|
|
Congenital disorders of glycosylation and their impact on cellular and energetic metabolism
Rychtárová, Lucie ; Hansíková, Hana (vedoucí práce) ; Hodek, Petr (oponent) ; Pecinová, Alena (oponent)
Dědičné poruchy glykosylace (CDG) jsou velkou skupinou více než 160 typů metabolických poruch způsobených genetickými defekty, které vedou k poruše biosyntézy a modifikace glykanů. Nezastupitelnou roli v biosyntéze glykanů hraje lipid dolichol. Glykany hrají klíčovou roli ve funkci a struktuře proteinů a lipidů a jejich nedostatek vede k závažným klinickým příznakům. CDG se obvykle projevuje v dětství jako multisystémová porucha. Rodiny tak čelí závažnému zdravotnímu problému vzhledem k progresivní a velmi variabilní povaze onemocnění, nepříznivé prognóze a až na výjimky nedostupnosti léčby. V současné době stále nemáme k dispozici dostatečnou paletu metod k rozpoznání vzácných typů CDG a naše znalosti patofyziologie CDG jsou zatím omezené. Prvním cílem práce bylo optimalizovat metodu stanovení izoforem dolicholu a studovat je ve fyziologii a patologii. Druhým cílem práce bylo prozkoumat bioenergetický stav a celkový metabolismus u nejčastějšího typu CDG - poruchy fosfomanomutázy 2 (PMM2-CDG), au CDG způsobených defektem biosyntézy dolicholu. Pomocí optimalizované metody byla v populaci charakterizována distribuce izoforem dolicholu v moči. Profil izoforem dolicholu se mění s věkem, což naznačuje možné změny fyzikálních vlastností membrán během stárnutí v důsledku proporcionální změny izoforem...
|
|
|
Role mitochondriálního energetického metabolismu v buněčné senescenci
Zima, Michal ; Trnka, Jan (vedoucí práce) ; Pecinová, Alena (oponent)
Buněčná senescence představuje trvalé zastavení buněčného cyklu a je chápána jako aktivní odpověď buňky na nejrůznější formy stresu, jakými jsou zejména aktivace některých onkogenů, vystavení působení určitým cytokinům či chemikáliím, hyperoxie a v neposlední řadě také poškození a ztráta ochranných telomerických sekvencí chromozómů - obecně poškození DNA. Senescentní buňky jsou charakteristické svým protáhlým a zploštělým buněčným tělem. Rozsáhlé změny genové exprese u senescentních buněk mohou hypoteticky vést též ke zvýšení hladin určitých povrchových proteinů. Jedním z takových proteinů může být i buněčná adhezivní molekula L1 (L1CAM), která je v populaci buněk exprimována heterogenně. Tato práce popisuje dosavadní poznatky týkající se výzkumu buněčné senescence, jejích charakteristik i způsobů jejího navození. Práce dále dává do souvislosti výskyt L1CAM u senescentních buněk linie A375 a zaměřuje se na výzkum dvou subpopulací, a sice na subpopulaci exprimující L1CAM v malém množství a na subpopulaci exprimující L1CAM ve větším množství (v rámci jedné populace došlo k vysortování těchto dvou subpopulací). Ústřední otázkou práce je měření spotřeby kyslíku a extracelulární acidifikace populace senescentních buněk exprimující malá a velká množství L1CAM pomocí metabolického analyzátoru Seahorse...
|
|
|
Analýza testování na přítomnost alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání v železniční dopravě v České republice v letech 2008 - 2012
Pecínová, Alena ; Šejvl, Jaroslav (vedoucí práce) ; Kuda, Aleš (oponent)
Cílem práce je zmapování oblasti užívání alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání na železnici, porovnání výsledků testování na přítomnost alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání v železniční dopravě v letech 2008 - 2012 ve společnostech: České dráhy, akciová společnost, ČD Cargo, akciová společnost a Správa železniční dopravní cesty, státní organizace a uplatňovaných opatření s doporučeními pro zvládání bezpečnostních rizik na železnici spojených s vlivem alkoholu a jiných návykových látek, které vydala Mezinárodní železniční unie. Práce je zaměřena na metodické pokyny uvedených společností, způsob provádění testování na přítomnost alkoholu a jiných návykových látek v uvedených společnostech, a na legislativu České republiky zabývající se touto problematikou. Pro zpracování byly použity "Pokyny pro zvládání bezpečnostních rizik spojených s vlivem alkoholu, drog a/nebo psychoaktivních léků", metodické dokumenty a předpisy, data z výročních zpráv a zpráv o stavu bezpečnosti ochrany zdraví při práci z let 2008 - 2012 uvedených společností, a informace poskytnuté Odborem systému bezpečnosti provozování dráhy, který šetří mimořádné události ve všech třech uvedených železničních společnostech. Všechny tři společnosti mají zavedená opatření k dodržování zákazu užívání...
|
|
|
Three-parent babies - new therapies of mitochondrial disorders
Helebrandtová, Veronika ; Pecinová, Alena (vedoucí práce) ; Ješina, Pavel (oponent)
Mitochondrie sú neoddeliteľnou súčasťou živých buniek organizmov, nakoľko majú dôležitú rolu v bunkovom metabolizme, hlavne pri tvorbe energie. V tomto im napomáha unikátna štruktúra, ktorá im umožňuje energiu, uvoľnenú počas oxidácie substrátov, využiť k tvorbe ATP. Mitochondrie obsahujú aj vlastnú DNA (mtDNA), ktorá je maternálne dedená a kóduje hlavne katalytické podjednotky komplexov oxidačnej fosforylácie. Mitochondriálne poruchy, či už jadrového alebo mitochondriálneho pôvodu, patria medzi časté príčiny dedičných chorôb a postihujú hlavne energeticky náročné tkanivá ako napríklad srdce alebo mozog. Liečba mitochondriálnych ochorení je väčšinou symptomatická a nevedie k úplnému uzdraveniu pacienta. V dôsledku toho v súčasnosti dochádza k hľadaniu nových možností kauzálnej liečby, ako je napríklad génová terapia. U tejto metódy je ale nutné reflektovať pôvod mutácie, teda či ide o jadrovú alebo mitochondriálnu mutáciu. Génová terapia mitochondriálnych ochorení mtDNA pôvodu je veľmi komplikovaná, preto bola navrhnutá nová liečebná stratégia, metóda mitochondriálnej substitučnej terapie. Podstatou tejto techniky je zabránenie prenosu mutovanej mtDNA z matky na potomka, kedy je do denukleovaného oocytu so zdravými mitochondriami darkyne vnesený jadrový genóm matky s mitochondriálnou poruchou. V...
|
|
|
Studium systému oxidativní fosforylace u vzácných typů mitochondriálních onemocnění
Zdobinský, Tomáš ; Tesařová, Markéta (vedoucí práce) ; Pecinová, Alena (oponent)
Buňky savců jsou ve svém bioenergetickém metabolismu závislé na produkci ATP především pomocí systému oxidační fosforylace (OXPHOS). Poruchy správné funkce OXPHOS mohou vést ke vzniku dědičných mitochondriálních onemocnění s různou závažností a rozmanitými projevy. Nejvážněji bývají zasaženy tkáně s vysokými energetickými nároky, které jsou však obtížně dostupné pro biochemická a jiná vyšetření. Cílem práce bylo především charakterizovat dopady mutací sedmi různých genů (OPA1, DARS2, NDUFS8, NR2F1, HTRA2, MGME1, POLG) na bioenergetický metabolismus a strukturu mitochondrií kožních kultivovaných fibroblastů osmi pacientů s mitochondriálním onemocněním. Hlavní použitou metodou bylo měření spotřeby kyslíku permeabilizovanými buňkami pomocí vysoce citlivé polarografie. Tímto způsobem byly zjištěny výrazné změny v respiraci fibroblastů čtyř pacientů. U dvou z nich a dvou dalších linií byly pomocí fluorescenční mikroskopie zjištěny změny morfologie mitochondriálního retikula oproti kontrolám při použití různých kultivačních podmínek. Kožní fibroblasty jsou relativně snadno dostupné a nabízí řadu výhod pro účely diagnostiky i studia. Výsledky této práce ilustrují možnosti jejich využití mj. pro validaci potenciálních kauzálních mutací mitochondriálních onemocnění, především však v kombinaci s dalšími...
|
|
|
Molecular bases of sensitivity to electron transport chain inhibition-induced cell death
Blecha, Jan ; Rohlena, Jakub (vedoucí práce) ; Brábek, Jan (oponent) ; Pecinová, Alena (oponent)
1 Abstrakt česky Látky cílené na mitochondriální elektron transportní řetězec (ETC) vykazují dobrý potenciál v protinádorové terapii, ale molekulární podstata jejich specificity stále není zcela objasněná. S přihlédnutím k tomu, že většina somatických buněk je v klidovém neproliferujícím stavu a je vůči těmto látkám inertní, změny mitochondriálního metabolismu spojené se vstupem do klidového stavu by mohli objasnit resistenci. Z tohoto důvodu jsme v předložené práci analyzovali stav ETC spolu s hlavními důsledky jeho inhibice jako je zvýšená produkce reaktivních kyslíkatých radikálů (ROS) a snížená produkce ATP na pozadí indukce programované buněčné smrt v modelech nádoru prsu a v proliferujících a klidových netransformovaných buňkách. V první řadě jsme charakterizovali efekt nově vyvinuté protirakovinné látky, mitochondriálně cíleného tamoxifenu (MitoTam), in vitro a in vivo v modelech nádoru prsu s rozdílnou expresí onkogenu Her2. Ukázali jsme, že podstatou protinádorového účinku látky MitoTAM je efektivní inhibice respiračního komplexu I provázená vysokou mírou produkce ROS a to zejména v nádorech se zvýšenou hladinou Her2, které vykazují vyšší míru uspořádanosti ETC do superkomplexů spojenou s vyšší mírou respirace. Tyto výsledky naznačily, že nádory s vyšší mitochondriální respirací jsou citlivější k...
|
|
|
Návrh adiktologických intervencí pro zaměstnance Správy železniční dopravní cesty (SŽDC): Analýza potřeb a možností implementace preventivních opatření
Pecínová, Alena ; Popov, Petr (vedoucí práce) ; Barták, Miroslav (oponent)
Cílem diplomové práce je analýza potřeb v oblasti adiktologie na straně zaměstnavatele. Dílčími cíli jsou: a) analýza vzdělávacích potřeb zaměstnanců zařazených do vzdělávacího programu zaměstnavatele pro návrh edukačního preventivního projektu určeného těmto zaměstnancům SŽDC; b) analýza doporučení UIC zaměřená na adiktologické intervence pro zvládání bezpečnostních rizik v souvislosti s užíváním alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání na železnici; c) analýza možností implementace doporučení dle předchozího bodu; d) analýza potřebnosti adiktologických intervencí vnímaná respondenty kontrolujícími dodržování zákazu užívání alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání v SŽDC. Byla zpracována analýza dokumentů - zákonů ČR, doporučení UIC - zaměřená na opatření upravující užívání alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání a na adiktologické intervence navrhované UIC a vytvořen vědomostní dotazník pro zaměstnance zařazené do vzdělávacího programu zaměstnavatele. Respondenti nebyli informováni, že jim bude nabídnuta účast ve výzkumu a nikdo je neinformoval o připravovaném vědomostním testu z oblasti adiktologie. Během cca 60 minut vyplnilo 31 respondentů bez přípravy 3 100 otázek; výsledky jednotlivých účastníků se pohybovaly v rozmezí 40 - 70 % správných odpovědí...
|
|
|
Návrh adiktologických intervencí pro zaměstnance Správy železniční dopravní cesty (SŽDC): Analýza potřeb a možností implementace preventivních opatření
Pecínová, Alena ; Popov, Petr (vedoucí práce) ; Kuda, Aleš (oponent)
Cílem diplomové práce je analýza potřeb v oblasti adiktologie na straně zaměstnavatele. Dílčími cíli jsou: a) analýza vzdělávacích potřeb zaměstnanců zařazených do vzdělávacího programu zaměstnavatele pro návrh edukačního preventivního projektu určeného těmto zaměstnancům SŽDC; b) analýza doporučení UIC zaměřená na adiktologické intervence pro zvládání bezpečnostních rizik v souvislosti s užíváním alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání na železnici; c) analýza možností implementace doporučení dle předchozího bodu. Byla zpracována analýza dokumentů - zákonů ČR, doporučení UIC - zaměřená na opatření upravující užívání alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání a na adiktologické intervence navrhované UIC a vytvořen vědomostní dotazník pro zaměstnance zařazené do vzdělávacího programu zaměstnavatele. Respondenti nebyli informováni, že jim bude nabídnuta účast ve výzkumu a nikdo je neinformoval o připravovaném vědomostním testu z oblasti adiktologie. Během cca 60 minut vyplnilo 31 respondentů bez přípravy 3 100 otázek; výsledky jednotlivých účastníků se pohybovaly v rozmezí 40 - 70 % správných odpovědí (v průměru 53,4 %). Z výsledků jsou patrné rozdíly v informovanosti respondentů v jednotlivých oblastech. UIC doporučuje vzdělávání zaměstnanců v oblasti alkoholu a jiných...
|
|
|
Role mitochondriálního energetického metabolismu v buněčné senescenci
Zima, Michal ; Trnka, Jan (vedoucí práce) ; Pecinová, Alena (oponent)
Buněčná senescence představuje trvalé zastavení buněčného cyklu a je chápána jako aktivní odpověď buňky na nejrůznější formy stresu, jakými jsou zejména aktivace některých onkogenů, vystavení působení určitým cytokinům či chemikáliím, hyperoxie a v neposlední řadě také poškození a ztráta ochranných telomerických sekvencí chromozómů - obecně poškození DNA. Senescentní buňky jsou charakteristické svým protáhlým a zploštělým buněčným tělem. Rozsáhlé změny genové exprese u senescentních buněk mohou hypoteticky vést též ke zvýšení hladin určitých povrchových proteinů. Jedním z takových proteinů může být i buněčná adhezivní molekula L1 (L1CAM), která je v populaci buněk exprimována heterogenně. Tato práce popisuje dosavadní poznatky týkající se výzkumu buněčné senescence, jejích charakteristik i způsobů jejího navození. Práce dále dává do souvislosti výskyt L1CAM u senescentních buněk linie A375 a zaměřuje se na výzkum dvou subpopulací, a sice na subpopulaci exprimující L1CAM v malém množství a na subpopulaci exprimující L1CAM ve větším množství (v rámci jedné populace došlo k vysortování těchto dvou subpopulací). Ústřední otázkou práce je měření spotřeby kyslíku a extracelulární acidifikace populace senescentních buněk exprimující malá a velká množství L1CAM pomocí metabolického analyzátoru Seahorse...
|
|
|
Analýza testování na přítomnost alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání v železniční dopravě v České republice v letech 2008 - 2012
Pecínová, Alena ; Šejvl, Jaroslav (vedoucí práce) ; Kuda, Aleš (oponent)
Cílem práce je zmapování oblasti užívání alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání na železnici, porovnání výsledků testování na přítomnost alkoholu a jiných návykových látek při výkonu povolání v železniční dopravě v letech 2008 - 2012 ve společnostech: České dráhy, akciová společnost, ČD Cargo, akciová společnost a Správa železniční dopravní cesty, státní organizace a uplatňovaných opatření s doporučeními pro zvládání bezpečnostních rizik na železnici spojených s vlivem alkoholu a jiných návykových látek, které vydala Mezinárodní železniční unie. Práce je zaměřena na metodické pokyny uvedených společností, způsob provádění testování na přítomnost alkoholu a jiných návykových látek v uvedených společnostech, a na legislativu České republiky zabývající se touto problematikou. Pro zpracování byly použity "Pokyny pro zvládání bezpečnostních rizik spojených s vlivem alkoholu, drog a/nebo psychoaktivních léků", metodické dokumenty a předpisy, data z výročních zpráv a zpráv o stavu bezpečnosti ochrany zdraví při práci z let 2008 - 2012 uvedených společností, a informace poskytnuté Odborem systému bezpečnosti provozování dráhy, který šetří mimořádné události ve všech třech uvedených železničních společnostech. Všechny tři společnosti mají zavedená opatření k dodržování zákazu užívání...
|
host ::
RSS.