|
|
Imunohistochemická analýza vlastností inhibičních glycinových a GABAB receptorů v MNTB
Trojanová, Johana ; Tureček, Rostislav (vedoucí práce) ; Druga, Rastislav (oponent) ; Vyklický, Ladislav (oponent)
Vlastnosti glycinových (GlyR) a GABAB (GABABR) receptorů byly studovány v mediálním jádře trapézovitého tělesa (MNTB) u dospělého potkana. MNTB je součástí sluchových jader mozkového kmene a je tvořeno skupinou buněk, mezi nimiž převažují tzv. hlavní neurony (PC). PC přijímají 2 typy synaptických vstupů. Excitační, přicházející z kontralaterálního anteroventrálního kochleárního jádra (AVCN), tvoří obrovské glutamátergní nervové zakončení, tzv. Heldův kalich (CH). Inhibiční vstupy jsou představovány glycinergními a GABAergními vlákny nejasného původu. Synapticky uvolněná GABA a glycin modulují excitační přenos v MNTB prostřednictvím receptorů exprimovaných presynaptickými a postsynaptickými neurony. Cílem práce bylo objasnit subcelulární distribuci a podjednotková složení těchto receptorů a přispět tak k lepšímu pochopení jejich funkce v MNTB. Při našich pokusech jsme používali imunohistochemické metody. Receptory na mozkových řezech byly značeny specifickými protilátkami, jejichž lokalizace v nervové tkáni byla provedena pomocí fluorescenční a elektronové mikroskopie. Experimentální práce byla rozdělena do tří etap. První část ukázala, že GlyR se v MNTB dělí na dvě odlišné populace. Postsynaptické receptory tvoří αβ heteromerické shluky na tělech a dendritech PC. Tyto shluky kolokalizují s glycinergními...
|
|
|
Neurony exprimující kalcium-vážící proteiny v neokortexu u nemocných s epilepsií a v perirhinální kůře potkana
Barinka, Filip ; Druga, Rastislav (vedoucí práce) ; Mareš, Jan (oponent) ; Paleček, Jiří (oponent)
Kortikální inhibiční interneurony jsou významnou komponentou neuronálních okruhů v mozkové kůře a jejích postižení pravděpodobně hraje důležitou roli v etiopatogenezi epilepsií. V první části své práce jsem se zabýval popisem změn jedné populace korových interneuronů - calretinin-exprimujících (CR+) interneuronů v neokortexu, konkrétně v temporálním neokortexu u pacientů s hipokampální sklerózou (nHSTN) a ve fokálních kortikálních dyspláziích (FCD). FCD jsou častou příčinou farmakorezistentní epilepsie. Cílem bylo popsat změny CR+ interneuronů v nHSTN a v různých typech FCD a porovnat je s již známými změnami parvalbumin exprimujících (PV+) interneuronů. Použito bylo imunohistochemické barvení na průkaz CR. Vyhodnocovány byly vzorky od 24 pacientů s farkmakorezistentní epilepsií, kteří podstoupili resekční epileptochirurgický zákrok, a dále kontrolní, post-mortem získané vzorky od devíti pacientů. Hodnocena byla denzita CR+ neuronů v jednotlivých typech vzorků. Zjistili jsme, že denzita CR+ interneuronů se nemění v nHSTN, v jednotlivých typech FCD dochází ale k jejich úbytku: na přibližně 70 % z normálních hodnot v FCD typu I a na přibližně 50 % v FCD typu II. V porovnání s dříve popsaným úbytkem PV+ neuronů je úbytek CR+ neuronů v obou typech FCD méně výrazný. Vedle nepoměru mezi korovou excitací a...
|
|
|
Funkční důsledky epileptických záchvatů a hypoxicko-ischemického poškození CNS
Krýsl, David ; Mareš, Jan (vedoucí práce) ; Druga, Rastislav (oponent) ; Jiruška, Přemysl (oponent)
Hypoxicko-ischemické postižení CNS a epileptické záchvaty mají řadu společnych patofyziologickych rysů. Základní mechanismy, ať už poškozující (excitotoxicita, volné radikály, zánět, změny propustnosti hematoencefalické bariéry, nekrotická a zejména apoptotická buněčná smrt), nebo reparační (glióza, neuroplasticita, neurogeneze, vaskulární proliferace) se vyskytují u obou typů poškození, mohou však byt vyjádřeny v různé míře a mohou probíhat v různém časovém horizontu. Hypoxie, ale též globální a fokální ischemie CNS, jsou u lidí i v experimentálních modelech za určitych podmínek doprovázeny epileptickymi záchvaty. Epileptické záchvaty naopak akutně i chronicky ovlivňují průtok krve mozkem (CBF). CBF a mozkovy metabolismus je zásadně ovlivněn při status epilepticus (SE). Změny CBF mohou vyznamně přispívat k patofyziologickym důsledkům záchvatů a mohou mít vztah i k některym jejich klinickym projevům (např. postparoxysmální Toddově hemiparéze (Mathews M.S. et al., 2008; Yarnell P.R., 1975)). Fokální ischemie CNS má často důsledky ve vzdálenych, ale funkčně propojenych oblastech (diaschíza). Dochází ke vzdálenému ovlivnění nejen průtoku krve a metabolismu, ale též excitability (Andrews R.J., 1991; Buchkremer-Ratzmann I. et al., 1996b). Také v rámci fokální epilepsie1 často dochází k ovlivnění metabolismu a...
|
|
|
Neuromorphology of the visual system in microphthalmic mammals: Identification of the primary visual cortex in strictly subterranean African mole-rats and visual acuity in echolocating bats
Miklušová, Zuzana ; Němec, Pavel (vedoucí práce) ; Druga, Rastislav (oponent)
Mikroftalmia sa v evucií vyvinula u nepríbuzných druhov mnohokrát nezávisle na sebe (napr. u, podzemných hlodavcov, hmyzožravcov, Afrosoricidov, vačkovcov; echolokujúcich netopierov a piskorov). Vzhľadom k tak rozsiahlej konvergentnej evolúcii, štúdium cicavcov s redukovanými očami poskytuje jedinečný prístup k chápaniu adaptívneho významu zmyslovej regresie a vplyvu periférnej redukcie na organizáciu centrálnych štruktúr. Táto práca je zameraná na dva problémy. V prvej časti tejto práce sme sa snažili identifikovať a lokalizovať primárny zrakový kortex (V1) u dvoch afrických rypošov, Fukomys anselli a Fukomys mechowii. Pomocou retrográdneho značenia a metódy montovania a krájania kortexu naplocho pre zvýraznenie kôrových oblastí som potvrdila prítomnosť V1 u oboch druhov. V1 je relatívne malá a v porovnaní s inými hlodavcami umiestnená v nezvyčajnej laterálnej polohe. Mnohonásobné injekcie s rozličnými tracermi umiestnené v rôznych oblastiach V1 vyústili v retrográdne značenie rozdielnych oblastí laterálneho genikulátneho thalamického jadra (DLG), čo značí zachovanie retinotopického usporiadania genikulo-striátnej dráhy. Avšak každá injekcia umiestnená do V1 vyústila tiež v robustnú retrográdnu projekciu v multimodálnych thalamických jadrách, napríklad v lateroposteriórnom komplexe (LP) alebo v...
|
|
|
Primary sensory cortices of microphthalmic mammals, adaptations to habitat and lifestyle
Miklušová, Zuzana ; Němec, Pavel (vedoucí práce) ; Druga, Rastislav (oponent)
Mikroftalmia sa v priebehu evolie vyvinula u nepruznch druhov cicavcov niekoľkokr nezisle na sebe (napr. u hlodavcov, echolokujich netopierov, piskorov). Vzhľadom k tak rozsiahlej konvergentnej evolii, štium cicavcov s redukovanmi očami poskytuje jedinečn prtup k chaniu adaptneho vznamu zmyslovej regresie a vplyvu perifnej redukcie na organiziu centrnych štrukt a kros modnu reorganiziu alebo kompenziu. V tejto pri som zhrnula naše sčsn znalosti o primnej senzorickej ke mikroftalmickch cicavcov. U podzemnch druhov (krt vchodoamerick, Scalopus aquaticus; krt hviezdonos, Condylura cristata; slepec egyptsk, Spalax ehrenbergi; rypoš lys, Heterocephalus glaber) je zreteľn expanzia somatosenzorickej ky, ktor spracova hmatov podnety. Hmat u nich hr veľmi dežit ohu pri orientii v podzemnch trojdimenzionnych tuneloch, ktor sa dynamicky menia. Mikroftalmick echolokuje netopiere, ktorch telo je prispoben letu, maj topograficky reorganizovan somatosenzorick ku, redukovan ku zrakov a zvčšn , zložito organizovan sluchov ku. Terestrick druhy piskorovitch (Soricidae, Insectivora) nemaj žiadne špecifick adpatie na ovni zmyslovej ky. Zaujav je však, že ich primna zrakov ka nie je vrazne redukovan naprik tomu, že maj veľmi redukovan oči ( 1 mm). Tieto poznatky jasne ukazuj , že organizia sentorickej ky održ druhovo špecifick...
|
|
|
Hemoprotein Nitric Oxide Synthase in Aplysia Californica
Buganová, Michaela ; Martásek, Pavel (vedoucí práce) ; Pelouch, Václav (oponent) ; Druga, Rastislav (oponent)
Oxid dusnatý (NO) má nezastupitelnou roli v neuronálni signalizaci v řadě eukaryotických a prokaryotických organizmů. NO-syntázy (NOS) jsou hem-obsahujicí monooxygenázy, které v přítomnosti kyslíku katalyzují oxidaci L-argininu na NO a L-citrulin. NO produkovaný NOsyntázou je plynná molekula, která lehce difunduje přes membrány a zprostředkovává jak mezibuněčnou, tak i vnitrobuněčnou komunikaci. NO aktivuje enzymy vážici kovy včetně solubilni guanylátcyklázy (sGC), a tím zvyšuje hladinu druhého posla cyklického guanosinmonofosfátu (cGMP) (1, 2), který dále zprostředkovává řadu fyziologických a patologických procesů v neuronech. Nicméně, detailní charakteristika nitrergních neuronů a funkce NO v centrální nervové soustavě (CNS) není zcela objasněna. Cílem dizertační práce bylo charakterizovat neuronálni NOS, proteiny spojené s metabolismem neuronálni NOS a signální dráhu NO v CNS zeje kalifornského (Aplysia cali/ornica), populárního experimentálního modelu buněčných a systémových neurověd. Na biochemické úrovni byla zjištěná závislost NOS Aplysie (/IcNOS) na kalciu- kalmodulinu (Ca-CaM) a NADPH. Řada reprezentativních inhibitorů savčích NOS isoforem též snížila NOS aktivitu u Aplysie. Polyklonálni protilátky vytvořené proti krysí NOS hybridizovaly na Western blotu s purifikovanou /IcNOS (160 kDa protein) z...
|
|
| |
|
|
Deviace osy páteře u hereditární motoricko-senzitivní neuropatie
Horáček, Ondřej ; Kučera, Miroslav (vedoucí práce) ; Druga, Rastislav (oponent) ; Bojar, Martin (oponent) ; Kittnar, Otomar (oponent)
Práce se komplexně zabývá problematikou deviací O.p. u HMSN. V souboru 141 paci ntů s HMSN byli vyhledáni a dále sledováni pacienti s deviací O.p. Cílem práce bylo upřesnit období vzniku, frekvenci, charakter, tíži a progresi deviací O.p. u HMSN. Takto komplexně dosud nebyly deviace O.p.u HMSN dosud hodnoceny. Výsledky sledování jsou v práci souhrnně prezentovány a to s přihlédnutím kjednotlivým genotypům HMSN. Dalším cílem práce bylo upře snit charakter postižení paraspinálního svalstva a vymezit, kdy se může toto postižení up latňovat při vzniku deviací o.p. Tyto údaje zatím také nebyly v souvislosti s HMSN publikovány. Ukázalo se, že z hlediska rozvoje deviací o.p. je významné difuzní neurogenní postižení zejména hlubokého monosegmentálního paraspinálního svalstva a to pokud je hodnoceno jako výrazné. Byl potvrzen předpokl ad, že u pacientů s deviací o.p. je přítomné neurogenní postižení paraspinálního svalstva. Výsledky studie ukazují, že je přítomné u všech pac ientů s deviací O.p. Též byl potvrzen předpoklad, že elektromyografické nálezy v oblasti paraspinálního svalstva u paci ntů s deviací o.p. a bez deviace o.p. jsou rozdílné - zatímco neurogenní postižení paraspinálního svalstva bylo zjištěno u všech pacientů s deviací o.p., ve skupině pacientů bez deviace o.p. se neurogenní postižení objevilo jen...
|
|
| |
|
| |
host ::
