|
|
The role of galectins in cancer cell invasiveness
Remišová, Michaela ; Brábek, Jan (vedoucí práce) ; Kovář, Marek (oponent)
Galektiny jsou skupinou proteinů vázajících β-galaktozidázu, které mají mnoho funkcí ve všech druzích savčích buněk. V uplynulých letech se ukázalo, že galektiny, jmenovitě galektin-1 a galektin-3, mají důležitou roli v procesech nádorové progrese, včetně invazivity nádorových buněk, procesu nezbytného pro tvorbu metastáz. Jak extracelulární, tak intracelulární formy galektinů modifikují proces invazivity různými způsoby, a to interakcí s různými komponentami buňky nebo buněčných signalizačních drah. Cílem této bakalářské práce je shrnout mechanismy, kterými galektiny zvyšují invazivitu nádorových buněk. Klíčová slova: galektiny, galektin-1, galektin-3, invazivita, nádorová onemocnění, metastázy
|
|
|
Anti-tumor activity and toxicity of HPMA copolymer conjugates bearing cytostatic drug
Tomalová, Barbora ; Kovář, Marek (vedoucí práce) ; Smetana, Karel (oponent) ; Špíšek, Radek (oponent)
8 ABSTRAKT V této studii jsme se zaměřili na testování biologické aktivity a farmakologických vlastností vybraných konjugátů na bázi HPMA kopolymerů nesoucí léčivo. Určili jsme jejich cytostatickou aktivitu in vitro, toxicitu in vivo a terapeutický efekt v myších nádorových modelech. Porovnáním maximální tolerované dávky (MTD) dvou strukturně odlišných konjugátů na bázi HPMA kopolymerů nesoucích doxorubicin (DOX) vázaný pH senzitivní hydrazonovou vazbou (HPMA-DOXHYD ) jsme prokázali, že vysokomolekulární nedegradovatelný hvězdicový HPMA-DOXHYD konjugát má relativně nízkou MTD, přibližně 22,5 mg DOX/kg, zatímco lineární HPMA-DOXHYD konjugát má MTD okolo 85 mg DOX/kg. Lineární konjugát má tedy 3,7krát vyšší MTD než hvězdicový. Následně jsme také ukázali, že lineární konjugát je účinnější při léčbě solidního EL4 lymfomu zatímco hvězdicový konjugát jej předčil v léčbě BCL1 leukémie. Porovnali jsme také biologickou aktivitu hvězdicového a lineárního HPMA kopolymeru nesoucího docetaxel (DTX) vázaný pH senzitivní hydrazonovou vazbou (HPMA-DTXHYD ). MTD hvězdicového (~160 mg DOX/kg) byla 4krát vyšší než MTD volného DTX (40 mg/kg). MTD lineárního HPMA- DTXHYD konjugátu jsme nebyli schopni určit, jelikož převyšovala dávku 200 mg DTX/kg, což bylo nejvyšší množství, které jsme byli schopni podat jako bolus....
|
|
| |
|
|
Komplexy cytokin/anti-cytokin mAb a jejich biologická aktivita
Hnízdilová, Tereza ; Kovář, Marek (vedoucí práce) ; Grobárová, Valéria (oponent)
biologická aktivita některých cytokinů může být paradoxně zvýšena tvorbou komplexu některými svými monoklonálními protilátkami (mAb) rozpoznávajícími tento cytokin. Prodloužení poločasu eliminace z 2 mAb komplexy, neboť v použitém klonu mAb dochází k selektivní stimulaci buď CD25 2/S4B6 komplex) buněk. Díky výrazné stimulaci NK buněk a paměťových CD8 lymfocytů a pouze mírné stimulaci Treg buněk by IL nahradit konvenční IL vysoce selektivní stimulací Treg buněk naopak mohly uplatnit při léčbě autoimunitních onemocnění a transplantacích. Potenciálně klinicky využitelné jsou dále IL stimulaci žírných buněk, IL plazmatickými buňkami či IL proliferaci a přežívání T lymfocytů. Imunokomplexy mohou být tvořeny také cytokinem a jeho 15Rα komplexy představují generaci IL onistů, které mohou být díky stimulaci expanze NK buněk a paměťových CD8 T lymfocytů využity jako Klíčová slova 15Rα komplexy
|
|
|
IL-15/IL-15Rα komplexy jako superagonisté IL-15
Honzírková, Lucie ; Kovář, Marek (vedoucí práce) ; Javorková, Eliška (oponent)
Interleukin 15 vytváří se svým vysokoafinním receptorem IL-15Rα komplex IL-15/IL-15Rα. Pomocí tohot komplexu je prezentováno IL-15 in trans CD122/CD132 cílovým buňkám, u kterých spouští několik signalizačních drah. IL- 15 má důležitou roli v imunitním systému, neboť reguluje homeostatickou proliferaci paměťových CD8+ T lymfocytů a je velmi důležitý pro funkci, vývoj a homeostázu NK a NKT buněk. IL-15/IL-15Rα komplex exprimobaný na povrchu buněk může plně nahradit solubilní rekombinantní IL-15/IL-15Rα-Fc komplex, který má podstatně vyšší biologickou aktivitu než samotný IL-15 a chová se tak jako superagonista. Il-15/IL-15Rα-Fc komplexy jsou proto potenciálně slibné pro některé klinické aplikace jako imunoterapie nádorů, léčba HIV či vylepšení vakcinace.
|
|
|
Biodegradable high molecular weight polymeric conjugates for efficient delivery of cytostatic drugs into solid tumors.
Černý, Viktor ; Kovář, Marek (vedoucí práce) ; Palich Fučíková, Jitka (oponent)
Nádorová onemocnění představují jeden z nejzávažnějších problémů současné vědy i medicíny. Incidence maligních nádorů je celosvětově na vzestupu a představují závažný celospolečenský problém jak z důvodů ekonomických, tak společenských. Ačkoli pokroky v nádorové biologii, výzkumu nádorové terapie i imunologii umožnily zavést do klinické praxe mnoha nových léčebných protokolů, modalit i léčiv s molekulárně definovanou specificitou, mnoho nádorových onemocnění má stále velmi nepříznivou prognózu. Je tedy nezbytně nutné pokračovat v intenzivním výzkumu nových způsobů, jak rozšířit dostupné léčebné možnosti. Zavést do klinického užívání zcela nové léčivo je nicméně extrémně časově a finančně náročné a zahrnuje vysoké riziko neúspěchu. V posledních letech se z těchto důvodů objevil nový výzkumný trend, spočívající v pátrání po potenciálních látkách s protinádorovým účinkem mezi léčivy, která jsou nebo byla zavedena v lidské medicíně pro použití v nenádorových indikacích. Tento typ výzkumu může úspěšně zavést látku pro použití v nové indikaci podstatně snáze, rychleji a levněji než výzkum zcela nových terapeutik. Cílem této práce bylo prozkoumat protinádorovou účinnost jednoho z léčiv odhalených tímto přístupem, benzimidazolového anthelmintika mebendazolu. Mebendazol je rutinně užíván v klinické praxi od...
|
|
|
In vivo biologická aktivita a terapeutický potenciál imunokomplexů IL-2/anti-IL-2 mAb
Hnilicová, Šárka ; Kovář, Marek (vedoucí práce) ; Grobárová, Valéria (oponent)
Interleukin-2 patří spolu s interleukiny 4, 7, 9, 15 a 21 do rodiny γc cytokinů, která funguje v organismu jako hlavní regulátor homeostázy a funkce lymfocytů. Tyto cytokiny mají schopnost indukovat a podporovat proliferaci a přežívání lymfocytů, čímž významně ovlivňují hlavně adaptivní imunitní odpověď. Interleukin-2 (IL-2) je produkován převážně aktivovanými T buňkami a působí jak autokrinně, tak parakrinně. Kupodivu lze jeho aktivitu zvýšit vytvořením komplexu s určitými anti-IL-2 monoklonálními protilátkami. Takové IL-2/anti-IL-2 mAb imunokomplexy selektivně stimulují proliferaci různých populací imunitních buněk, v závislosti na použitém typu anti-IL-2 mAbs. Imunokomplexy IL-2/S4B6 jsou vysoce stimulační pro CD122high populace (paměťové CD8+ T buňky a NK buňky) a o něco méně i pro CD25+ populace (Treg a aktivované T buňky), zatímco IL-2/JES6-1 imunokomplexy aktivují výhradně CD25+ buňky. Tato protilátkami způsobená vyšší účinnost a selektivita působení IL-2 může mít významný potenciál v terapeutickém využití, a to jak v imunoterapii nádorů, tak i v autoimunitních onemocněních, vakcinaci nebo transplantologii.
|
|
|
Lokální produkce cytokinů po léčbě poškozeného povrchu oka pomocí kmenových buněk
Kössl, Jan ; Holáň, Vladimír (vedoucí práce) ; Kovář, Marek (oponent)
Poškození rohovky je jednou z nejčastějších příčin zhoršeného zraku nebo slepoty. Pokud je poškození oka rozsáhlé a zasahuje do oblasti limbu, niky limbálních kmenových buněk (limbal stem cells, LSC), dochází k jejich deficienci a tím ke ztrátě schopnosti přirozené regenerace rohovky. Dochází k invazi spojivkového epitelu, k zánětu a neovaskularizacím a rohovka se postupně stává neprůhlednou. Samotná transplantace rohovky k léčbě nestačí. Navíc při poškození obou očí je nutná transplantace limbu nebo LSC od alogenního dárce a takový zákrok je nutný podpořit systémovým a lokálním podáním imunosupresivních léků, které mají rozsáhlé vedlejší účinky. Nalezením vhodné autologní buněčné náhrady by bylo možné dávky imunosupresiv vysadit a tím tyto vedlejší účinky odstranit. Mesenchymální kmenové buňky (mesenchymal stem cells, MSC) představují vhodnou alternativu z důvodu svých imunomodulačních a diferenciačních vlastnostní. Z tukové tkáně nebo kostní dřeně lze získat dostatečné množství MSC. Naším cílem bylo sledovat lokální produkci cytokinů a dalších molekul spojených se zánětem po chemickém poškození myší rohovky a po léčbě kmenovými buňkami transplantovanými pomocí nanovlákenného nosiče na poškozený povrch oka. Porovnali jsme terapeutický účinek transplantovaných MSC, izolovaných z tukové tkáně nebo...
|
|
|
Polymeric conjugates for deliveryof cytostatic drugs and ABC transporter inhibitors in multi drug resistant tumors.
Sivák, Ladislav ; Kovář, Marek (vedoucí práce) ; Truksa, Jaroslav (oponent)
Jednou z vážných komplikací chemoterapie nádorů a častou příčinou jejího selhání je schopnost nádorových buněk odolávat účinkům cytotoxických látek. Při ztrátě citlivosti k určitému cytostatiku může být zachována citlivost k jiným léčivům. Velmi časté jsou však případy zkřížené rezistence nádorových buněk, a to i mezi protinádorovými léčivy, které se liší jak strukturou, tak mechanizmem účinku. Tento fenomén byl popsán jako mnohočetná léková rezistence (multidrug resistance, MDR). Existuje mnoho mechanizmů vzniku MDR, ale hlavní příčinu představuje zvýšená exprese ABC transportérů (ATP-binding cassette) a to zejména P-glykoproteinu (P-gp). Tyto ABC transportéry fungují jako ATP dependentní membránové pumpy exportující protinádorové léčiva z buňky a způsobující tak jejich sníženou intracelulární koncentraci. Cílem práce bylo prozkoumat potenciál polymerních léčiv na bázi N-(2- hydroxypropyl)metacrylamidových (HPMA) kopolymerů nesoucích buď cytostatikum, inhibitor ABC transportérů, nebo obojí vázané společně na jeden polymerní nosič pro překonání MDR mediované P-glykoproteinem na doxorubicin (Dox)-rezistentní buněčné linii myší leukemie P388/MDR. Bylo testováno několik nízkomolekulárních inhibitorů P-gp, a to reversin 121 (R121), reversin 205 (R205) a Ritonavir (RIT) a dále jejich derivátů, v...
|
|
|
Immunocomplexes of IL-2 and anti-IL-2 mAbs as a novel class of selective and extremely potent immunostimulators
Tomala, Jakub ; Kovář, Marek (vedoucí práce) ; Smetana, Karel (oponent) ; Špíšek, Radek (oponent)
vi SOUHRN Interleukin 2 (IL-2) se využívá jak v nádorové terapii, tak v mnoha dalších odvětvích včetně terapie chronických virových onemocnění či jako adjuvans ve vakcínách. Nicméně léčba pomocí IL-2 je limitována vážnými vedlejšími účinky spojenými s nezbytným vysoko dávkovaným léčivem. Nedávná studie popsala situaci, kde určité anti-IL-2 monoklonální protilátky (mAb) místo blokování funkce IL-2 jeho biologickou aktivitu potencovaly. Výsledkem vazby IL-2 a anti-IL-2 mAb je pak vznik superagonistických imunokomplexů s mnohem vyšší a selektivnější biologickou aktivitou v porovnání s volným IL-2 in vivo. Toto zjištění by mohlo v konečném důsledku vést ke zlepšení IL-2 terapií překonáním problémů spojených s jeho podáváním. Prokázali jsme, že imunokomplexy složené z IL-2 a anti-IL-2 mAb S4B6 (IL-2/S4B6) převážně stimulují buňky exprimující CD122 a CD132 (dimerní IL-2 receptor), i.e. NK a paměťové CD8+ T lymfocyty, stejně jako Treg, T a NKT buňky. IL-2/S4B6 jsou schopné indukovat expanzi aktivovaných naivních CD8+ T buněk a následný vznik funkční paměťovým buňkám podobné CD8+ T buněčné populace. Navíc mají jasný terapeutický potenciál jak samy o sobě, tak v kombinaci s novým typem cytostatik na bázi poly(N-(2-hydroxypropyl) metacrylamidu) (HPMA), což jsme ukázali na nádorovém modelu BCL1 leukémie a B16F10...
|
host ::
RSS.