv V. Předmětem této diplomové práce je hledání vhodných chromatografických podmínek pro HPLC analýzu tablet obsahujících kombinaci léčivých látek, jimiž jsou amlodipin- besilat a atorvastatin a následné stanovení jejich obsahu v těchto tabletách. Nejvhodnější stacionární fází byla zvolena kolona 125x4 mm I. D. s náplní Nucleosil 120-5 C 18, Macherey-Nagel a nejvhodnější mobilní fází směs o složení: acetonitril - roztok dodekahydrátu hydrogenfosforečnanu sodného (0,025 mol/l) v poměru 55:45, okyselená kyselinou fosforečnou na pH 4,4 o průtokové rychlosti 1,0 ml/min a při teplotě 25řC. Nejvhodnějším vnitřním standardem této analýzy byl zvolen propylparaben. Detekce probíhala při vlnové délce 210 nm za použití UV-VIS detektoru. Při stanovení obsahu léčivých látek v tabletách, bylo zjištěno, že se tyto látky eluují v pořadí: propylparaben, atorvastatin a amlodipin-besilat.
|
|
|
Využití HPLC v analýze léčiv II
Holásková, Petra ; Kučera, Radim (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
Vitamíny jsou přírodní látky, které se nacházejí v rostlinách i živočiších. Až na několik výjimek si je lidské tělo nedokáže samo syntetizovat. Proto musí být dodávány potravou nebo potravinovými doplňky. Vitamíny jsou spolu s bílkovinami, tuky a sacharidy nezbytné pro růst, vitalitu, prevenci a léčbu mnoha zdravotních potíží a nemocí. Denní potřeba vitamínů je velmi nízká (jen několik miligramů či mikrogramů). Tudíž metody pro separaci či stanovení vitamínů např. z potravinových doplňků musí být vysoce citlivé. Mezi takové patří i vysokoúčinná kapalinová chromatografie s elektrochemickou detekcí. Diplomová práce se zabývá naleznutím optimálních podmínek pro separaci kyseliny listové, biotinu a vitamínu B12. Jedná se o vitamíny skupiny B, rozpustné ve vodě. Nejčastějšími zdroji je maso, vejce, pivovarské kvasnice nebo luštěniny. Při separaci byla použita chromatografická kolona Lichrospher 60, RP - select B (240 x 4,0 mm i.d., 5 μm) od firmy Merck. Analýza probíhala s využitím elektrochemického detektoru Coulochem III. Průtoková rychlost byla 1 ml/min a napětí na pracovních elektrodách bylo 600mV a 900 mV. Citlivost detektoru byla 1 μA. Byla zvolena mobilní fáze obsahující 24% methanolu. Anorganická fáze byla tvořena fosfátovým pufrem o koncentraci 0,05M. pH bylo upraveno na 3,55. PDF created
|
|
|
Léčiva využívaná v současnosti ke kontrole varroázy včel a experimentální ověření kombinace vybraných léčiv
Černý, Jan ; Lamka, Jiří (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
Práce shrnuje všechny možnosti kontroly varroázy včel s přednostním zaměřením na léčiva a na základě dostupných publikovaných prací poskytuje jejich přehled včetně souvisejících charakteristik. V experimentální části bylo cílem vyhodnotit potencionální přínos kombinace kyseliny mravenčí a thymolu jako dvou vybraných léčiv s účinností proti původci varroázy včel. Z výsledků plyne, že akaricidní účinek po jedné aplikaci kyseliny mravenčí samotné byl 51 % celkové populace roztočů, v kombinaci kyseliny mravenčí s thymolem 69 % (p = 0,099). Tento výsledek naznačuje potencionální přínos vzájemné kombinace obou látek - nárůst účinnosti o 18 %, účinky této kombinace však nebylo možné porovnat s literárními daty. K ověření tohoto poznatku by bylo třeba zajistit větší statistický soubor dat - tedy včelstev, na kterých by bylo potvrzeno či vyvráceno pozorování v této práci uvedené.
|
|
|
HPLC hodnocení vybraných léčiv II
Vyroubal, Petr ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Sochor, Jaroslav (oponent)
SOUHRN HPLC hodnocení vybraných léčiv II. DIPLOMOVÁ PRÁCE Petr Vyroubal Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv V této diplomové práci byla validována metoda pro současnou HPLC analýzu paracetamolu a tramadolu v kombinované tabletě. Jako stacionární fáze byla použita chromatografická kolona Discovery HS F5, 5 µm, 150×3 mm I.D. od firmy Supelco. Mobilní fázi tvořila směs acetonitril : roztok octanu amonného 0,005 mol/l, okyselený kyselinou octovou na pH 3,2 v poměru 20 : 80 (v/v). Průtoková rychlost byla 1,0 ml/min. Jako vnitřní standard byla použita kyselina acetylsalicylová. Detekce byla prováděna při λ = 270 nm pomocí UV detektoru. Látky byly eluovány v následujícím pořadí: paracetamol, kyselina acetylsalicylová a tramadol. Metoda byla validována z hlediska linearity (paracetamol R = 0,9996; tramadol R = 0,9998), přesnosti (paracetamol RSD = 0,31 %; tramadol RSD = 0,70 %), správnosti (paracetamol recovery = 99,49 %; tramadol recovery = 98,90 %) a robustnosti.
|
|
|
Využití různých extrakčních technik při HPLC hodnocení vybraných léčiv
Kračmarová, Alžběta ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Pohanka, Miroslav (oponent)
Souhrn Byla vypracována metoda pro stanovení atypického antipsychotika amisulpridu v králičí plazmě pomocí HPLC na reverzních fázích. Amisulprid je substituovaný derivát benzamidu, který působí jako selektivní antagonista lidských dopaminových D2 a D3 dopaminových receptorů. Používá se pro léčbu pozitivních i negativních symptomů schizofrenie s relativně nízkým rizikem vzniku nežádoucích účinků. Pro jeho stanovení byla použita chromatografická kolona 150 mm x 4 mm (i. d.) s náplní Separon SGX C18, velikost částic 7μm, mobilní fáze o složení acetonitril - 0,1M octan amonný (pH 5,6) 60:40 (v/v) a ambroxol jako vnitřní standard. HPLC analýze předcházela extrakce na pevných fázích. Metoda je lineární v rozsahu koncentrací 200-800 ng/ml (rovnice přímky y=0,0065x-0,0695, korelační koeficient r2 =0,9930), selektivní a robustní. Čas analýzy je 11 min. Teoretická část práce se podrobněji zaměřuje na techniky zpracování vzorku, které tvoří klíčový krok v HPLC analýze biologického materiálu.
|
host ::
RSS.