|
|
Využití LC/MS pro studium biotransformace xenobiotik u helmintů
Vokřál, Ivan ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Lísa, Miroslav (oponent) ; Horák, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát Mgr. Ivan Vokřál Školitel Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název disertační práce Využití LC/MS pro studium biotransformace xenobiotik u helmintů Parazité každoročně způsobují mnoho ztrát na lidských životech, ale i na hospodářských zvířatech. Jednou z efektivních zbraní, které proti nim můžeme využít, jsou anthelmintika. V řadě případů však anthelmintika přestávají působit a dochází k rozvoji rezistence. Jednou z možných příčin vzniku rezistence je inaktivace léčiva na neaktivní nebo málo aktivní produkty pomocí biotransformace enzymatickým systémem parazita. Cílem této práce bylo přinést nové poznatky o biotransformaci léčiv u helmintů. Důraz byl kladen na vztah biotransformace k rezistenci. Jednou z možných technik, jak tohoto cíle dosáhnout, je studovat přímo produkty biotransformace, tedy metabolity. V dnešní době se tato problematika nejčastěji řeší za pomoci kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie a proto i pro splnění našich cílů byla tato technika využita. Byly studovány biotransformace u zástupců tasemnic, motolic a hlístic. Tam, kde to bylo možné, byli studováni zástupci hospodářsky významní jako vlasovka slézová (Haemonchus contortus) nebo motolice kopinatá (Dicrocoelium...
|
|
|
Revmatická horečka a její farmakoterapie
Davidová, Kristýna ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Kristýna Davidová Školitel: PharmDr. Mladěnka Přemysl, Ph.D. Název diplomové práce: Revmatická horečka a její farmakoterapie Revmatická horečka (RH) je celkové zánětlivé onemocnění vznikající jako následek neléčené tonzilofaryngitidy způsobené β-hemolytickým streptokokem skupiny A. Jedná se o autoimunitní odpověď organismu, kdy dochází k produkci protilátek proti bakteriálním antigenům, které současně rozeznávají humánní cíle v důsledku podobnosti s proteinem M ve stěně β-hemolytických streptokoků a tím poškozují tkáně nemocného. Onemocnění postihuje řadu orgánů jako klouby, centrální nervový systém, podkožní tkáň, kůži, ale trvalé následky zanechává pouze na srdci. Běžně nejsou přítomny všechny projevy, u dětí je častější karditida a chorea, u dospělých artritida. Chronická revmatická choroba srdeční jako následek revmatické karditidy způsobuje vysokou morbiditu a mortalitu v rozvojových zemích, kde je její výskyt nejvyšší. Specifická léčba RH neexistuje. Používáme pouze symptomatické prostředky nebo preventivní léčbu. U akutní revmatické horečky (ARH) jsou taky důležitá režimová opatření zahrnující klid na lůžku. Symptomaticky používáme salicyláty u artritidy při ARH, u těžších případů...
|
|
|
Porovnání metabolismu anthelmintik a aktivit biotransformačních enzymů u citlivých a rezistentních kmenů vlasovky slézové
Lasotová, Tamara ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Tamara Lasotová Školitel: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Porovnání metabolismu anthelmintik a aktivit biotransformačních enzymů u citlivých a rezistentních kmenů vlasovky slézové Haemonchus contortus je dominující gastrointestinální parazit u ovcí a koz. Tento krev sající parazit způsobuje těžké anémie, které zpravidla končí smrtí, zvláště u mladých zvířat. Největším problémem ve farmakoterapii haemonchózy je rezistence na anthelmintika, která je dnes celosvětově rozšířená. Biotransformační enzymy jsou schopné inaktivovat anthelmintika pomocí biotransformace, což přispívá k rozvoji rezistence helmintů. Cílem diplomové práce bylo porovnání metabolismu anthelmintik a aktivit biotransformačních enzymů u citlivých a rezistentních kmenů H. contortus. Pro testování byly vybrány tři kmeny H. contortus: citlivý na anthelmintika - ISE kmen, rezistentní na benzimidazolová anthelmintika - IRE kmen, rezistentní na všechna anthelmintika - WR kmen. Výsledky ukázaly, že aktivita enzymů redukujících karbonylovou skupinu modelových substrátů je vyšší u rezistentních kmenů než u citlivého kmene, na rozdíl od biotransformace albendazolu a flubendazolu in vitro, kde vyšly výsledky opačné....
|
|
|
K farmakokinetice jednorázového podání albendazolu u muflona
Vokřál, Ivan ; Lamka, Jiří (vedoucí práce) ; Ducháček, Lubomír (oponent)
Tato práce se snaží přispět k poznatkům o farmakokinetice albendazolu u muflona evropského (Ovis gmelini musimon) po jednorázovém podání albendazolu v dávce 30 mg/kg. Byly provedeny dva experimenty. První experiment byl uskutečněn na souboru 12 zvířat, ta byla rozdělena do 4 skupin. Jednotlivé skupiny zvířat byly postupně utráceny v intervalu 4, 6, 8 a 10 hodin od podání albendazolu. Odebrány byly vzorky séra, žluče že zlučníku a žlučovodů. Koncentrace albendazolu (ABZ) a metabolitů albendazolsulfoxidu (ABZSO) a albendazolsulfonu (ABZSO2) byly měřeny pomocí HPLC metody. Pro zjištění poměru jednotlivých enantiomerů ABZSO pak byla použita HPLC metoda s chirální kolonou. Druhý experiment na 2 zvířatech měl pouze rozšířit a potvrdit předchozí výsledky. Z výsledků studie je patrný vzestup krevních koncentrací albendazolu a jeho metabolitů až do osmé hodiny po podání. Následně je již patrný pokles. Koncentrace ABZSO a ABZSO2 se mezi žlučí ze žlučníku a žlučovodů liší minimálně. Průměrná maximální koncentrace ABZSO ve žluči je 3,6 μg/ml pro žlučník a 3,3 μg/ml žlučovody. Poměr enantiomerů ABZSO (-) a ABZSO (+) je ve všech vzorcích posunut výrazně k ABZSO (+). Poměr enantiomerů v průběhu sledování není konstantní. Klíčová slova : albendazol, Ovis musimon, farmakokinetika, HPLC
|
|
|
Differential reactivity of the longitudinal and circular muscle of the rat distal colon
Kubíčková, Růžena ; Vokřál, Ivan (vedoucí práce) ; Říha, Michal (oponent)
(čj) Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Růžena Kubíčková Školitelé: Prof. Manuela Morato PharmDr. Ivan Vokřál, PhD. Název diplomové práce: Diferenciální reaktivita podélného a příčného svalu distálního tračníku potkana Fyziologická funkce tlustého střeva je regulovaná neurohumorálně. Neurální část této regulace tvoří vegetativní nervový systém, který je zásadní pro kontrolu motility trávicího systému. Co se týče humorální části regulace, současné studie ukázaly, že Ang II způsobuje stah hladkého svalu tračníku, může tedy ovlivnit jeho motilitu. Avšak nejsou známy žádné studie, které by tento děj detailně popisovaly. Cílem této práce bylo (1) posoudit reaktivitu longitudinálního a cirkulárního svalu distálního tlustého střeva na KCl, ACh a Ang II, (2) charakterizovat receptory zapojené v odpovědi na Ang II a (3) porovnat rozdíly mezi samčím a samičím pohlavím. Experimenty byly prováděny na dospělých potkanech kmene Wistar Han obou pohlaví. Preparáty longitudinální a cirkulární svaloviny z oblasti distálního tlustého střeva byly testovány za pomoci metody standartní orgánové lázně. U obou pohlaví cirkulární sval reaguje na námi testované látky (KCl, ACh, Ang II) více než sval longitudinální. V odpovědi na KCl, ACh a Ang II...
|
|
|
Využití hmotnostní spektrometrie pro identifikaci metabolitů anthelmintik u parazitujících červů
Komrska, Jan ; Vokřál, Ivan (oponent) ; Skálová, Lenka (vedoucí práce)
Jestliže chceme být úspěšní v léčbě parazitárních onemocnění, je důležité získat co nejvíce informací o osudu podaného léčiva. Zjištění metabolických drah anthelmintik a zúčastněných enzymů parazitů nám může pomoci v boji se vznikající rezistencí na dané látky. Cílem naší práce bylo najít a identifikovat metabolity I. a II. fáze anthelmintik albendazolu (ABZ), flubendazolu (FLU) a mebendazolu (MEB) vzniklé při ex vivo inkubacích s parazitem motolicí kopinatou (Dicrocoelium dendriticum), za použití LC-MS techniky. V ex vivo studii byli dospělci motolice kopinaté inkubováni v živném médiu společně s benzimidazolovým anthelmintikem po dobu 24 hodin. Po skončení inkubace byly homogenáty parazitů a vzorky media extrahovány na pevné fázi. Extrakty byly následně analyzovány vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií s hmotnostně-spektrometrickou detekcí (LC-MS). Jako metabolity první fáze jsme detekovali albendazolsulfoxid, redukovaný flubendazol a redukovaný mebendazol. Jako metabolity druhé fáze jsme zaznamenali methylderiváty flubendazolu, redukovaného flubendazolu a redukovaného mebendazolu.
|
|
|
Obranné mechanismy motolice kopinaté před účinky anthelmintik
Ballóková, Anna ; Vokřál, Ivan (oponent) ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Anna Ballóková Školitel: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Obranné mechanismy motolice kopinaté před účinky anthelmintik Dikrocelióza, helmintóza způsobená motolicí kopinatou (Dicrocoelium dendriticum), je celosvětově významné onemocnění postihující zejména hospodářské ale i volně žijící přežvýkavce. V současnosti jediným možným prostředkem v boji s touto parazitózou je podávání anthelmintik. Benzimidazolové anthelmintikum albendazol je motolicí kopinatou metabolizováno na albendazolsulfoxid, ale dosud není známo, které enzymy jsou za tuto oxidaci zodpovědné. Tato práce se zaměřila na identifikaci enzymů účastnících se metabolizmu albendazolu u motolice kopinaté izolované z jater přirozeně infikovaných muflonek (Ovis Musimon). K určení účasti enzymů na sulfoxidaci albendazolu bylo použito specifických inhibitorů jednotlivých enzymů. Jako jediné účinné inhibitory použité v této práci byly α-nafthylthiourea a methimazol, specifické inhibitory pro flavinmonooxygenasy. Indol-3-karbinol, který byl použit také jako specifický inhibitor tohoto enzymového systému, se jevil jako neúčinný. Dále byly použity inhibitory 3˗amino-1,2,4-triazol pro katalasu, diethyldithiokarbamát a...
|
|
|
Virové hepatitidy a jejich farmakoterapie
Klímková, Martina ; Vokřál, Ivan (oponent) ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce)
14. Abstrakt Virové hepatitidy patří v dnešní době mezi nejčastější infekční onemocnění ve světě. Největší výskyt tohoto onemocnění připadá na státy jižní Ameriky, jižní Asie a Afriky. Přenáší se buď parenterálně (hepatitidy B, C, D) nebo fekoorální cestou (hepatitidy A, E). Po vstupu viru do organismu se spustí imunitní reakce, začnou se vytvářet protilátky, které většinou slouží k definitivnímu potvrzení diagnózy. Akutní projevy virových hepatitid zahrnují gastrointestinální dyskomfort, žloutenku, při komplikovaném nebo neléčeném průběhu onemocnění až selhání jater a úmrtí. Hepatitidy A a E nepřecházejí do chronicity a při uzdravení pacient nemá následky. Naopak chronické formy (hepatitidy B, C, D) způsobují dlouhodobé komplikace. Hepatitidy A a E nepotřebují žádnou protiinfekční terapii, stačí zajistit pouze symptomatologickou léčbu. Ostatní typy hepatitid už antivirovou léčbu vyžadují. Základem terapie je používání interferonů a syntetických nukleosidových analog. Interferony vyvolávají odpovídající imunitní odpověď a způsobují destrukci infikovaných hepatocytů. Syntetická analoga inhibují syntézu virové nukleové kyseliny. Pro léčbu hepatitidy B je používán pegylovaný interferon α. Běžně se kombinuje s nukleosidovými analogy (lamivudin, adefovir). Vývoj nových látek pokračuje. Některá syntetická analoga...
|
|
|
Srování účinků originálního a generického statinu
Francová, Soňa ; Vokřál, Ivan (oponent) ; Melicharová, Ludmila (vedoucí práce)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmakologie a Toxikologie Kandidát: Soňa Francová Školitel: PharmDr. Ludmila Melicharová Název diplomové práce: Srovnání účinků originálního a generického statinu Léčba dyslipidémie a hyperlipoproteinémie je dnes už samozřejmou součástí při primární i sekundární prevenci kardiovaskulárních onemocnění, které jsou stále jednou z nejčastějších příčin úmrtí populace České republiky. Za převrat v ovlivnění lipidového spektra může přes patnáct let starý objev skupiny hypolipidemik - statinů. Jejich potenciál se dále rozšiřuje díky stálému odhalování jejich nových extralipidových účinků, s čímž koresponduje i jejich rostoucí roční spotřeba. Ve studii byl srovnáván účinek originálního simvastatinu Zocor od firmy Merck & Co s generickým simvastatinem Simgal firmy IVAX. Cílem bylo porovnat jejich efektivnost a účinnost na hladiny cholesterolů v plazmě. Bylo provedeno jednoleté sledování u dvou skupin po deseti subjektech s dávkovacím režimem 1 × denně 20 mg u obou léčívých přípravků. Studie byla randomizovaná, otevřená, s uspořádáním "Cross over" po půl roce. Výstupní hodnoty plazmatických hladin cholesterolu ve studii prokázaly, že účinky výše jmenovaných přípravků se odlišovaly.
|
|
|
Metabolismus anthelmintik v rostlinách
Pavlík, František ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: František Pavlík Školitel: Prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Konzultant: RNDr. Radka Podlipná, Ph.D. Název diplomové práce: Metabolismus anthelmintik v rostlinách Anthelmintika vstupují do životního prostředí převážně s exkrementy právě léčených zvířat. Mohou způsobovat mnoho nežádoucích účinků v ekosystému, ovlivňovat necílové živočišné organismy, popřípadě se akumulovat v rostlinách. Po opětovné konzumaci těchto rostlin hospodářskými zvířaty na pastvě může dojít k rozvoji rezistence u helmintů. Tato práce je zaměřena na studium biotransformace často používaných anthelmintik flubendazolu (FLU), albendazolu (ABZ), fenbendazolu (FBZ), ivermektinu (IVM) a monepantelu (MOP) v typických lučních květinách zvonku okrouhlolistém (Campanula rotundifolia) a jitroceli kopinatém (Plantago lanceolata), které mohou na pastvách často přijít do kontaktu s anthelmintiky v exkrementech hospodářských zvířat. Jako in vitro modely byly použity buněčné suspenze zvonku okrouhlolistého a jitrocele kopinatého, dále pak in vitro regeneranty jitrocele kopinatého. Nebyl nalezen žádný toxický efekt anthelmintik na rostliny. Rostliny byly schopny metabolizovat anthelmintika do široké škály různých metabolitů, jejichž...
|
host ::
RSS.