|
|
Genetically encoded biosensors of cellular tension and their use in cellular biology
Pelantová, Markéta ; Rösel, Daniel (vedoucí práce) ; Lánský, Zdeněk (oponent)
1 Abstrakt a klíčová slova Mechanické síly mají velký vliv na celý život buněk. Ovlivňují buněčnou proliferaci, migraci či diferenciaci a chyby v buněčném vnímání mechanických sil se ukazují být jednou z příčin různých chorob jako je např. hluchota, ateroskleróza či rakovina. Mechanismy, kterými buňky mechanické síly vnímají, jsou nicméně ještě velmi málo probádány a chybějí nástroje, kterými by je bylo možné zkoumat. Geneticky kódované tenzní biosenzory využívající pro detekci tenze FRET jsou jednou ze současně používaných metod pro studium přenosu mechanického signálu v buňce. Jedná se o neinvazivní metodu, jejíž pomocí je možné v živých buňkách sledovat změny v mechanickém napětí na různých proteinech. V tomto textu jsou představeny různé typy existujících geneticky kódovaných tenzních biosenzorů využívajících FRET, proces jejich vytváření a objevy díky nim získané. Klíčová slova: mechanická síla, mechanosenzitivita, FRET, tenzní senzor, příprava biosenzoru
|
|
|
Molekulární mechanismus štěpení mikrotubulů kataninem
Podhájecký, Roman ; Lánský, Zdeněk (vedoucí práce) ; Libusová, Lenka (oponent)
Mikrotubulový cytoskelet je dynamická filamentární sít', jejíž remodelace je klíčová pro důležité buněčné procesy, jako je buněčná motilita nebo buněčné dělení. Tato remodelace je vysoce závislá na mikrotubul-asociovaných protei- nech, které mohou přetvářet jednotlivé miktotubuly. Jedním z nich je i katanin. Katanin je mikrotubul-asociovaný protein, který za hydrolýzy ATP štěpí mikrotu- buly. Tato vlastnost umožňuje rychlou remodelaci mikrotubulové sítě díky rychlé amplifikaci celkového počtu mikrotubulů nebo jejich rychlé degradaci. Mechanis- mus a regulace aktivity kataninu jsou v posleních letech hojně diskutovány. V teto práci se pokusím popsat princip štěpení mikrotubulů a regulaci aktivity kataninu na molekulární úrovni. Klíčová slova: cytoskelet, remodelace mikrotubulových sítí, mikrotubuly, enzymy štěpící mikro- tubuly, katanin 1
|
|
|
Charakterizace proteinu SWIP, jednoho z členů WASH komplexu
Humhalová, Tereza ; Libusová, Lenka (vedoucí práce) ; Lánský, Zdeněk (oponent)
Komplex WASH reguluje dynamiku aktinové sítě na endozómech prostřednictvím aktivace komplexu Arp2/3, který nukleuje polymeraci větvených aktinových vláken. Pro správnou recyklaci řady důležitých transmembránových proteinů je komplex WASH nepostradatelný. Přestože obecná fyziologická funkce celého komplexu je známá, role jeho jednotlivých podjednotek stále ještě nejsou plně specifikovány. Tato práce se zabývá jednou z nich, proteinem SWIP. V hlence Dictyostelium discoideum je SWIP potřebný pro lokalizaci dalších podjednotek komplexu WASH na membrány váčků. Bodová mutace v proteinu SWIP způsobuje závažné neurodegenerativní onemocnění - autozomálně recesivní intelektuální poruchu (ARID). Z našich výsledků vyplývá, že zkrácení proteinu SWIP způsobuje jeho neschopnost vázat se do komplexu WASH, a že jeho C-koncová část je schopna lokalizovat na intracelulární váčky. Tato práce také ukazuje, že bodová mutace zapříčiňující ARID neovlivňuje schopnost vazby SWIPu do komplexu WASH, ani lokalizaci celého komplexu.
|
|
| |
|
| |
host ::
RSS.