|
|
Imunogenní nádorové buňky jako zdroj nádorových antigenů pro léčbu aktivní buněčnou imunoterapií DCVAC/OVCa u pacientek s karcinomem ovarii v I./II. fázi klinického testování.
Slavíčková, Lucie ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Krejsek, Jan (oponent)
Autor: Lucie Slavíčková Název: Imunogenní nádorové buňky jako zdroj nádorových antigenů pro léčbu aktivní buněčnou imunoterapií DCVAC/OvCa u pacientek s karcinomem ovarií ve II. fázi klinického testování Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Studijní obor: Farmacie Poznání ústřední funkce dendritických buněk při prezentaci antigenu a indukci primární imunitní odpovědi prostřednictvím aktivace naivních nediferencovaných T lymfocytů vedlo k jejich využití jako imunologické modality v imunoterapii nádorů. Vhodným zdrojem antigenů jsou nádorové buňky z buněčných linií usmrcených vysokým hydrostatickým tlakem, který indukuje imunogenní buněčnou smrt a zabezpečuje účinnou aktivaci imunitní odpovědi. Tato práce si klade za cíl popsat recentní poznatky oboru protinádorové imunoterapie karcinomu ovaria se zaměřením na vakcínu na bázi dendritických buněk a v experimentální části zhodnotit možný krok k optimalizaci výrobního protokolu této protinádorové vakcíny. V rámci experimentální části práce jsem sledovala kinetiku imunogenních parametrů u nádorových buněk linie SKOV3 ovariálního karcinomu ošetřených aplikací vysokého hydrostatického tlaku, coby induktoru imunogenní buněčné smrti. Stanovení probíhalo v různých časových intervalech a vedlo k ověření možnosti...
|
|
|
Identifikace nových faktorů virulence intracelulárního patogena Francisella tularensis
Daňková, Věra ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Krejsek, Jan (oponent) ; Prokešová, Ludmila (oponent)
ABSTRAKT Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Věra Daňková Školitel: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název disertační práce: IDENTIFIKACE NOVÝCH FAKTORŮ VIRULENCE INTRACELULÁRNÍHO PATOGENA FRANCISELLA TULARENSIS Předložená disertační práce je zaměřena na studium úlohy bakteriálních tetratricopeptide repeat-like (TPR-like) proteinů v patogenesi infekce. Modelovým organismem byla zvolena vysoce virulentní intracelulární bakterie Francisella tularensis, jejíž mechanismus patogenese není doposud plně objasněn. V první části disertační práce byly na základě bioinformatických studií identifikovány tři geny (FTS_0201, FTS_1680, a FTS_0778) s predikovanou TPR-like doménou. Pro přípravu mutantních kmenů vybraných genů byla využita mutagenese TargeTron. Připravené mutantní kmeny byly použity pro studium role vybraných proteinů v patogenitě a imunogenitě F. tularensis s využitím in vitro a in vivo modelů a dále pro studium zapojení těchto proteinů v adaptačních mechanismech na stres. Z výsledků disertační práce bylo zjištěno, že protein FTS_1680 je významný pro intracelulární replikaci a plnou virulenci bakterie. Dále byla zaznamenána snížená schopnost proliferace mutantních bakterií inFTS_1680/200 v in vivo systému s následnou eliminací...
|
|
|
Rheoferetické postupy pro odstranění cholesterolu a jejich dopad na imunitní systém u pacientů s VPMD (AMD)
Dreslerová, Ellen ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Krejsek, Jan (oponent)
rigorózní práce: Rheoferetické postupy pro odstranění cholesterolu a jejich dopad na imunitní systém u pacientů s věkem podmíněnou makulární degenerací Tato rigorózní práce se zabývala sledováním vybraných imunologicko-reologických parametrů metodou enzymoimunoanalýzy a imunonefelometrie u pacientů s věkem podmíněnou makulární degenerací. Toto onemocnění patří mezi nejčastější příčiny praktické slepoty populace nad 60 let. Aplikací hemorheoferézy byl prokázán statisticky významný pozitivní dopad na hladiny α-2-makroglobulinu (57%), P-selektinu (17 %) a endoglinu (vice než 15 %). U IL-10 byl pozorován pokles pouze o 8,07 % a navíc s nižší hladinou statistické významnosti (p=0,0017). Naopak, pokles s vysokou hladinou statistické významnosti byl zaznamenán u hsCRP (22,11 %), IgM (62,14 %) i CMP-1 (14,15 %). Všechny tyto parametry korelují s pozitivním vlivem rheoferetické intervence a jsou v souladu s poznatky soudobé literatury. Výsledky studie vyzdvihují tedy pozitivní vliv na imunologické parametry onemocnění a podporují použití této techniky u pacientů s věkem podmíněnou makulární degenerací.
|
|
|
Principy neurochirurgické a neurointenzivistické likvorologie
Kelbich, Petr ; Krejsek, Jan (vedoucí práce) ; Krahulík, David (oponent) ; Jílek, Petr (oponent)
Souhrn Principy neurochirurgické a neurointenzivistické likvorologie V rámci standardního nemocničního provozu Masarykovy nemocnice v Ústí nad Labem jsme monitorovali vývoj likvorového obrazu u 120 pacientů po atace krvácení v centrálním nervovém systému (CNS) a neurochirurgické intervenci. Vlastním cytologicko-energetickým postupem jsme vyšetřili celkem 1453 vzorků likvoru. Princip vyšetření spočívá ve společném hodnocení výskytu imunokompetentních buněk coby potencionálních nositelů imunitní reakce v likvorovém kompartmentu a úrovně jejich aktivace pomocí koeficientu energetické bilance. Dále jsme sledovali počty erytrocytů a leukocytů v likvoru a úroveň katalytické aktivity aspartátaminotransferasy (AST) v likvoru coby ukazatele strukturálního poškození tkáně CNS. Cílem práce bylo zhodnotit třítýdenní vývoj likvorového obrazu u pacientů po atace krvácení v CNS a neurochirurgické intervenci za účelem získání přesnějších informací pro efektivnější terapeutickou intervenci a predikci vývoje stavu pacienta. Dosažené výsledky podporují praktické využití cytologicko-energetického principu vyšetřování likvoru a jako prognosticky nepříznivé specifikují tyto faktory: vyšší rozsah krvácení v CNS; vyšší četnost neutrofilních granulocytů v likvoru; vyšší rozsah anaerobního metabolismu v likvorovém...
|
|
|
Elements of Immune Fitness
AbuAttieh, Mouhammed O. ; Krejsek, Jan (vedoucí práce) ; Raška, Milan (oponent) ; Kročová, Zuzana (oponent)
Prvky imunitní způsobilosti Cílem disertační práce bylo definovat podíl diverzity receptorů pro antigen na funkcích, které určují adaptivní imunitu. Obvykle se předpokládá, že imunologická způsobilost vyžaduje diverzitu lymfocytárních receptorů. My jsme tuto hypotézu ověřili na modelu omezené lymfocytární diverzity. Byla testována způsobilost buňkami zprostředkované imunity myší s omezenou diverzitou receptorů TCR. Byl ověřen vliv omezené diverzity receptorů TCR na vznik B lymfocytární odpovědi indukované modelovými antigeny. Koncept způsobilosti buňkami zprostředkované imunity ve vazbě na diverzitu receptorů PCR byl ověřen na myších experimentálních modelech, který zahrnovaly myši JH-/- , u kterých nejsou vyvinuty B lymfocyty a mají diverzitu receptorů TCR < 1 %, kmen konvenčních myší a quasimonoklonální (QM) myši s oligoklonální B lymfocytární populací a diverzitou oblastí V TCR receptorů 7 % v porovnání s konvenčním kmenem. V experimentech jsme zjistili, že myši JH-/- odhojují H-Y inkompatibilní kožní štěpy stejně rychle jako konvenční kmen myší, přestože mají omezený repertoár TCR receptor > 99 % a projevují známky defektní organogeneze lymfoidních orgánů. Myši JH-/- reagují aktivací T lymfocytů po stimulaci peptidem a vykazují opožděný typ hypersenzitivity, přestože intenzita těchto reakcí je...
|
|
|
Studium buněčných a molekulárních mechanismů interakce B-buněk s intracelulárním patogenem Francisella tularensis
Bramborová, Lucie ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Krejsek, Jan (oponent) ; Šinkorová, Zuzana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Lucie Bramborová Školitel: Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Školitel specialista: RNDr. Zuzana Kročová, Ph.D Název disertační práce: Studium buněčných a molekulárních mechanismů interakce B-buněk s intracelulárním patogenem Francisella tularensis F. tularensis je Gram-negativní, fakultativně intracelulární bakterie způsobující zoonózu tularémii. Imunita vůči F. tularensis je hlavně zprostředkována T-buňkami, ale důležitou úlohu v časné fázi imunitní reakce mají také B-buňky. Hlavními hostitelskými buňkami pro F. tularensis jsou makrofágy. V makrofázích se bakterie usidluje ve fagozómu, ze kterého následně uniká do cytosolu. Zde se F. tularensis množí a indukuje apoptózu a později nekrózu hostitelských buněk. Vliv B-buněk na časnou imunitní reakci proti F. tularensis je studován teprve v posledních letech. Elkins a spol. prokázali silnou časnou protekci u myší závislou na B-buňkách. Přímá interakce B-buněk a F. tularensis zatím nebyla popsána. Během naší práce jsme pozorovali adhezi F. tularensis na lidské a myší B-buňky, detekovali jsme bakterie uvnitř buněk, většinou v membránami uzavřených vakuolách a následně jsme pozorovali morfologické změny mitochondrií buňky. B-buňky infikované F. tularensis...
|
|
| |
|
|
Molecular Mechanisms of the Interaction of Interacellular Pathogen Francisella Tularensis and Antigen Presenting Cells
Härtlová, Anetta ; Kročová, Zuzana (vedoucí práce) ; Černý, Jan (oponent) ; Krejsek, Jan (oponent)
Titul disertační práce: Molekulární mechanismy interakce intracelulárniho patogena Francisella tularensis s antigen prezentujícími buňkami Abstrakt: Většina studií zabývající se host-patogen interakce byla v průběhu minulých let převážně zaměřena pouze na funkci jedné molekuly nebo jeden biologický process. Nedávný rozvoj genomiky, transkriptomiky a proteomiky ovšem umožňuje nový typ experimetů a tím získat nové informace jak o jednotlivých komponentech biologického systému tak jejich vzájemných interakcí. Jsou to především proteiny, které jsou jako nosiči biologické aktivity středem zájmu. Studium proteinového složení biologických systémů jako je např. host- patogen interakce umožňuje objasnit molekulární mechanismy infekce v daném prostoru a času. V současné době je zde potřeba vyvinout nové léky zasahující proti bakteriím a virům. Aby to bylo možné, je nutné dobře znát molekulární mechanismy infekce. Patogenní organismy ovšem vyvinuly nejrůznější strategie jak obejít obranné mechanismy imunitního systému hostitele. Skutečnost, že patogeni využívají signální cesty hostitele k nalezení bezpečného útočiště pro vlastní replikaci, vedla k hypotéze možného terapeutického zásahu proti patogenním organismům ze strany hostitele. Předkládaná disertační práce aplikuje kvantitativní protetickou analýzu ke studiu...
|
|
|
Reoferetické a aferetické postupy pro odstranění cholesterolu a jejich dopad na imunitní systém
Svrčková, Ellen ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Krejsek, Jan (oponent)
LDL-aferéza a hemoreoferéza patří mezi nejužívanější extrakorporální eliminační metody umožňující snižování hladin LDL cholesterolu u familierní hypercholesterolémie (FH). V případě selhání konzervativní terapie (farmakoterapie a režimová opatření) se pak stávají jedním z mála účinných a dostupných řešení klinického stavu s vysokou morbiditou i mortalitou. Vlastní intervence je nejčastěji sledována pomocí změn hladin složek plazmatických lipidů. V komplexním procesu aterogeneze ale nezastupitelnou roli hraje i imunitní systém se svými působky a předpokládá se, že parametry imunitního systému mohou přímo odrážet stav a progresi aterosklerózy u pacientů postižených FH. Cílem této práce bylo hodnocení hladin vybraných imunologických markerů (glykoprotein α-2- makroglobulin, IL-10, solubilní endoglin , solubilní apoptotický faktor sAPO-1/Fas a solubilní forma adhezivní molekuly P-selektinu) a jejich změny po LDL- aferéze a hemoreoferéze pomocí enzymoimunoanalýzy a imunonefelometrie. Zkoumaný soubor pacientů (celkem 12) zahrnoval 3 léčené hemoreoferézou 9 léčených LDL-aferézou. V hladinách solubilního endoglinu, sAPO-1/Fas a α-2-makroglobulinu byl zaznamenán významný pokles po provendení obou procedur. Pozorované změny mohou být zdrojem informace nejenom o účinnosti intervence ale také o případném...
|
|
| |
host ::
RSS.