|
| |
|
|
Determination of permeability and active transport of selected butyrylcholinesterase inhibitors in vitro
Machan, Radek ; Červený, Lukáš (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Student: Radek Machan Školitel: PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení permeability a aktivního transportu vybraných inhibitorů butyrylcholinesterázy in vitro Evropská léková agentura (European Medicine Agency; EMA) a Úřad pro potraviny a léčiva (Food and Drug Administration; FDA) kladou důraz na prozkoumání permeability léčiv skrz biologické membrány a jejich interakcí s ABC transportéry, které jsou fyziologickými bariérami produkovány, ať už v rámci preklinického testování léčiv nebo u molekul, které jsou již klinicky užívány, avšak chybí u nich důkazy o těchto parametrech. Cílem této práce bylo zhodnotit schopnost několika experimentálních inhibitorů butyrylcholinesterázy, které byly vytvořeny za účelem léčby demence, prostupovat skrze hematoencefalickou bariéru a objasnit význam transportních proteinů ABC rodiny (ATP-binding cassette/ABC transporters) v tomto přenosu. Při této práci byla využita in vitro obousměrná transportní studie přes monovrstvy tvořené polarizovanými a vysoce diferenciovanými Caco-2 buňkami. Hodnoty permeability získané z těchto měření byly podobné hodnotám několika běžně užívaných léčiv pro terapii CNS nemocí (např. antidepresiv, antiepileptik)....
|
|
|
Model mozkové fokální korové ischémie a jeho parametrizace
Svoboda, Jan ; Otáhal, Jakub (vedoucí práce) ; Konopková, Renata (oponent)
Název práce: Model mozkové fokální korové ischémie a jeho parametrizace Cíle práce: Cílem této diplomové práce bylo aplikovat upravený model mozkové fokální korové ischémie indukovaný fototrombózou a následně ho parametrizovat. Metodika: Intravenózní aplikaci fotosenzitivního barviva "bengálská červeň" následovalo kontinuální ozáření oblasti senzomotorického kortexu levé hemisféry zeleným laserem a to po dobu 10 minut. Po osvětlení se barvivo aktivuje a produkuje singletový kyslík, který poškozuje endoteliální buněčné membrány. Následně dochází k agregaci krevních destiček a tvorbě trombinu, který nakonec zapříčiní přerušení lokálního krevního zásobení. Tento přístup byl původně představen Ressenblumem a El - Sabbanem v roce 1977 a později v rámci experimentů s potkany vylepšen Watsonem v roce 1985. Pro účely histologického vyhodnocení ischemického poškození mozku byla zvířata předávkována uretanem a podrobena transkardiální perfuzi. Výsledky: Histologické vyšetření mozků prokázalo významné ischemické poškození korových oblastí u všech experimentálních zvířat. Léze byla lokalizována v levé hemisféře a v různém rozsahu pronikala šedou hmotu mozku. Rozsah léze, lokalizace a hlouba vykazovala v rámci jednotlivých skupin pouze malou variabilitu. Znatelné rozdíly vyšly najevo až při vzájemném porovnání...
|
|
|
Akutní neurozánětlivá reakce po fokální mozkové ischémii
Ambrož, Ondřej ; Otáhal, Jakub (vedoucí práce) ; Konopková, Renata (oponent)
Název práce: Akutní neurozánětlivá reakce po fokální mozkové ischémii Cíle práce: Cílem této diplomové práce je zhodnotit neurozánětlivou reakci po mozkové fokální korové ischemizaci. Dále seznámení se s metodou zobrazení poškození hematoencefalické bariéry, neuronů a možností detekce buňek mikroglií, jakožto markerem akutních neurozánětlivých pochodů. Metodika: Jedná se o experimentální studii. U laboratorních potkanů jsme vyvolali mozkovou korovou ischémii pomocí i.v. aplikace fotosensitivního barviva "bengálská červeň" a zeleného laseru. U dvou zvířat byla ještě aplikována "Evansova modř" i.v. Zvířata byla navrácena do klece na potřebnou dobu, než jim byla navozena terminální anestezie. Následoval proces mozkové perfuze, nakrájení mozků na řezy silné 50 µm a nanesení řezů na podložní skla. Řezy s aplikovanou EB byly ihned analyzovány pod mikroskopem. Řezy ke znázornění zániku neuronů byly imunohistochemicky nabarveny Nisslovou metodou. Řezy k vizualizaci mikrogliální aktivity byly obarveny pomocí protilátky CD11b. Výsledky: Po navození fokální ischémie dochází k poškození mozkové tkáně. V okolí léze dochází k degeneraci neuronů a poškození hematoencefalické bariéry, která zvyšuje svojí permeabilitu pro makromolekulární látky. Dále dochází k aktivaci buněk mikroglií, které akutně obstarávají...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Stanovení oxinů v biologických materiálech metodou HPLC
PROCHÁZKA, Petr
Reaktivátory acetylcholinesterázy hrají významnou v terapii otrav způsobené organofosfáty. V současné době je testována celá řada z hlediska schopnosti prostupovat přes hematoencefalickou bariéru (HEB). Cílem této práce bylo otestovat tuto schopnost u čtyřech známých reaktivátorů {--} HI-6, K-027, K-074 a TO-032. Dávka 5%LD50 (terapeutická dávka) každého reaktivátoru byla aplikována experimentálním zvířatům (potkan Wistar rat) i.m. do pravého zadního stehna. Poté byla zvířata obětována a byl odebrán mozek a krev (plasma) pro HPLC analýzy. Mozek byl následně zmražen na -80 °C až do doby před samotnou analýzou. Koncentrace reaktivátorů byly měřeny v plasmě a čtyřech částech mozku {--} frontální kůře (FC), bazálních gangliích (BG), pontomedulární oblasti (PM) a mozečku (Ce). Pro účely experimentu bylo do jednotlivých skupin zařazeno pět zvířat. Ke stanovení koncentrací reaktivátorů v plasmě a mozku byla použita metodika HPLC-UV/VIS. Koncentrace HI-6 CFC byla vypočítána na 4,29% vzhledem k Cprům. v plazmě, CBG byla průměrně 1,9% vzhledem k Cprům. v plazmě, CPM byla průměrně 2,3% vzhledem k Cprům. v plazmě a CCe byla průměrně 1,85% vzhledem k Cprům. v plazmě. Tyto poměry byly vypočteny ze všech zjištěných koncentrací v rámci jednotlivých sledovaných částí mozku. Ostatní sledované reaktivátory nebyly v mozku kvantifikovány vůbec.
|
host ::
RSS.