| |
| |
|
Use of Chiral Separations for the Determination of Enzyme Enantioselectivity
Břicháč, Jiří ; Zima, Jiří (vedoucí práce) ; Tesařová, Eva (oponent) ; Flieger, Miroslav (oponent)
Závěr Enantioselektivni enzymy hrají významnou roly vmetabolických drahách chirá|ních látek. Enantioselektivní metabolismus produktu lipidové peroxidace HNE byl studoviín s vpžitímměření enrymové kinetiky' By|o zjištěno, žeALDH přítomné v mitochondriích z krysího mozku se lišíve schopnosti detoxifikovat jednotlivé enantiomery HNE. Z naměřených kinetických parametrů purifikovaných rekombinantních enzymů vyplyvá' žekrysí ALDHSA enantioselektivně oxiduje (R)-HNE, zatímco krysí ALDH2 nevykazuje žádnou enantioselektivitu. Dá|e, přímá a nepřímá reversní HPLC metoda pro stanovení HNEA enantiomerů byla vyvinuta a validována. Nepřímá metod a je za|oženana derivatizaci HNEA s chiráním amino činidlemANPAD, která je následovaná separací vzniklých diastereoisomeru na koloně Spherisorb oDS2. Přímá separace HNEA enantiomeru byla provedena s pouŽitím CSP na brízípolysacharidů na koloně Chiralpak AD.RH. Enantioselektivní enzymy jsou užitečnébiokatalyzátory, umožňujícílevnou přípraw opticky čistýchchemikálií. S použitímchirálního GC na cyklodextrinových CSP byl proveden screening epoxid hydroláz produkovaných rozličnýmimikroorganismy. Nové enantioselktivní enzymy by|y nalezeny. Tato disertačnípráce popisuje vyuoj a optimalizaci analytických metod pro stanovení ruzných sloučenin ýznamných v souvislosti s enzymovou...
|
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |