|
| |
|
|
Studium lipidových membrán obsahujících lysolipidy jako modelů atopické dermatitidy
Pospíšilová, Markéta ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra anorganické a organické chemie Kandidát: Pospíšilová, Markéta Školitel: doc. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Název diplomové práce: Studium lipidových membrán obsahujících lysolipidy jako modelů atopické dermatitidy. Před vlivem škodlivého vnějšího prostředí jsme chráněni kožní bariérou, která je lokalizovaná ve stratum corneum, a která zároveň zabraňuje nadměrným ztrátám vody kůží. Nejdůležitější roli v bariérové funkci kůže mají ceramidy. Ceramidy jsou u zdravého člověka syntetizovány z glukosylceramidů a sfingomyelinů prostřednictvím enzymů glukocerebrosidázy a sfingomyelinázy. Pokud je ve stratum corneum ceramidů nedostatek, tedy, pokud tyto mechanismy fungují nedostatečně, rozvíjí se atopická dermatitida. Ve stratum corneum pacienta s atopickou dermatitidou jsou glukosylceramidy a sfingomyeliny hydrolyzovány glukosylceramid/sfingomyelin deacylázou za vzniku lysolipidů (glukosylsfingosinu nebo sfingosinfosforylcholinu) a volné mastné kyseliny. V této práci jsme připravili modely membrán, které napodobují složení lipidů stratum corneum pacienta s atopickou dermatitidou, tedy, ve kterých jsou ceramidy částečně (25 % - 75 %) nebo úplně nahrazeny lysolipidy. Modelové membrány byly připraveny jako ekvimolární směs lysolipidů...
|
|
|
Isostery Transkarbamu 12 jako akceleranty transdermální penetrace
Šíma, Martin ; Hrabálek, Alexandr (vedoucí práce) ; Vávrová, Kateřina (oponent)
SOUHRN: Diplomová práce - Isostery Transkarbamu 12 jako akceleranty transdermální penetrace Transkarbam 12 [5-(dodecyloxykarbonyl)pentylammonium-5-(dodecyloxykarbo- nyl)pentylkarbamát, T12] je akcelerant transdermální penetrace vykazující vysokou biologickou aktivitu. V této diplomové práci byly připraveny analogy T12 s karbamátovou a karbonátovou funkční skupinou místo esterové, a otestovány in vitro jako akceleranty transdermální penetrace na štěpech excidované prasečí kůže za použití theofilinu jako modelového léčiva. Výsledky byly vyjádřeny akceleračním poměrem a porovnány s biologickou aktivitou T12. Akcelerační aktivita klesala v pořadí ester, karbonát, karbamát. Výsledky tedy ukazují, že esterová funkční skupina v molekule T12 má pro jeho mimořádný účinek zásadní význam. Navíc byly hodnoceny homology s různou délkou spojovacího i koncového řetězce. Zatímco délka spojovacího řetězce se na biologické aktivitě signifikantně neprojevila, nonylové až decylové koncové řetězce vykazovaly největší akcelerační schopnost. To ukazuje, že pro účinek akcelerantu má význam vlastní délka řetězce, nikoliv jeho lipofilita.
|
|
|
Syntéza a studium 1-O-acylceramidů
Jon, Vojtěch ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Opálka, Lukáš (oponent)
Extracelulární matrix nejsvrchnější vrstvy kůže tzv. stratum corneum (SC), je složena z ceramidů (Cer), cholesterolu (Chol), volných mastných kyselin (FFA) a cholesterol-sulfátu (CholS). Cer hrají důležitou roli ve správné bariérové funkci savčí epidermis. V nedávné době byl v lidské SC nalezen nový typ sfingolipidů tj. 1-O-acyl-Cer, jejich role v SC je však neznámá. Tyto druhy Cer tvoří sfingosin (S), jenž je N-acylován nehydroxylovanou nebo α- hydroxylovanou mastnou kyselinou a navíc je hydroxy skupina v poloze 1 sfingosinu acylována další mastnou kyselinou (lignocerovou kyselinou, C24 nebo palmitovou kyselinou, C16). Protože 1-O-acyl-Cer nejsou komerčně dostupné, dali jsme si za cíl připravit fyziologické 1-O-acyl-Cer tj. Cer-24NS16, Cer-16NS16 a Cer-24AS16. Naším dalším cílem je studium jejich vlivu na permeabilitu a mikrostrukturu modelových kožních lipidových membrán. 1-O-acyl-Cer byly syntetizovány acylací primárního hydroxylu Cer-NS16 nebo Cer-AS16 palmitovou nebo lignocerovou kyselinou pomocí N-(3-dimethylaminopropyl)-N'- ethylkarbodiimidu s 4-dimethylaminopyridinem. Cer-AS16 byl připraven α-bromací palmitové kyseliny, substitucí bromidu hydroxylovou skupinou a N-acylací sfingosinu touto připravenou kyselinou v přítomnosti N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu a 1-...
|
|
|
Syntéza ceramidů s deuterovaným sfingosinovým řetězcem
Havlíčková, Kateřina ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Hrabálek, Alexandr (oponent)
Ceramidy jsou komplexní skupina lipidů patřící mezi sfingolipidy. Tvoří nejdůležitější složku stratum corneum (SC) a podílí se tak na ochranné funkci kůže. Přestože jsou ceramidy předmětem intenzivního výzkumu, přesný vliv jejich struktury na bariérovou funkci kůže dosud není znám. Ke studiu struktury, vlastností a dynamiky lipidových membrán SC jsou často využívána deuteriem značená analoga lipidů. Mezi metody využívající deuterované molekuly patří neutronový rozptyl, vibrační spektroskopie (infračervená spektroskopie FTIR a Ramanova spektroskopie), deuteriová nukleární magnetická rezonance (2 H-NMR) a hmotnostní spektrometrie ToF-SIMS. Tato práce popisuje syntézu ceramidu s deuterovaným sfingosinovým řetězcem. Získané ceramidy s různou délkou acylového řetězce (deuterovaného i nedeuterovaného) by měly být v budoucnu využity pro studium jejich vlastností v lipidových membránách SC. Syntéza vycházela z postupů běžně využívaných pro přípravu nedeuterovaných analogů ceramidů. Nejdůležitějším krokem syntézy bylo začlenění deuterovaného řetězce do molekuly sfingosinu. Z perdeuterovaného bromalkanu byl připraven deuterovaný terminální alkyn. V další reakci došlo k navázání deuterovaného terminálního alkynu na Garnerův aldehyd. Trojná vazba byla redukována na trans-dvojnou a následně došlo k odstranění...
|
|
|
Syntéza akcelerantů transdermální permeace na bázi derivátů piperidinkarboxylových kyselin
Fratričová, Veronika ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Hrabálek, Alexandr (oponent)
Akceleranty transdermální permeace jsou látky, které podporují průnik léčiva přes kůži na základě snížení její bariérové resistence. Předlohovou strukturou mnou syntetizovaných látek je molekula transkarbamu 12, tedy 5-(dodecyloxykarbonyl)pentylammonium-5- (dodecyloxykarbonyl)pentylkarbamát. Byly syntetizovány tyto sloučeniny: 2-(decyloxykarbonyl)piperidinium-bromid 2-(dodecyloxykarbonyl)piperidinium-bromid decylester kyseliny N-acetylpiperidin-2-karboxylové dodecylester kyseliny N-acetylpiperidin-2-karboxylové decylester kyseliny (R)-N-acetylpiperidin-2-karboxylové dodecylester kyseliny (R)-N -acetylpiperidin-2-karboxylové decylester kyseliny (R)-N -acetylpipeiridin-3-karboxylové dodecylester kyseliny (R)-N -acetylpiperidin-3-karboxylové 2-(decyloxykarbonyl)piperidinium-2-(decyloxykarbonyl)piperidin-1-karbamát 2-(dodecyloxykarbonyl)piperidinium-2-(dodecyloxykarbonyl)piperidin-1-karbamát Schopnost syntetizovaných látek urychlit transdermální permeaci modelového léčiva theofylinu přes prasečí kůži byla studována ve Franzových difuzních celách. Získané hodnoty akceleračních poměrů byly porovnány s výsledky strukturně blízkých látek popsaných v dřívějších diplomových pracích. Výsledky ukázaly, že nejméně aktivní jsou hydrobromidy, jejichž aktivita je srovnatelná s hydrobromidy esterů kyselin...
|
|
|
Vliv pH na transdermální permeaci adefoviru
Lorencová, Kateřina ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Doležal, Pavel (oponent)
Mgr. Kateřina Lorencová Rigorosní práce Vliv pH na transdermální permeaci adefoviru 2007 ABSTRAKT: Adefovir (PMEA) patří do skupiny acyklických nukleosid fosfonátů. U těchto látek byly prokázány různé biologické (např. antivirové, cytostatické, antiparasitické a immunomodulační) aktivity. Ve formě proléčiva adefovir dipivoxilu (PMEAd) byl nedávno schválen pro léčbu chronické hepatitidy B. Smyslem této práce bylo sledovat permeační charakteristiky 2% PMEA in vitro v širokém spektru pH za použití různých vehikul. Porovnávali jsme také permeační chování samotného PMEA nebo v přítomnosti akcelerantu transdermální permeace. Sledovali jsme také penetraci PMEA do prasečí kůže. Permeační experimenty 2% PMEA byly prováděny s využitím Franzových difusních cel a prasečí kůže plné tloušťky. Jako vehikulum byly použity tris, fosfátový pufr (PB) a voda, sledované pH bylo v rozmezí 3.4 až 8.8. Jako akceleranty transdermální permeace byly použity 1% dodecylester kyseliny 6-dimethylaminohexanové (DDAK) a Transkarbam 12, tj. 5- (dodecyloxykarbonyl)pentylammonium-5-(dodecyloxykarbonyl) pentylkarbamát (T12). Při pH 3.4 byly zjištěny hodnoty fluxu 1.8 ± 0.5, 0.2 ± 0.1 a 0.7 ± 0.4 μg/cm2 /h pro vzorky ve vodném roztoku, PB a tris. Koncentrace PMEA v kůži po 48 hodinách pro tyto vzorky byla 294 ± 75, 110 ± 39 a 178 ± 71 μg/g....
|
|
|
Syntéza nových kardioprotektivních chelátorů železa
Hrušková, Kateřina ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Roh, Jaroslav (oponent)
Oxidační stres se podílí na rozvoji mnoha závažných kardiovaskulárních onemocnění. Volné nitrobuněčné ionty železa slouží jako katalyzátor Haber-Weissovy a Fentonovy reakce mezi superoxidy a peroxidy a výrazně tak přispívají k tvorbě vysoce toxických hydroxylových radikálů a následně k buněčnému poškození. Chelátory železa hladinu volného železa snižují a jsou proto perspektivními látkami s možností využití při léčbě mnoha závažných onemocnění, mj. anthracykliny navozené kardiotoxicity. Velmi účinnými chelátory jsou látky ze skupiny aroylhydrazonů, např. salicylaldehyd-isonikotinoylhydrazon (SIH). Farmakokinetické studie těchto látek ale odhalily jejich nízkou stabilitu v plazmě. V této práci jsem připravila řadu derivátů SIH s cílem zvýšit stabilitu při zachování schopnosti chelatovat volné nitrobuněčné železo a stanovit vztahy mezi strukturou a aktivitou těchto látek. Základním principem při syntéze je záměna aldehydu za různě substituovaný keton, který potenciálně zvyšuje stálost hydrazonové vazby. SIH Reakce probíhaly dvěma metodami za katalýzy kyselinou octovou v prostředí vodného ethanolu. První metoda, konvenční ohřev na olejové lázni, vyžadovala dlouhou reakční dobu, proto byl navržen jiný postup, ohřev v mikrovlnném reaktoru. Jeho použitím se reakční časy značně zkrátily. Na základě...
|
|
|
Syntéza analogů ceramidů s různou délkou sfingosinu a hodnocení jejich vlivu na kožní bariéru
Školová, Barbora ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Hrabálek, Alexandr (oponent)
Ceramidy představují komplexní skupinu lipidů, přirozeně se vyskytujících v nejsvrchnější vrstvě epidermis, stratum corneum (SC). Tvoří hlavní složku mezibuněčné hmoty a jsou zodpovědné za bariérové vlastnosti kůže. S poklesem obsahu a změnami ve složení ceramidů souvisí onemocnění jako atopická dermatitida či psoriáza, která vedou ke snížení ochranné funkce kůže. Přestože je význam ceramidů znám, vztah mezi strukturou a účinkem na její bariérovou funkci stále není zcela objasněn. Dřívější studie naznačují vliv délky acylového řetězce na prostupnost kůže. Ukazuje se, že ceramidy s krátkým acylem ochranné vlastnosti narušují. Permeačním pokusům předcházela příprava analogů ceramidů s patnáctiuhlíkatým řetězcem, zastupujícím sfingosinovou část, a acylovou částí o délce 2, 4 a 6 uhlíků. Výchozí látkou syntézy byl N-chráněný methylester L-serinu, jenž byl ochráněn za vzniku cyklického acetalu a následně byl ester redukován na aldehyd. V přítomnosti HMPA došlo na karbonylovém uhlíku k navázání 1-alkynu a trojná vazba byla následně redukována na trans- dvojnou. Po odstranění chránících skupin byla aminoskupina acylována. Vliv připravených produktů na permeabilitu kůže byl hodnocen na prasečích kůžích ve Franzových difúzních celách pomocí dvou modelových léčiv - theofylinu a indometacinu. Donorové vzorky...
|
|
|
Syntéza a studium derivátů 6-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)hexanové kyseliny jako akcelerantů transdermální permeace léčiv
Kučera, Ondřej ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Nováková, Veronika (oponent)
Ondřej Kučera Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Syntéza a studium derivátů 6-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)hexanové kyseliny jako akcelerantů transdermální permeace léčiv Akceleranty transdermální permeace se používají ke zvýšení absorpce léčiv skrz kůži, zejména stratum corneum - nejsvrchnější vrstvu kůže. Mechanismus jejich účinku není zcela objasněn. Dá se však říci, že většina nejaktivnějších akcelerantů má amfifilní strukturu. V této práci jsme připravili a studovali fluorescenčně značené permeační akceleranty. Fluorescenční značka NBD (4-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol) je poměrně hydrofilní, a proto jsme ji použili jako hydrofilní hlavu námi navrženého potenciálního akcelerantu. Jako předloha nám sloužil dodecyl-6-(dimethylamino)hexanoát (DDAK). Takovýto akcelerant by nám mohl pomoci objasnit více o mechanismu účinku, protože umožní stanovit nebo i zobrazit, do jakých tkání mohou tyto látky pronikat. Připravili jsme tři estery 6-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)hexanové kyseliny (NBD-kyseliny) s alkyly o délce osmi, deseti a dvanácti uhlíků. Kyselina 6-aminokapronová reagovala s 4-chlor-NBD za vzniku NBD-kyseliny, a poté se sérií alkoholů, abychom dostali různé délky alkylových řetězců. Tyto estery jsme aplikovali na lidskou kůži ve...
|
host ::
RSS.