|
|
Use of Chiral Separations for the Determination of Enzyme Enantioselectivity
Břicháč, Jiří ; Zima, Jiří (vedoucí práce) ; Tesařová, Eva (oponent) ; Flieger, Miroslav (oponent)
Závěr Enantioselektivni enzymy hrají významnou roly vmetabolických drahách chirá|ních látek. Enantioselektivní metabolismus produktu lipidové peroxidace HNE byl studoviín s vpžitímměření enrymové kinetiky' By|o zjištěno, žeALDH přítomné v mitochondriích z krysího mozku se lišíve schopnosti detoxifikovat jednotlivé enantiomery HNE. Z naměřených kinetických parametrů purifikovaných rekombinantních enzymů vyplyvá' žekrysí ALDHSA enantioselektivně oxiduje (R)-HNE, zatímco krysí ALDH2 nevykazuje žádnou enantioselektivitu. Dá|e, přímá a nepřímá reversní HPLC metoda pro stanovení HNEA enantiomerů byla vyvinuta a validována. Nepřímá metod a je za|oženana derivatizaci HNEA s chiráním amino činidlemANPAD, která je následovaná separací vzniklých diastereoisomeru na koloně Spherisorb oDS2. Přímá separace HNEA enantiomeru byla provedena s pouŽitím CSP na brízípolysacharidů na koloně Chiralpak AD.RH. Enantioselektivní enzymy jsou užitečnébiokatalyzátory, umožňujícílevnou přípraw opticky čistýchchemikálií. S použitímchirálního GC na cyklodextrinových CSP byl proveden screening epoxid hydroláz produkovaných rozličnýmimikroorganismy. Nové enantioselktivní enzymy by|y nalezeny. Tato disertačnípráce popisuje vyuoj a optimalizaci analytických metod pro stanovení ruzných sloučenin ýznamných v souvislosti s enzymovou...
|
|
|
Use of Chiral Separations for the Determination of Enzyme Enantioselectivity
Břicháč, Jiří
Využití chirálních separací pro stanovení enantioselektivity enzymů Jiří Břicháč Enantioselektivita je schopnost chirálního prostředí rozlišit mezi dvěma enantiomery. Enantioselektivní enzym preferuje jeden z enantiomerů jako substrát nebo přednostně vytváří jeden z enantiomerů jako produkt. Enantioselektivní enzymy jsou užitečné biokatalyzátory, umožňující levnou přípravu opticky čistých chemikálií. V této práci byla stanovena enantioselektivita nových mikrobiálních epoxid hydroláz. Chirálně čisté epoxidy mohou být připraveny kinetickým rozlišením pomocí enantioselektivních epoxid hydroláz a mohou sloužit jako cenné stavební bloky při organické syntéze. Pro měření enantioselektivity byly vyvinuty metody pro analýzu různých chirálních epoxidů s využitím chirální GC na cyklodextrinových stacionárních fázích. Bylo prokázáno, že epoxid hydroláza produkovaná kmenem Aspergillus niger M200 enantioselektivně hydrolyzuje tert-butyl glycidyl ether.1 V druhé části této disertační práce byla studována podstata enantioselektivní oxidace trans-4-hydroxy-2-nonenalu (HNE) v mitochondrii z krysího mozku.2 HNE je cytotoxický produkt lipidové peroxidace který doprovází různorodé choroby včetně Alzheimerovy choroby. V této práci je popsaná enzymová kinetika detoxifikace HNE enantiomerů na trans-4-hydroxy-2-nonenovou kyselinu...
|
|
|
Use of Chiral Separations for the Determination of Enzyme Enantioselectivity
Břicháč, Jiří
Využití chirálních separací pro stanovení enantioselektivity enzymů Jiří Břicháč Enantioselektivita je schopnost chirálního prostředí rozlišit mezi dvěma enantiomery. Enantioselektivní enzym preferuje jeden z enantiomerů jako substrát nebo přednostně vytváří jeden z enantiomerů jako produkt. Enantioselektivní enzymy jsou užitečné biokatalyzátory, umožňující levnou přípravu opticky čistých chemikálií. V této práci byla stanovena enantioselektivita nových mikrobiálních epoxid hydroláz. Chirálně čisté epoxidy mohou být připraveny kinetickým rozlišením pomocí enantioselektivních epoxid hydroláz a mohou sloužit jako cenné stavební bloky při organické syntéze. Pro měření enantioselektivity byly vyvinuty metody pro analýzu různých chirálních epoxidů s využitím chirální GC na cyklodextrinových stacionárních fázích. Bylo prokázáno, že epoxid hydroláza produkovaná kmenem Aspergillus niger M200 enantioselektivně hydrolyzuje tert-butyl glycidyl ether.1 V druhé části této disertační práce byla studována podstata enantioselektivní oxidace trans-4-hydroxy-2-nonenalu (HNE) v mitochondrii z krysího mozku.2 HNE je cytotoxický produkt lipidové peroxidace který doprovází různorodé choroby včetně Alzheimerovy choroby. V této práci je popsaná enzymová kinetika detoxifikace HNE enantiomerů na trans-4-hydroxy-2-nonenovou kyselinu...
|
|
|
Use of Chiral Separations for the Determination of Enzyme Enantioselectivity
Břicháč, Jiří ; Zima, Jiří (vedoucí práce) ; Tesařová, Eva (oponent) ; Flieger, Miroslav (oponent)
Závěr Enantioselektivni enzymy hrají významnou roly vmetabolických drahách chirá|ních látek. Enantioselektivní metabolismus produktu lipidové peroxidace HNE byl studoviín s vpžitímměření enrymové kinetiky' By|o zjištěno, žeALDH přítomné v mitochondriích z krysího mozku se lišíve schopnosti detoxifikovat jednotlivé enantiomery HNE. Z naměřených kinetických parametrů purifikovaných rekombinantních enzymů vyplyvá' žekrysí ALDHSA enantioselektivně oxiduje (R)-HNE, zatímco krysí ALDH2 nevykazuje žádnou enantioselektivitu. Dá|e, přímá a nepřímá reversní HPLC metoda pro stanovení HNEA enantiomerů byla vyvinuta a validována. Nepřímá metod a je za|oženana derivatizaci HNEA s chiráním amino činidlemANPAD, která je následovaná separací vzniklých diastereoisomeru na koloně Spherisorb oDS2. Přímá separace HNEA enantiomeru byla provedena s pouŽitím CSP na brízípolysacharidů na koloně Chiralpak AD.RH. Enantioselektivní enzymy jsou užitečnébiokatalyzátory, umožňujícílevnou přípraw opticky čistýchchemikálií. S použitímchirálního GC na cyklodextrinových CSP byl proveden screening epoxid hydroláz produkovaných rozličnýmimikroorganismy. Nové enantioselktivní enzymy by|y nalezeny. Tato disertačnípráce popisuje vyuoj a optimalizaci analytických metod pro stanovení ruzných sloučenin ýznamných v souvislosti s enzymovou...
|
host ::
RSS.