|
|
Determinanty fúzogenicity Syncytinu-1, buněčného glykoproteinu retrovirového původu
Trávníček, Martin ; Trejbalová, Kateřina (vedoucí práce) ; Zábranská, Helena (oponent)
Syncytin-1 je původem retrovirový obalový glykoprotein, který je specificky exprimován v lidské placentě, kde tento protein získal novou fyziologickou funkci. Po interakci se svými receptory, transmembránovými proteiny ASCT1 a ASCT2, Syncytin-1 zprostředkovává fúze buněk za vzniku mnohojaderného syncytiotrofoblastu, který zajišťuje látkovou výměnu mezi matkou a plodem. Tato práce zavádí novou metodu kvantifikace buněčných fúzí, s jejíž pomocí je možné v proteinové struktuře Syncytinu-1 blíže charakterizovat determinanty jeho fúzogenní aktivity. Metoda využívá oddělenou expresi Syncytinu-1 a ASCT2 s fragmenty luciferázy v heterologním buněčném systému a umožňuje specifickou kvantifikaci buněčných fúzí na základě aktivity luciferázového reportéru. Práce přináší nové poznatky o roli intracytoplazmatické části Syncytinu-1 v procesu iniciace buněčných fúzí. Tato část proteinu obsahuje tandemový motiv, který je citlivý na změny v aminokyselinové sekvenci. Substituční mutace v tomto motivu vedou k absolutní ztrátě fúzogenicity. Dále bylo potvrzeno, že protein Suppressyn působí jako silný inhibitor buněčných fúzí navozených Syncytinem-1. Suppressyn však neváže receptory Syncytinu-1 a mechanismus jeho působení zůstává nadále nejasný. V poslední části práce bylo potvrzeno, že C oblast extracelulární domény 2 v...
|
|
|
Role vybraných ABC a SLC transportérů v přestupu maraviroku přes buněčné membrány: vliv na transport v placentě
Matiašková, Zuzana ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Vopršalová, Marie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Zuzana Matiašková Školitelka: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Název diplomové práce: Role vybraných ABC a SLC transportérů v přestupu maraviroku přes buněčné membrány: vliv na transport v placentě Antiretrovirální léčivo maravirok patří do skupiny inhibitorů vstupu CCR5-tropního viru HIV do hostitelské buňky. V současné době je maravirok podáván v rámci kombinované antiretrovirální terapie (cART) především u dospělých a dětí starších dvou let, a též u těhotných žen pro snížení rizika přenosu viru HIV na plod. Znalost interakce maraviroku s lékovými transportéry v placentě je klíčová pro optimalizaci terapie v těhotenství, jak z pohledu efektivity, tak případných nežádoucích účinků. Maravirok je popsaným substrátem ABCB1 transportéru, který svou efluxní aktivitou v apikální membráně trofoblastu plní ochrannou roli pro plod. Výsledky nedávné studie na duální perfúzi lidské placenty nicméně naznačují, že do transplacentární farmakokinetiky maraviroku je pravděpodobně zapojeno více lékových transportérů, zejména těch působících v opačném směru než ABCB1. Cílem této práce bylo pomocí in vitro studií zjistit, zda maravirok interaguje s dalšími placentárními transportéry kromě ABCB1. Nejprve byla...
|
|
|
Expression of selected membrane transporters in placentas of pregnant women diagnosed for preterm rupture of membranes
Michalská, Martina ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Jirkovský, Eduard (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Martina Michalská Školiteľ: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Expresia vybraných membránových transportérov v placentách tehotných žien s diagnostikovanou predčasnou ruptúrou plodových obalov Placenta je orgán, ktorý má kľúčovú úlohu počas tehotenstva. Jednou z jej hlavných funkcií je transport látok medzi matkou a plodom. Tento prestup je z veľkej časti uskutočňovaný pomocou membránových transportérov, nachádzajúcich sa na apikálnej alebo bazálnej strane trofoblastu. Ich množstvo je ovplyvňované celu radou fyziologických i patologickými faktorov, mimo iného jich pravdepodobe ovplyvňuje aj infekcia a zápalová reakcia. Zápal je tiež jedným z rizikových faktorov predčasných pôrodov, a preto sa dá domnievať, že počas nich dôjde ku zmene expresie placentárnych prenášačov. Tato štúdia bola uskutočňovaná na 51 placentách, získaných vo Fakultnej nemocnice v Hradci Králové od žien, u ktorých došlo k predčasnému pôrodu, a na 15 placentách žien s pôrodom v termíne. Na experiment bola použitá kvantitatívna RT-PCR metóda. Sledovala sa mRNA expresia membránových prenášačov ABCB1, ABCG2, OATP1A2, OATP1B3, OATP2A1, OATP2B1, OATP3A1, OATP4A1, pričom sa tieto výsledky porovnávali s...
|
|
|
Hodnocení exprese vybraných ABC transportérů v placentě
Kučerová, Veronika ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Karbanová, Sára (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Veronika Kučerová Školitel: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Lenka Ťupová, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení exprese vybraných ABC transportérů v placentě Placenta je dočasný orgán, skrz který probíhá zásobování plodu živinami a kyslíkem z mateřské krve a naopak dochází k odvodu odpadních látek do mateřské krve v průběhu těhotenství. Přestup látek přes placentu je komplexní proces řízený řadou fyziologických mechanismů, mezi které je zahrnuta pasivní difúze, facilitovaná difúze či aktivní transport, jenž probíhá pomocí membránových transportérů za spotřeby energie. Přítomnost aktivních ABC efluxních transportérů v placentě je známá již dlouhou dobu a jejich funkce je spojována především s limitací vstupu škodlivých látek do placenty a dále do plodu, čímž přispívají k jeho ochraně. Mezi nejlépe popsané transportéry spadající do této skupiny řadíme P-glykoprotein (MDR1/ABCB1), "protein nádorové rezistence prsu" (BCRP/ABCG2) a "protein asociovaný s mnohočetnou lékovou rezistencí 2" (MRP2/ABCC2), jejichž exprese byla potvrzena na apikální membráně placentárního syncytiotrofoblastu omývaného mateřskou krví a dále "protein asociovaný s mnohočetnou lékovou rezistencí 1"...
|
|
|
Role vybraných ABC a SLC transportérů v přestupu maraviroku přes buněčné membrány: vliv na transport v placentě
Matiašková, Zuzana ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Vopršalová, Marie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Zuzana Matiašková Školitelka: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Název diplomové práce: Role vybraných ABC a SLC transportérů v přestupu maraviroku přes buněčné membrány: vliv na transport v placentě Antiretrovirální léčivo maravirok patří do skupiny inhibitorů vstupu CCR5-tropního viru HIV do hostitelské buňky. V současné době je maravirok podáván v rámci kombinované antiretrovirální terapie (cART) především u dospělých a dětí starších dvou let, a též u těhotných žen pro snížení rizika přenosu viru HIV na plod. Znalost interakce maraviroku s lékovými transportéry v placentě je klíčová pro optimalizaci terapie v těhotenství, jak z pohledu efektivity, tak případných nežádoucích účinků. Maravirok je popsaným substrátem ABCB1 transportéru, který svou efluxní aktivitou v apikální membráně trofoblastu plní ochrannou roli pro plod. Výsledky nedávné studie na duální perfúzi lidské placenty nicméně naznačují, že do transplacentární farmakokinetiky maraviroku je pravděpodobně zapojeno více lékových transportérů, zejména těch působících v opačném směru než ABCB1. Cílem této práce bylo pomocí in vitro studií zjistit, zda maravirok interaguje s dalšími placentárními transportéry kromě ABCB1. Nejprve byla...
|
|
|
Role lékových transportérů v placentárním přestupu entekaviru
Lukášová, Veronika ; Červený, Lukáš (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Veronika Křečková Školitel: PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D. Název diplomové práce: Role lékových transportérů v placentárním přestupu entekaviru Entekavir (ETV), analog guanosinu, je antivirové léčivo s vysokou účinností proti hepatitidě B. Patří mezi léčiva první volby pro léčbu dospělých i dětí. Jeho využití v těhotenství limituje řada faktorů včetně nedostatku údajů o placentární farmakokinetice. Na placentárním transferu léčiv se podílí řada lékových transportérů. Mezi nejvýznamější patří efluxní ATP-vázající (ABC) transportéry, P-glykoprotein (P-gp), breast cancer resistance protein (BCRP) či multidrug resistance-associated protein 2 (MRP2), lokalizované v apikální membráně syncytiotrofoblastu a pumpující své substráty vefeto-maternálním směru. U léčiv odvozených od nukleosidů může být placentární transport ovlivněn i aktivitou nukleosidových transportérů (NTs). Ekvilibrační nukleosidové transportéry (ENTs) regulují intracelulární koncentraci substrátů facilitovanou difuzí, zatímco koncentrační (CNTs) zprostředkovávají pouze aktivní influx. Cílem této práce bylo popsat roli lidských P-gp, BCRP, MRP2 a NTs (ENTs a CNTs) v placentárním přestupu ETV. K tomu účelu byla použita in vitro transportní metoda...
|
|
|
Interakce vybraných antiretrovirálních léčiv a metylrtuti s membránovými transportéry placenty
Ťupová, Lenka ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Fusek, Josef (oponent) ; Kacerovský, Marian (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Lenka Ťupová Školitel: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Název dizertační práce: Interakce vybraných antiretrovirálních léčiv a metylrtuti s membránovými transportéry placenty Zejména ve vyspělých zemích jsou těhotné ženy exponovány velkému množství xenobiotik zahrnující enviromentální polutanty, ale též vědomě užívaná léčiva pro kompenzaci akutních nebo chronických obtíží. Antiretrovirální terapie (ART) je podávána HIV pozitivním těhotným ženám nejen za účelem jejich léčby, ale též kvůli prevenci přenosu viru na vyvíjejí se plod. Farmakokinetika mnohých antiretrovirálních léčiv je limitována nebo urychlována řadou ATP-vázajících (ABC) transportérů či transportérů solutů (SLC), z nichž celá řada je přítomna i v lidské placentě. ART je ve vyspělých zemích složena vždy z kombinace 3-4 antiretrovirálních léčiv, výrazně zvyšující riziko rozvoje lékových interakcí na ABC a SLC transportérech. V této práci jsme především pomocí in vitro studií na několika typech buněčných linií a metody duální perfúze potkaní a lidské placenty podrobně popsaly zapojení ABC a SLC transportérů, konkrétně MDR1, MRP1, OATP1A2 a OATP1B3, do přestupu antagonisty chemokinového receptoru 5 - maraviroku, přes placentu....
|
|
|
The effect of in vitro and ex vivo placental cells stimulation on expression of selected ABC and OATP transporters
Dudičová, Simona ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Jirkovská, Anna (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Simona Dudičová Školiteľ: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Vplyv stimulácie placentárnych buniek in vitro a ex vivo na expresiu vybraných ABC a OATP transportérov Placenta je orgánom, ktorý hrá kľúčovú úlohu v priebehu celého tehotenstva pre správny vývin plodu. Jednou z dôležitých funkcií, ktoré placenta poskytuje, je transport látok medzi matkou a plodom. Tento prestup látok umožňujú prevažne membránové transportéry, ktoré sa nachádzajú na apikálnej a bazálnej membráne syncytiotrofoblastu. Počas rôznych fyziologických alebo patologických zmien v ľudskom tele sa ich expresia a množstvo môže meniť. S týmito zmenami súvisia aj zápalové reakcie, ktoré sa môžu v tehotenstve vyskytnúť, a preto sme sa touto problematikou zaoberali a domnievali, že tento stav môže zmeniť expresiu placentárnych transportérov. Cieľom tejto práce bolo skúmať expresiu zmeny membránových prenášačov pomocou placentárnych buniek na BeWo bunkovej línií a placentárnych vilóznych explantoch, ktoré boli stimulované prozápalovými mediátormi. Skúmala sa zmena expresie jednotlivých vybraných placentárnych transportérov zo skupiny ATP- dependentných proteínov, konkrétne ABCB1 a ABCG2, aj z rodiny tzv. SLC...
|
|
|
Interakce vybraných antiretrovirálních léčiv a metylrtuti s membránovými transportéry placenty
Ťupová, Lenka ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Fusek, Josef (oponent) ; Kacerovský, Marian (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Lenka Ťupová Školitel: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Název dizertační práce: Interakce vybraných antiretrovirálních léčiv a metylrtuti s membránovými transportéry placenty Zejména ve vyspělých zemích jsou těhotné ženy exponovány velkému množství xenobiotik zahrnující enviromentální polutanty, ale též vědomě užívaná léčiva pro kompenzaci akutních nebo chronických obtíží. Antiretrovirální terapie (ART) je podávána HIV pozitivním těhotným ženám nejen za účelem jejich léčby, ale též kvůli prevenci přenosu viru na vyvíjejí se plod. Farmakokinetika mnohých antiretrovirálních léčiv je limitována nebo urychlována řadou ATP-vázajících (ABC) transportérů či transportérů solutů (SLC), z nichž celá řada je přítomna i v lidské placentě. ART je ve vyspělých zemích složena vždy z kombinace 3-4 antiretrovirálních léčiv, výrazně zvyšující riziko rozvoje lékových interakcí na ABC a SLC transportérech. V této práci jsme především pomocí in vitro studií na několika typech buněčných linií a metody duální perfúze potkaní a lidské placenty podrobně popsaly zapojení ABC a SLC transportérů, konkrétně MDR1, MRP1, OATP1A2 a OATP1B3, do přestupu antagonisty chemokinového receptoru 5 - maraviroku, přes placentu....
|
|
|
The influence of antidepressants on serotonin homeostasis in placenta
Váchalová, Veronika ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Jirkovský, Eduard (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Veronika Váchalová Školitel: Prof. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Konzultant: Mgr. Rona Karahoda Název diplomové práce: Vliv antidepresiv na homeostázu serotoninu v placentě Deprese je vážná duševní porucha postihující 10-20% žen během těhotenství. Až 10% těchto žen užívají antidepresiva (ADs), nejčastěji ze skupiny selektivních inhibitorů zpětného vychytávání serotoninu (SSRIs). Navzdory skutečnosti, že se bezpečnost této léčby v těhotenství jeví jako sporná vzhledem k možným negativním následkům na matku i plod, mechanismy popisující tyto interakce nebyly stále dostatečně popsány. Během těhotenství je serotonin (5-HT) důležitým článkem pro správnou funkci placenty, vývoj a fetální programování plodu. Homeostáza 5-HT v placentě je udržována skrze 5-HT transportér (SERT/SLC6A4) na apikální straně a transportér pro organické kationty 3 (OCT3/SLC22A3) na bazální straně trofoblastu. Tyto transportéry vychytávají 5-HT z maternálního a fetálního krevního oběhu do syncytiotrofoblastu (STB), kde je následně degradován enzymem monoaminoxidázou-A (MAO-A). Vzhledem k tomu, že všechna ADs interferují se 5-HT systémem, je důležité studovat jejich potenciální interkace ve feto-placentární jednotce. V této...
|
host ::
RSS.