|
|
Prognóza akutní lymfoblastické leukémie u dětí v závislosti na nových klinicko-biologických faktorech
Volejníková, Jana ; Froňková, Eva (vedoucí práce) ; Šálek, Cyril (oponent) ; Klener, Pavel (oponent)
V diagnostice a léčbě dětské akutní lymfoblastické leukémie (ALL) bylo během několika uplynulých desetiletí dosaženo vynikajících úspěchů a procento trvale vyléčených dětí a dospívajících vzrostlo téměř na 90%. Základním principem léčby dětské ALL je rozdělení pacientů do skupin s různou intenzitou léčby na základě přesně definovaných prognostických znaků s cílem snížit riziko relapsu onemocnění i toxických komplikací léčby. Rozvoj nových diagnostických metod, především v oblasti molekulární genetiky a průtokové cytometrie, umožnil další zlepšení rizikové stratifikace - klíčovým prognostickým faktorem se v moderních protokolech pro léčbu dětské ALL stala tzv. minimální reziduální nemoc (MRN) jako citlivý ukazatel odpovědi na léčbu a subklinického leukemického postižení různých kompartmentů v organizmu. Stále se ale intenzivně hledají nové znaky umožňující co nejpřesnější charakterizaci leukemického klonu a optimalizují léčebné postupy zohledňující jeho biologii. V první části naší práce popisujeme výsledky studie sledování a prognostického významu MRN v periferní krvi u dětí s ALL měřené pomocí kvantifikace přestaveb genů pro imunoglobuliny a receptory T-buněk (Ig/TCR) se zaměřením na velmi časné časové body indukční léčby.
|
|
|
Resenzitalizace leukemických a lymfomavých buněk k trailerem indukované apoptóze
Molinský, Jan ; Klener, Pavel (vedoucí práce) ; Hyršlová Vaculová, Alena (oponent) ; Vyoral, Daniel (oponent)
Apoptóza představuje přirozenou bariéru proti rozvoji nádorových onemocnění a rezistence nádorových buněk k apoptóze je jednou ze základních vlastností získaných během tumorigeneze. Protože většina v současné době používaných cytostatik vyvolává zánik nádorových buněk aktivací vnitřní apoptotické dráhy, je porucha aktivace vnitřní apoptotické dráhy spojena se selháním terapie. Cílená aktivace zevní apoptotické dráhy umožňuje indukci apoptózy i u nádorových buněk rezistentních k cytostatikům. TRAIL je cytokin patřící do rodiny TNFα, který specificky indukuje zevní apoptotickou dráhu v nádorových buňkách a je netoxický vůči normálním buňkám. Vzhledem k těmto vlastnostem představuje TRAIL slibnou protinádorovou látku. Velká část primárních nádorů je však vůči TRAILu rezistentní. Ve snaze o překonání rezistence nádorových buněk na TRAIL byla identifikována celá řada látek, které zvyšují citlivost nádorových buněk na TRAIL. Předchozí studie ukazují, že roskovitin, inhibitor cyklin-dependentních kináz, zvyšuje citlivost solidních nádorů na TRAIL. V této práci jsme studovali citlivost různých hematologických malignit k TRAILem indukované apoptóze. Následně jsme zjišťovali schopnost roskovitinu zvýšit citlivost leukemických a lymfomových buněk na TRAIL in vitro a in vivo na myším modelu lidského lymfomu. Nakonec...
|
|
|
Potenciální terapeutické přístupy u buněk CML rezistentních na TKI léky.
Kabíčková, Tereza ; Toman, Ondřej (vedoucí práce) ; Klener, Pavel (oponent)
Uvedení selektivního tyrosin kinázového inhibitoru (TKI) imatinibu do klinické praxe v léčbě chronické myeloidní leukémie (CML) výrazně zlepšilo prognózu onemocnění u pacientů. Přesto ale u určitých skupin pacientů dochází ke vzniku rezistence na imatinib, ztrátě odpovědi na léčbu a relapsu onemocnění, což limituje terapeutický potenciál tohoto léku. Dlouhodobým selekčním tlakem zvyšujících se koncentrací imatinibu v kultivačním médiu jsme vytvořili linii buněk lidské CML (CML-T1) rezistentní na imatinib. Proteomickou analýzou byly pomocí dvourozměrné elektroforézy (2-DE) porovnány expresní profily proteinů u CML-T1 buněk senzitivních a rezistentních na imatinb. Použitím MALDI MS bylo u rezistentních buněk identifikováno 11 diferenciálně exprimovaných proteinů. Výrazný nárůst exprese proteinu "Na+ /H+ exchange regulatory cofactor" (NHERF1) u rezistentních buněk byl následně potvrzen pomocí western blotu. Protein NHERF1 obsahuje interakční vazebné domény účastnící se Wnt signalizace. Byly sledovány změny v expresi proteinů Wnt signálních drah mezi senzitivní a rezistentní linií. U rezistentních buněk byla zjištěna zvýšená exprese proteinu Dishevelled 3 (Dvl 3) a snížená exprese transkripčního faktoru NFAT. Transkripční faktor NFAT je v buňce aktivován defosforylací fosfatázou kalcineurinem, což má...
|
|
|
Buněčná signalizace leukemických buněk a nemaligních B-lymfocytů
Kanderová, Veronika ; Kalina, Tomáš (vedoucí práce) ; Klener, Pavel (oponent) ; Otáhal, Pavel (oponent)
Akutní leukemie (AL) je nejčastější malignitou dětského věku. V Česku AL onemocní 90 až 100 dětí za rok. AL je komplexní onemocnění, které se patologicky projevuje na úrovni DNA, mRNA, proteinů i buněk. Leukemické buňky často aberantně exprimují molekuly, které se za fyziologických podmínek vyskytují u jiných buněčných typů a jejichž funkční zapojení není probádáno. Zjistili jsme, že molekula CEACAM6 se aberantně vyskytuje na lymfoblastech B-prekurzorové akutní lymfoblastické leukemie, kde zvyšuje expresi a afinitu integrinů, mediuje signalizaci přes intracelulární proteinkinázy Akt, p38MAPK a p44/42 MAPK a spouští apoptózu leukemických buněk. Adaptorová molekula NTAL, aberantně exprimovaná v buňkách T-buněčné akutní lymfoblastické leukemie, mediuje signalizaci přes intracelulární proteinkinázu p44/42 MAPK a zvyšuje senzitivitu leukemických buněk ke glukokortikoidům. Současný výzkum biologie leukemií je zaměřen převážně na sledování mutací na úrovni DNA, funkční důsledky těchto změn na buněčné úrovni však objasněny nejsou. Spojníkem mezi genovou expresí a buněčnou fyziologií jsou proteiny, analýza proteomu tedy pomůže prohloubit znalosti o mechanismu nemoci, prognóze a odpovědi na léčbu. Technologie proteinových microarrays se stávají centrem zájmu základního výzkumu i diagnostických aplikací. Mohou být...
|
|
|
Analysis of TRAIL-induced apoptosis in acute myeloid leukemia cells
Klener, Pavel ; Nečas, Emanuel (vedoucí práce) ; Herget, Jan (oponent) ; Trka, Jan (oponent)
Advanced tumors, including leukemia, represent heterogeneous cell populations evolved from original malignant clones. Chemotherapy of leukemia is often associated with selection of drug-resistant cells followed by progression/relapse of the disease. Implementation of molecules that specifically target leukemia cells with minimal toxicity to normal tissues might significantly improve outcome of leukemia treatment. TRAIL belongs to the tumor necrosis factor (TNF) ligand family of cytokines. TRAIL triggers apoptosis in target cells via the receptor-mediated apoptotic pathway. Receptors for TRAIL can be divided into death receptors, TRAILR1/ DR4 , TRAIL-R2/DR5, and decoy receptors, TRAIL-R3/DcR1, TRAIL-R4/DcR2, osteoprotegerin/OPG/TRAIL-R5, based on their ability to transduce apoptotic signal. While normal tissues, including hematopoietic progenitor cells, are resistant to TRAIL-induced apoptosis, TRAIL induces programmed death in many tumor cell lines and primary cells. Various malignant cell lines and primary tumor cells, however, show resistance to TRAIL-induced apoptosis. TRAIL-resistance could represent important limitation for the potential TRAIL anti-tumor therapy. Combined in vitro application of TRAIL with other anti-cancer agents often increased sensitivity or overcame resistance of the tumor cells to...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.