|
|
Role s těhotenstvím asociovaných proteinů a dalších biochemických markerů v diagnostice a sledování nádorů ledvin
Čechová, Marcela ; Babjuk, Marek (vedoucí práce) ; Broďák, Miloš (oponent) ; Hartmann, Igor (oponent)
Role s těhotenstvím asociovaných proteinů a dalších biochemických markerů v diagnostice a sledování nádorů ledvin Abstrakt Práce se zabývá rolí vybraných s těhotenstvím asociovaných proteinů, s těhotenstvím asociovaného plazmatického proteinu A (PAPP-A) a placentálního růstového faktoru (PlGF), ve vztahu k renálnímu karcinomu (RCC) a možnosti jejich použití jako biomarkerů tohoto onemocnění. Teoretická část práce shrnuje zásadní poznatky o RCC se zaměřením na prognostické faktory této malignity a poskytuje ucelený přehled známých potenciálních biomarkerů. V experimentální části práce byly hodnoceny sérové koncentrace PAPP-A a PlGF u pacientů operovaných pro světlobuněčný RCC a jejich potenciální přínos v diagnostice a hodnocení prognózy nemocných s tímto nejčastějším histologickým subtypem RCC. Dále byl zkoumán vztah jednonukleotidových polymorfismů genu PAPP-A [C/G SNP (rs13290387) a Cys327Cys SNP (rs12375498)] k nejčastějším histologickým subtypům RCC (světlobuněčný, papilární typ I a II, chromofóbní) a onkocytomu. Na základě našich výsledků se PAPP-A nezdá být vhodným markerem pro diagnostiku ani hodnocení prognózy nemocných s ccRCC, ovšem PlGF se jeví jako potenciální diagnostický a prognostický marker tohoto onemocnění. Genetickou analýzou jsme zjistili u nemocných s papilárním RCC typ II v porovnání s...
|
|
|
Neinvazivní diagnostika uroteliálního karcinomu močového měchýře stanovením volné DNA a microRNA v moči
Brisuda, Antonín ; Babjuk, Marek (vedoucí práce) ; Hora, Milan (oponent) ; Broďák, Miloš (oponent)
Nádor močového měchýře (NMM) představuje nejčastější malignitu močového traktu. Jeho incidence vykazuje v posledních letech v ČR stabilní úroveň, celosvětově však narůstá. Zásadní je poměr incidence a mortality, který je u NMM ze všech nádorů močopohlavního traktu nejvyšší. Časná diagnostika a správná léčba je tedy pro prognózu určující. Existuje několik komerčně dostupných neinvazivních testů z moči, žádný z nich však zatím není doporučen jako standard v jakékoli indikaci. Cytologie moči tak se všemi svými limitacemi zůstává jediným široce používaným testem jako doplněk invazivní cystoskopie. Volné nukleové kyseliny v moči, respektive supernatantu moči, patří mezi potenciální nádorové biomarkery. Volná DNA (ucfDNA) je do moči vylučována z buněk podléhajících nekróze a apoptóze, nicméně mohou pocházet i z normálních živých buněk. Jejich hladina v moči nebo séru tedy může značit přítomnost nádorového onemocnění. Micro RNA (miRNA) jsou krátké nekódující sekvence RNA, které jsou produkovány mimo jádro a vážou se ke komplementárním sekvencím na mRNA, čímž ovliňují její translaci a tvorbu proteinů. Hrají tedy důležitou roli při dělení buněk a tedy i kancerogenzi. V naší práci jsme pomocí metod molekulární biologie porovnávali hladiny ucfDNA v supernatantu moči kontrol a pacientů s NMM různých...
|
|
|
Exprese CA IX antigenu u urogenitálních nádorů, zejména se zaměřením na karcinom ledviny a uroteliální tumory dolních močových cest
Hyršl, Lubomír ; Babjuk, Marek (vedoucí práce) ; Pacík, Dalibor (oponent) ; Hora, Milan (oponent)
Diserta ní práce Exprese CA IX antigenu u urogenitálních nádor , zejména se zam ením na karcinom ledviny a uroteliální tumory dolních mo ových cest 28 Souhrn Práce se zabývá studiem karbonické anhydrázy IX, která je p ítomna na membránách bun k n kterých urologických nádor , jako mo ného nádorového markeru. Cílem studie bylo p edev ím: 1) vy et it uvol ování solubilní formy karbonické anhydrázy IX z bun k stabilních nádorových linií a z krátkodobých kultur lidských nádor do kultiva ního média, 2) stanovit koncentrace s-CA IX v t lních tekutinách u nemocných s RCC a UC, 3) zhodnotit vliv velikosti nádoru nebo gradeu na koncentrace s-CA IX a 4) pokusit se zhodnotit mo nost vyu ití stanovení s-CA IX jako mo ného markeru t chto nádor . Vytvo ili jsme dv skupiny: 1. nemocní s RCC, 2. nemocní s UC vývodných mo ových cest. V obou skupinách byly krom pacient s p íslu nými nádory testovány kontrolní skupiny zdravých dobrovolník a nemocných s nenádorovými onemocn ními urogenitálního traktu a non-RCC nádory. U v ech nemocných byla hodnocena velikost nádoru rtg zobrazovacími metodami (sono, CT, NMR), endoskopicky nebo zm ením tumoru p i patologickém vy et ení preparátu. K pr kazu CA IX antigenu ve vzorcích nádor jsme pou ili imunohistochemické barvení pomocí monoklonální protilátky MAb M75. V extraktech z nádor a t...
|
|
|
Problematika prognostických faktorů u uroteliálního karcinomu močového měchýře
Soukup, Viktor ; Babjuk, Marek (vedoucí práce) ; Mareš, Jaroslav (oponent) ; Novák, Jaroslav (oponent)
Kvantita imunohistochemického vyšetření mikrovaskulární denzity u nemocných s povrchovým uroteliálním karcinomem močového měchýře může přinášet pomocnou prognostickou informaci. Souvislost mezi maximální mikrovaskulární denzitou (CD34-max) a intervalem bez progrese tumoru se blížila statistické významnosti a na větším souboru by mohla být statisticky významná. K definitivnímu určení významu mikrovaskulární denzity jako prognostického faktoru pro povrchový karcinom močového měchýře bude třeba provést rozsáhlejší studie. Statisticky významná souvislost mezi mikrovaskulární denzitou a jadernou akumulací p53 svědčí pro to, že p53 má určitou úlohu v regulaci nádorové vaskularizace u povrchového karcinomu močového měchýře. Míra exprese p53 ve vzorcích z nenádorové sliznice u s nemocných povrchovým uroteliálním karcinomem močového měchýře souvisí s vyšším rizikem recidivy tumoru. Podle našich výsledků je příčinou multifokality KMM spíše obecná genetická nestabilita přítomná v celém přechodním epitelu v době diagnózy tumoru. Exprese genu PAX5 je ve tkáni uroteliálního karcinomu močového měchýře častým nálezem. Z prognostického hlediska je nález zvýšené exprese genu PAX5 spojen s vyšším rizikem recidivy a progrese tumoru. Rozsah nádorové invaze do lamina propria se zdá být klinicky významný prognostický faktor ve...
|
|
|
Neinvazivní diagnostika uroteliálního karcinomu močového měchýře stanovením volné DNA a microRNA v moči
Brisuda, Antonín ; Babjuk, Marek (vedoucí práce) ; Hora, Milan (oponent) ; Broďák, Miloš (oponent)
Nádor močového měchýře (NMM) představuje nejčastější malignitu močového traktu. Jeho incidence vykazuje v posledních letech v ČR stabilní úroveň, celosvětově však narůstá. Zásadní je poměr incidence a mortality, který je u NMM ze všech nádorů močopohlavního traktu nejvyšší. Časná diagnostika a správná léčba je tedy pro prognózu určující. Existuje několik komerčně dostupných neinvazivních testů z moči, žádný z nich však zatím není doporučen jako standard v jakékoli indikaci. Cytologie moči tak se všemi svými limitacemi zůstává jediným široce používaným testem jako doplněk invazivní cystoskopie. Volné nukleové kyseliny v moči, respektive supernatantu moči, patří mezi potenciální nádorové biomarkery. Volná DNA (ucfDNA) je do moči vylučována z buněk podléhajících nekróze a apoptóze, nicméně mohou pocházet i z normálních živých buněk. Jejich hladina v moči nebo séru tedy může značit přítomnost nádorového onemocnění. Micro RNA (miRNA) jsou krátké nekódující sekvence RNA, které jsou produkovány mimo jádro a vážou se ke komplementárním sekvencím na mRNA, čímž ovliňují její translaci a tvorbu proteinů. Hrají tedy důležitou roli při dělení buněk a tedy i kancerogenzi. V naší práci jsme pomocí metod molekulární biologie porovnávali hladiny ucfDNA v supernatantu moči kontrol a pacientů s NMM různých...
|
|
|
Molekulární mechanismy karcinogeneze u karcinomu ledviny
Chocholatý, Matúš ; Babjuk, Marek (vedoucí práce) ; Soukup, Viktor (oponent) ; Eret, Viktor (oponent)
Receptor pro produkty pokročilé glykace (RAGE), solubilní RAGE (sRAGE) a jejich ligandy mají významné postavení v patogeneze karcinomu. Glyoxaláza I (GLO I) je enzym, který detoxifikuje prekurzory produktů pokročilé glykace (AGE). Použitím PCR-RFLP jsme analyzovali u 214 pacientů a 154 zdravých kontrol čtyři polymorfismy RAGE (rs1800625 RAGE -429T/C, rs1800624 - 374T/A, rs3134940 2184A/G, rs2070600 557G/A (G82S), a GLO1 rs4746 419A/C(E111A)). Zjistili jsme významný rozdíl ve frekvenci alel a genotypu GLO1 E111A (419A/C) SNP mezi nemocnými a kontrolní skupinou - vyšší frekvence alely C u ccRCC-58.6 vs. 44,5 % než u kontrol, OR (95 % CI) 1.77 (1.32-2.38), p=0.0002 (corrected p=0.001); OR (95 % CI) CC vs. AA 2.76 (1.5-4.80), p=0.0004 (corrected p= 0.002); a AC+CC vs. AA 2.03 (1.23-3.30), p=0.0034 (corrected p=0.017). Hodnoty sRAGE jsme hodnotili v podskupině 132 pacientů. sRAGE jsme stanovovali před operací a tři týdny, tři měsíce a 6 měsíců po operaci a v době relapsu. Podle relapsu jsme nemocné rozdělili do dvou skupin. Ve skupině bez relapsu došlo v průběhu sledování k elevaci sRAGE. Hodnota sRAGE u pacientů s relapsem byla stabilní. V naší práci jsme nezjistili rozdíl mezi kontrolou a skupinou ccRCC. Naše výsledky naznačují, že existuje spojení mezi E111A GLO I SNP a výskytem ccRCC a význam sRAGE...
|
|
|
Aktivita katepsinu B u pacientů s karcinomem močového měchýře
Dušek, Pavel ; Babjuk, Marek (vedoucí práce) ; Soukup, Viktor (oponent) ; Broďák, Miloš (oponent)
Karcinom močového měchýře je nejčastějším zhoubným nádorem urogenitálního traktu. Z neinvazivních diagnostických metod je v klinické praxi standardně využívána pouze cytologie se svými limity. Katepsin B je thiol - dependentní proteáza nalézající se za normálních okolností v lysozomech savčích buněk. Katepsin B se lysosomech podílí na degradaci proteinů a má různé funkce v udržení metabolismu buněk za fysiologických stavů. Výskyt katepsinu B anebo jeho proteinů a jejich vysoká aktivita je popsána u celé řady nádorových onemocnění. O jeho významu u urologických nádorů bylo dosud jen velmi málo zpráv. Aktivitu katepsinu B u pacientů s karcinomem močového měchýře jsme zjišťovali stanovením jeho exprese v nádorové tkáni a stanovením koncentrace katepsinu B a pro- katepsinu B v jejich séru moči. Naše výsledky potvrzují, že diagnostická účinnost pro- katepsinu B v moči moči je vysoká. Všechny dosud publikované studie jsou zaměřeny na vyšetřování biologicky aktivních proteinů. Pro-katepsin B je biologicky neaktivní molekula, která vykazuje významnou účinnost při vyšetřování pacientů s karcinomem močového měchýře. Z tohoto úhlu pohledu se jeví výsledky naší studie jako původní. Klíčová slova: karcinom měchýře, lysozomální enzymy, katepsin B, pro-katepsin B
|
|
|
Exprese CA IX antigenu u urogenitálních nádorů, zejména se zaměřením na karcinom ledviny a uroteliální tumory dolních močových cest
Hyršl, Lubomír ; Babjuk, Marek (vedoucí práce) ; Pacík, Dalibor (oponent) ; Hora, Milan (oponent)
Diserta ní práce Exprese CA IX antigenu u urogenitálních nádor , zejména se zam ením na karcinom ledviny a uroteliální tumory dolních mo ových cest 28 Souhrn Práce se zabývá studiem karbonické anhydrázy IX, která je p ítomna na membránách bun k n kterých urologických nádor , jako mo ného nádorového markeru. Cílem studie bylo p edev ím: 1) vy et it uvol ování solubilní formy karbonické anhydrázy IX z bun k stabilních nádorových linií a z krátkodobých kultur lidských nádor do kultiva ního média, 2) stanovit koncentrace s-CA IX v t lních tekutinách u nemocných s RCC a UC, 3) zhodnotit vliv velikosti nádoru nebo gradeu na koncentrace s-CA IX a 4) pokusit se zhodnotit mo nost vyu ití stanovení s-CA IX jako mo ného markeru t chto nádor . Vytvo ili jsme dv skupiny: 1. nemocní s RCC, 2. nemocní s UC vývodných mo ových cest. V obou skupinách byly krom pacient s p íslu nými nádory testovány kontrolní skupiny zdravých dobrovolník a nemocných s nenádorovými onemocn ními urogenitálního traktu a non-RCC nádory. U v ech nemocných byla hodnocena velikost nádoru rtg zobrazovacími metodami (sono, CT, NMR), endoskopicky nebo zm ením tumoru p i patologickém vy et ení preparátu. K pr kazu CA IX antigenu ve vzorcích nádor jsme pou ili imunohistochemické barvení pomocí monoklonální protilátky MAb M75. V extraktech z nádor a t...
|
|
|
Problematika prognostických faktorů u uroteliálního karcinomu močového měchýře
Soukup, Viktor ; Babjuk, Marek (vedoucí práce) ; Mareš, Jaroslav (oponent) ; Novák, Jaroslav (oponent)
Kvantita imunohistochemického vyšetření mikrovaskulární denzity u nemocných s povrchovým uroteliálním karcinomem močového měchýře může přinášet pomocnou prognostickou informaci. Souvislost mezi maximální mikrovaskulární denzitou (CD34-max) a intervalem bez progrese tumoru se blížila statistické významnosti a na větším souboru by mohla být statisticky významná. K definitivnímu určení významu mikrovaskulární denzity jako prognostického faktoru pro povrchový karcinom močového měchýře bude třeba provést rozsáhlejší studie. Statisticky významná souvislost mezi mikrovaskulární denzitou a jadernou akumulací p53 svědčí pro to, že p53 má určitou úlohu v regulaci nádorové vaskularizace u povrchového karcinomu močového měchýře. Míra exprese p53 ve vzorcích z nenádorové sliznice u s nemocných povrchovým uroteliálním karcinomem močového měchýře souvisí s vyšším rizikem recidivy tumoru. Podle našich výsledků je příčinou multifokality KMM spíše obecná genetická nestabilita přítomná v celém přechodním epitelu v době diagnózy tumoru. Exprese genu PAX5 je ve tkáni uroteliálního karcinomu močového měchýře častým nálezem. Z prognostického hlediska je nález zvýšené exprese genu PAX5 spojen s vyšším rizikem recidivy a progrese tumoru. Rozsah nádorové invaze do lamina propria se zdá být klinicky významný prognostický faktor ve...
|
host ::
RSS.