|
|
Metabolická studie sibutraminu
Link, Marek ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Holčapek, Michal (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
Obesity represents a serious problem especially in American and European populations. Pharmacotherapy in combination with a reduced calorie diet is recommended for obese patients as a multi-modal approach to weight loss. Sibutramine hydrochloride monohydrate represents one of the few established and well-proven agents available for treatment of obesity. It is sold as a racemic mixture under the trade-name Meridia, Reductil or Lindaxa. It acts as a monoamine reuptake inhibitor. The weight loss of patients induced by sibutramine is thought to be due to a combination of serotonin- and noradrenaline-mediated mechanisms that increase both satiety and energy expenditure. In organisms, sibutramine is rapidly demethylated to form metabolites M1 and M2. These metabolites contribute largely to the pharmacological effects of sibutramine and the pharmacokinetic characteristics of M1 and M2 were thoroughly studied in human plasma. Although sibutramine is widely used for the treatment of obesity almost ten years, the published information on the further metabolic fate of metabolites M1 and M2 as well as on the elimination of sibutramine from the body is almost exclusively limited to package inserts of the product. To address this issue we determined the routes of elimination of sibutramine in humans via urine. LC-API/MS...
|
|
| |
|
|
Optimalizace a validace LC/MS metody pro kvantitativní stanovení vybraných diuretik v lidském krevním séru
Světlíková, Zuzana ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Kovaříková, Petra (oponent)
Byla vytvořena a plně validována nová metoda pro kvantitativní stanovení hydrochlorothiazidu a chlortalidonu, jako užívaných diuretik a antihypertensiv, v lidském krevní séru. Tato tandemová metoda spojující kapalinovou chromatografii a hmotnostní spektrometrii (LC/MS/MS) je jednoduchá, rychlá, přesná, správná a selektivní. Analyty a vnitřní standard sulfadimethoxin byly extrahovány extrakcí kapalina-kapalina (LLE) směsí ethylacetát-dichlormethan (80:20, v/v). Chromatografická separace probíhala na koloně C8 s reverzní fází. Jako mobilní fáze byla použita směs acetonitrilu s 0,2 % kyselinou mravenčí, eluce byla gradientová. Analyty byly kvantifikovány hmotnostním spektrometrem (MS) s lineární iontovou pastí a za použití ionizace elektrosprejem (ESI). Ionizace diuretik proběhla negativním napětím, vnitřního standardu v pozitivním modu. Metoda je lineární v rozsahu 0,5-200 ng/ml pro hydrochlorothiazid a 0,5-500 ng/ml pro chlortalidon. Byla ověřena přijatelná přesnost a správnost u QC vzorků, jejichž koncentrace byly v rozsahu kalibrační křivky. Optimalizovaná a validovaná technika, popsaná v této diplomové práci, byla zavedena do klinické praxe na úseku toxikologie v Ústavu klinické biochemie a diagnostiky ve Fakultní nemocnici v Hradci Králové.
|
|
|
Analytické hodnocení biologicky aktivních látek chromatografickými metodami
Pasáková, Ivana ; Sochor, Jaroslav (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Holčapek, Michal (oponent)
Předkládaná disertační práce se zabývá vývojem a validací chromatografických metod vhodných pro hodnocení vybraných biologicky aktivních látek. Vzhledem k dominantnímu postavení metody HPLC ve farmaceutické analýze, byla pro hodnocení analytů zvolena právě tato metoda ve spojení s UV a MS detekcí. Teoretická část je zaměřena na použité chromatografické metody a problematiku řešenou v rámci experimentální práce. Nejprve je uveden stručný přehled všech chromatografických metod a následně je detailněji popsána nejběžnější analytická metoda HPLC. Poté je věnována pozornost hmotnostní spektrometrii, která se v posledních letech stala nepostradatelnou metodou nejen ve farmaceutické analýze. To především díky její vysoké citlivosti a možnosti získat strukturní informace o analytech. Kromě teoretického úvodu a popisu MS instrumentace je pozornost věnována také jejím aplikacím i novým trendům. Další kapitoly se věnují problematice transdermálního podání léčiv, specifikům antiretrovirální terapie a především hodnoceným analytům. Experimentální část je zpracována jako komentovaný soubor publikovaných prací a je rozdělena do dvou tematických celků. První celek tvoří tři práce zaměřené na analytické hodnocení nového akcelerantu transdermální penetrace - transkarbamu 12. Druhý celek je tvořen prací zabývající se...
|
|
|
Vývoj a validace nových HPLC metod pro stanovení specifických analytů v biologickém materiálu.
Urbánek, Lubor ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Karlíček, Rolf (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
1. SHRNUTÍ Předložená disertační práce představuje zajímavé spojení dvou na první pohled odlišných oborů, jakými jsou analytická chemie a medicína. Pohled druhý, podrobnější, však ukazuje, že oba obory si mohou být velmi blízké a při vzájemné spolupráci analytika a lékaře přináší užitek každému z nich. První část této práce se věnuje nejprve teoretickým základům HPLC a chromatografické instrumentaci. Jedná se o krátký přehled některých principů uplatňovaných v kapalinové chromatografii a stručné představení vybraných součástí HPLC. Vzhledem k tomu, že srdcem každého chromatografického systému je analytická kolona s určitým typem stacionární fáze, se další část práce zabývá různými typy kolon a sorbentů. Zvláštní kapitola je potom věnována monolitickým kolonám a materiálům, které představují jakýsi nový a netradiční směr v chromatografii. Výhody a nevýhody použití monolitních kolon jsou pak shrnuty v publikacích, které jsou součástí experimentální části (Příloha 1, 2 a 9). Závěr této technické části tvoří rešerše s přehledem nových trendů v oblasti kapalinové chromatografie jako jsou ultra účinná kapalinová chromatografie, kolony se sub-2-mikronovými částicemi či automatizace a miniaturizace celých systémů. Druhá část disertační práce se zabývá sběrem a úpravou biologického materiálu. Jsou zde diskutovány...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metod pro analýzu léčivých přípravků
Matysová, Ludmila ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Karlíček, Rolf (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
6. Shrnutí Tato disertační práce je věnována vývoji HPLC metod, které splňují všechny požadavky kladené na vhodnost, přesnost a správnost, pro analýzu farmaceutických přípravků. Doložení těchto vlastností metody je proces, který se nazývá validace. Předložená práce nejprve pojednává o teoretických základech chromatografie jako takové, s důrazem na chromatografii kapalinovou, včetně HPLC. Popisuje instrumentaci v HPLC, kde jsou zmíněny i nové trendy ve vývoji stacionárních fází, ať už se jedná o monolitické kolony, stacionární fáze na bázi oxidu zirkoničitého, HILIC stacionární fáze a sub-2-mikronové kolony. Je zde i část věnovaná UPLC, jednomu z dalších trendů ve vývoji kapalinové chromatografie. V další části je probírán vývoj HPLC metod pro analýzu farmaceutik a také kapitola, věnující se analýze léčivých přípravků, včetně přípravy vzorků k analýze, sledování stabilit léčivých přípravků a část, která se věnuje analýze nečistot. Poslední poměrně rozsáhlá kapitola teoretické části této práce se věnuje validacím analytických metod. Požadavky na validace se zabývá několik autorit, které vydávají závazné normy a/nebo doporučení, jimiž je třeba se během tohoto procesu řídit. V České republice je to Státní ústav pro kontrolu léčiv (SÚKL - Věstník SÚKL, ČL 2005). V Evropské unii jsou validace zmíněny v Evropském...
|
|
|
Strukturní obměny transkarbamů - syntéza a sledování vlastností a biologické aktivity se zaměřením na objasnění mechanismu účinku
Klimentová, Jana ; Hrabálek, Alexandr (vedoucí práce) ; Csöllei, Jozef (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
SOUHRN Mezi úkoly řešené dlouhodobě na Katedře anorganické a organické chemie Farmaceutické fakulty Univerzity Karlovy patří mimo jiné také syntéza a testování účinnosti látek s potenciální aktivitou akcelerantů transdermální permeace. V posledním desetiletí zde byly připraveny estery kyseliny 6-aminohexanové a jejich analogy s vysokou akcelerační účinností. V současnosti jsou hledány bližší vztahy mezi jejich strukturou a účinkem. Příspěvkem k této problematice je i tato práce, která se týká hledání mechanismu účinku jednoho z nejúčinnějších připravených derivátů, transkarbamu 12 (T12). Akceleranty transdermální permeace jsou látky usnadňující vstup léčiva přes kůži. Jejich možné mechanismy účinku zahrnují narušení uspořádané struktury stratum corneum, zvýšení rozpustnosti léčiva ve vehikulu nebo zvýšení jeho rozdělování do stratum corneum. Přesný mechanismus většinou není znám. T12 je sůl karbamové kyseliny odvozená od dvou molekul dodecylesteru kyseliny 6- aminohexanové. V mírně kyselém prostředí (jaké se nachází například ve stratum corneum, jeho místě účinku) se snadno rozkládá za uvolnění CO2 a volného aminoesteru. S cílem zjistit, zda tato schopnost souvisí s vysokou aktivitou, byla připravena série látek s CO2 kovalentně vázaným v polární hlavě (estery kyseliny uhličité, karbamové a šťavelové)....
|
|
|
Separace a stanovení farmaceuticky významných látek s využitím elektroforetických metod
Hamoudová, Rafífa ; Pospíšilová, Marie (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Jokl, Vladimír (oponent)
This thesis deals with the use of electrophoretic methods in the analysis of pharmaceutically important compounds. In the theoretical part, the classification of capillary electrophoretic techniques is discussed. Capillary zone electrophoresis (CZE, capillary isotachophoresis (ITP), micellar elektrokinetic chromatography (MEKC), microemulsion elektrokinetic chromatography (MEEKC), isoelectric focusation (IEF), capillary electrochromatography (CEC) and capillary gel electrophoresis (CGE) are described. Further, on-line pre-concentration methods are described. Particular attention is given to the on-line combination of capillary isotachophoresis with capillary zone electrophoresis using column coupling arrangement. This combination enables the improvement of the selectivity of separation and the improvement of the limit of detection of analytes present in complex matrices of biological and environmental origin. Afterwards, the results of the experimental analyses are presented: 1. The first paper deals with the use of CZE in the analysis of ibuprofen and flurbiprofen in pharmaceuticals. Separation was carried out in a fused silica capillary (60 cm x 100 m I.D effective length 45 cm) at 30 kV with UV detection at 232 nm. The optimized background electrolyte was 20mM N-(2- acetamido)-2-aminoethanesulfonic acid...
|
|
|
Vliv vybraných látek ovlivňujících centrální nervový systém na kostní metabolismus
Fekete, Soňa ; Živný, Pavel (vedoucí práce) ; Horák, Petr (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
Zvýšení průměrné délky života světové populace je spojeno se zdravotními problémy. Jedním z těchto problémů, který se často vyskytuje obzvláště u starších lidí je snížení kvantity a kvality kostní hmoty nebo-li osteoporóza. Je to systémové skeletální onemocnění způsobené úbytkem kostní hmoty a u žen i mužů představuje významný zdravotní problém. Je charakterizována nízkou kostní hmotou, poškozením mikroarchitrektury kostní tkáně a zvýšením křehkosti kostí s náchylností ke zlomeninám. Osteoporotické fraktury významně zvyšují morbiditu a mortalitu pacientů. Mezi rizikové faktory, které mohou mít vliv na vznik osteoporózy patří dlouhodobé užívání léků, jako jsou např. antiepileptika a antidepresiva. Cílem této práce bylo zhodnotit účinek orchidektomie a vliv novějších antiepileptik (levetiracetam, lacosamid, topiramat, lamotriginu) a antidepresiv (mirtazapin, venlafaxinu a trazodonem) na kostní metabolismus u zdravých samců potkanů kmene wistar. Prvním cílem bylo zjistit vliv orchidektomie na metabolismus kostí u potkanů. Zjistili jsme, že orchidektomie měla negativní vliv na kostní metabolismus u potkanů. Tyto výsledky potvrzují, že tato zvířata jako vhodné modely pro zkoumání androgenní modulace složení těla. Druhým cílem bylo zjistit vliv vybraných antiepileptik (levetiracetamu, lacosamid,...
|
|
|
Analytické hodnocení léčiv a potenciálních léčiv s využitím HPLC
Kovaříková, Petra ; Klimeš, Jiří (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Blešová, Marie (oponent)
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) je v oblasti analýzy léčiv jednou z nejčastěji užívaných analytických technik. Metody HPLC jsou běžně využívány ve všech oblastech moderní farmaceutické analýzy - ve výzkumu a vývoji nových léčiv a léčivých přípravků, v oblasti kontroly a jištění jakosti léčiv, v oblastech zahrnujících analýzu léčiv a metabolitů v biologickém materiálů (např. terapeutické monitorování léčiv, studie bioekvivalence). Teoretická část disertační práce se zabývá hlavními aspekty a specifiky HPLC analýzy léčiv. Experimentální část práce je zpracována jako soubor komentovaných prací rozdělaných do dvou tematických celků (Analýza potenciálních léčiv ze skupiny aroylhydrazonových chelátorů železa, Hodnocení stability vybraných léčiv). První tematický celek se zabýval vývojem, validací a následnou aplikací chromatografických metod (především HPLC) v analýze potenciálních léčiv ze skupiny aroylhydrazonových chelátorů železa - pyridoxal isonikotinoyl hydrazonu (PIH) a jeho dalších dvou analogů, salicylaldehyd isonikotinoyl hydrazonu (SIH) a pyridoxal 2-chlorbenzoyl hydrazonu (o-108). Aroylhydrazonové chelátory železa (PIH, SIH, o-108) jsou v dnešní době jako potenciální léčiva předmětem poměrně intenzivního výzkumu. Ačkoliv mají tyto látky zajímavé farmakologické účinky, nebyly dosud...
|
host ::
RSS.