|
|
HPLC v kontrole kvality doplňků stravy na bázi zlatobýlu a s obsahem rutinu a kyseliny chlorogenové
Kotyková, Klára ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Klára Kotyková Školitel: prof. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: HPLC v kontrole kvality doplňků stravy na bázi zlatobýlu a s obsahem rutinu a kyseliny chlorogenové V rámci této diplomové práce byla vyvinuta a validována metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) pro separaci a stanovení kyseliny chlorogenové, kyseliny 3,5-dikafeoylchinové, rutinu, quercetinu a kaempferolu. Tato metoda byla následně aplikována pro analýzu doplňků stravy na bázi zlatobýlu: kapek Celík zlatobýl (Valdemar Grešík), Celík obecný BIO (Bylinné kapky), Celík obecný (Bylinné kapky), Zlatobýl obecný (Green Idea), Zlatobýl - tinktura z pupenů (Serafin), Zlatobýl - tinktura z bylin (Serafin), Zlatobýlová směs (Dědek kořenář), Zlatobýl (Inca Botanica) a tobolek Celík (Ex Herbis). Dále byly analyzovány dva doplňky stravy obsahující samotný rutin od firem Solgar a Walmark® a doplněk stravy Zelená káva (Botanic) obsahující kyselinu chlorogenovou. K analýze byla vybrána kolona Ascentis® Express 90 Å AQ-C18 150 × 4,6 mm s částicemi o velikosti 2,7 µm. Byla využita gradientová eluce s mobilní fází acetonitril/0,085% kyselina fosforečná. Detekce byla provedena detektorem diodového pole při vlnových délkách 325 nm...
|
|
|
Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro separaci alkaloidů čeledi Amaryllidaceae
Burianová, Kristýna ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kristýna Burianová Školitel: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Veronika Pilařová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro separaci alkaloidů čeledi Amaryllidaceae V této diplomové práci byla vyvíjena metoda pro separaci 30 alkaloidů čeledi Amaryllidaceae pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s tandemovou hmotnostní detekcí (UHPLC-MS/MS). Byly optimalizovány chromatografické podmínky a parametry hmotnostního spektrometru. V první fázi optimalizace byl proveden screening 10 analytických kolon na systému ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s detektorem fotodiodového pole (UHPLC-PDA). Jednalo se o kolony Acquity UPLC BEH C18, Acquity UPLC CSH C18, Acquity UPLC BEH Phenyl, Acquity UPLC CSH Phenyl-hexyl, Arion Plus C18, Acquity UPLC BEH Shield RP18, Ascentis Express RP-Amide, ACE Excel C18-PFP, Kinetex PFP a Kinetex F5. K další optimalizaci byly vybrány kolony Acquity UPLC BEH Phenyl, Acquity UPLC CSH Phenyl-hexyl a Acquity UPLC CSH C18, protože poskytly nejvyšší skóre separace analyzovaných izomerních skupin analytů. Optimalizace MS podmínek byla provedena nastavením parametrů iontového zdroje a nastavením SRM...
|
|
|
Hodnocení vlastností nových typů zwitteriontových stacionárních fází v HILIC
Nováková, Daniela ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Daniela Nováková Školitel: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení vlastností nových typů zwitteriontových stacionárních fází v HILIC Cílem této diplomové práce bylo porovnat mezi sebou šest nových zwitteriontových kolon Astra ZWIX (3 μm, 2,1 x 100 mm) firmy Chromservis s.r.o. K analýze bylo využito pět skupin látek, a to nukleové baze a nukleosidy, deriváty kyseliny nikotinové, hydrofilní vitamíny, betablokátory a fenolické kyseliny. Tyto skupiny látek byly pro porovnání analyzovány i na komerčně dostupných kolonách - BEH Z HILIC, SYNCRONIS, OMEGA SUGAR, BEH HILIC a BEH AMIDE (OMEGA SUGAR 3 μm, 2,1 x 100 mm; ostatní kolony 1,7 μm, 2,1 x 100 mm). Byly zkoumány tyto parametry: retenční čas, rozlišení, asymetrie, šířka píku v polovině jeho výšky. Poté byla provedena optimalizace, která měla za cíl zlepšit separaci píků nukleových bazí a nukleosidů, hydrofilních vitamínů a betablokátorů. Byl optimalizován gradient mobilní fáze, teplota kolony a průtok mobilní fáze. Bylo zjištěno, že selektivita kolon se v rámci šarže neliší. Podmínka opakovatelnosti retenčního času byla splněna u všech analytů na všech kolonách, vyjma 3,5-DHBA na koloně A00280 při pH 3. Píky analytů jsou...
|
|
| |
|
|
Hodnocení vlastností nových typů zwitteriontových stacionárních fází v HILIC
Nováková, Daniela ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Daniela Nováková Školitel: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení vlastností nových typů zwitteriontových stacionárních fází v HILIC Cílem této diplomové práce bylo porovnat mezi sebou šest nových zwitteriontových kolon Astra ZWIX (3 μm, 2,1 x 100 mm) firmy Chromservis s.r.o. K analýze bylo využito pět skupin látek, a to nukleové baze a nukleosidy, deriváty kyseliny nikotinové, hydrofilní vitamíny, betablokátory a fenolické kyseliny. Tyto skupiny látek byly pro porovnání analyzovány i na komerčně dostupných kolonách - BEH Z HILIC, SYNCRONIS, OMEGA SUGAR, BEH HILIC a BEH AMIDE (OMEGA SUGAR 3 μm, 2,1 x 100 mm; ostatní kolony 1,7 μm, 2,1 x 100 mm). Byly zkoumány tyto parametry: retenční čas, rozlišení, asymetrie, šířka píku v polovině jeho výšky. Poté byla provedena optimalizace, která měla za cíl zlepšit separaci píků nukleových bazí a nukleosidů, hydrofilních vitamínů a betablokátorů. Byl optimalizován gradient mobilní fáze, teplota kolony a průtok mobilní fáze. Bylo zjištěno, že selektivita kolon se v rámci šarže neliší. Podmínka opakovatelnosti retenčního času byla splněna u všech analytů na všech kolonách, vyjma 3,5-DHBA na koloně A00280 při pH 3. Píky analytů jsou...
|
|
| |
|
|
Stanovení neopterinu a jeho derivátů metodou HPLC s fluorescenční detekcí
Říhová, Lenka ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
NÁZEV: Stanovení neopterinu a jeho derivátů metodou HPLC s fluorescenční detekcí ABSTRAKT: Neopterin, derivát pteridinu, je v lidkém organismu produkován monocyty nebo B - lymfocyty po stimulaci interferonem γ, nebo interleukinem - 2. Tyto působky (interferon γ, interleukin - 2) jsou spojeny s aktivací imunitního systému. Měření neopterinu v tělních tekutinách tedy může sloužit při monitorování cytokiny indukované aktivace různých složek imunitního systému. Imunitní aktivace se objevuje například v průběhu mnoha infekčních chorob, při autoimunitních onemocněních a při maligních onemocněních. V poslední době je ve vědeckých pracích popisována také spojitost neopterinu a 7,8 - dihydroneopterinu s intracelulárním oxidativním stresem a apoptózou buněk. Pteridiny tudíž mají pravděpodobně vztah i k určitým neurologickým onemocněním. Plně redukovaná forma biopterinu se v lidském organismu uplatňuje jako kofaktor některých enzymů. Koncentrace neopterinu, případně jiných příbuzných látek, se v klinické praxi vyjadřuje poměrem neopterin / kreatinin. Tato diplomová práce se zabývá vypracováním analytické metody určené k identifikaci a stanovení biologicky aktivních látek biopterinu, 7,8 - dihydroneopterinu, 5,6,7,8 - tetrahydroneopterinu, neopterinu a kreatininu za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC)...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení nikotinu v ústním spreji a v náplních do elektronických cigaret
Maťátková, Marcela ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Marcela Maťátková Školitel: PharmDr. Lucie Havlíková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení nikotinu v ústním spreji a v náplních do elektronických cigaret Cílem této diplomové práce byl vývoj a validace HPLC metody pro stanovení nikotinu v ústním spreji a v náplních do elektronických cigaret. Při vývoji se vycházelo z dostupných metod zabývajících se HPLC analýzou nikotinu a jeho příbuzné látky kotininu. Optimální podmínky byly nalezeny na koloně XTerra® MS C18 (100 x 4,6 mm, 3,5 µm) s mobilní fází acetonitril : 10mM octan amonný pH 9 (20 : 80, v/v). Průtok mobilní fáze byl 1 ml/min, vlnová délka detektoru byla nastavena na 260 nm a jako vnitřní standard byl zvolen trimetoprim. Za těchto podmínek jsou nikotin, kotinin a trimetoprim odděleny do 5 minut. Při analýze ústního spreje a vybraných náplní do elektronických cigaret je stanovení kotininu rušeno pomocnými látkami v přípravcích. Vypracovaná HPLC metoda byla proto validována pouze pro stanovení nikotinu. Závěry z validace prokázaly, že tato metoda poskytuje přesné a správné výsledky a je tedy vhodná pro daný účel.
|
|
|
HPLC stanovení luteinu, zeaxanthinu a betakarotenu v potravních doplňcích
Dvořáková, Petra ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Tato rigorózní práce se zabývá úpravou metody separace karotenoidů luteinu, betakarotenu a zeaxanthinu převzaté z diplomové práce (Optimalizace chromatografických podmínek pro HPLC stanovení vybraných karotenoidů, Petra Dvořáková, 2009). Základní metodou je HPLC s VIS detekcí. Úprava spočívala ve vyvinutí gradientové eluce pro zkrácení doby analýzy. Při optimalizaci postupu gradientové eluce byly testovány čtyři způsoby. Druhým úkolem této rigorózní práce je shrnutí extrakčních způsobů pro vybrané karotenoidy, které byly publikovány v odborné literatuře a navržení způsobů extrakce vhodných pro izolaci karotenoidů z potravních doplňků. Při hledání optimálního způsobu extrakce byla využívána extrakce organickými rozpouštědly. Zkoušena byla jak prostá extrakce do organického rozpouštědla, tak extrakce s předchozí úpravou vzorku saponifikací nebo okyselením extrakčního prostředí. Přes vyzkoušení celé řady postupů a organických rozpouštědel se nepodařilo nalézt optimální a univerzální způsob extrakce karotenoidů z lékových forem.
|
|
|
Vývoj MEPS metody pro UHPLC-MS/MS stanovení entekaviru v ultrafiltrátu ledvin
Janák, Jaroslav ; Vlčková, Hana (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
1 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Jaroslav Janák Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj MEPS metody pro UHPLC-MS/MS stanovení entekaviru v ultrafiltrátu ledvin Diplomová práce se zabývala vývojem a validací metody úpravy vzorků pro stanovení entekaviru v ultrafiltrátu ledvin, pomocí techniky MEPS, tj. mikroextrakce tuhým sorbentem. K analýze byla využita již dříve vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda pro stanovení entekaviru v potkaní moči. Pro jeho stanovení byla využita hydrofilní interakční chromatografie na koloně Acquity BEH Amide za použití izokratické eluce. Složení mobilní fáze acetonitril - 5 mM octan amonný pH 4,0 bylo v poměru 75:25 (v:v). Jako vnitřní standard byl použit entekavir C2 13 N15 . Ionizace analytu byla provedena elektrosprejem v pozitivním módu a jako detektor byl zvolen trojitý kvadrupól. Ke kvantifikaci analytu bylo využito SRM přechodů entekaviru a vnitřního standardu. Na základě optimalizace MEPS metody byl jako nejvhodnější tuhá fáze zvolen porézní grafitický uhlík vhodný pro analýzu polárních látek. Jako eluční činidlo byl zvolen roztok acetonitril a vody v poměru 75:25 (v:v) a jako promývací činidlo čistá voda. Metoda byla validována. Ověřena byla zejména linearita, přesnost,...
|
host ::
RSS.