|
| |
|
| |
|
|
Hmotnostně spektrometrické zobrazování
Vrkoslav, Vladimír ; Strnad, Štěpán ; Kučera, L.
Těžiště kurzu bude v MALDI hmotnostním zobrazování. V první části budou shrnuty poznatky a postupy přípravy vzorků, nanášení matrice, měření a vyhodnocováním MALDI MSI analýz. Následovat bude blok věnovaný praktickým zkušenostem MALDI MSI lipidů, metabolitů a dalších analytů na tkáňových řezech a jiných planárních površích. Závěr bude věnován molekulovému zobrazování s využitím dalších používaných ionizačních technik (DESI, DAPPI, LAESI, atd.).
|
|
| |
|
|
HPLC: NOVÝ PŘÍSTUP K ANALÝZE ALIFATICKÝCH UHLOVODÍKŮ S DLOUHÝM ŘETĚZCEM
Vít, Martin ; Vrkoslav, Vladimír (vedoucí práce) ; Schwarzová, Karolina (oponent)
Diplomová práce se zaměřuje na vývoj vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi (RP-HPLC) pro analýzu uhlovodíků s dlouhým alifatickým řetězcem a její optimalizaci. V teoretické části je popsán výskyt a vlastnosti uhlovodíků, použité separační metody a použité detektory - odpařovací detektor rozptylu světla (ELSD) a ionizace laserem za účasti matrice s analyzátorem doby letu (MALDI-TOF). V experimentální části je popsána izolace kutikulárních uhlovodíků masařky Neobellieria bullata, experimentální podmínky separace a detekce. Byla provedena důkladná optimalizace podmínek RP-HPLC - složení mobilní fáze, gradient, průtok mobilní fáze a teplota kolony. Optimalizace byla prováděna za použití ELSD. Jako vhodná mobilní fáze gradientové eluce byla zvolena kombinace rozpouštědel acetonitril : ethyl acetát, průtok mobilní fáze 0,8 ml/min a teplota separace 50řC. Vyvinutá metoda byla aplikována na analýzu kutikulárních uhlovodíků mouchy druhu Neobellieria bullata. Během separace byly jímány frakce a poté byly frakce analyzovány za využití techniky MALDI-TOF. Bylo identifikováno 37 uhlovodíků s alifatickým řetězcem obsahujícím 25 až 47 uhlíků a 0 až 3 dvojné vazby.
|
|
|
Analýza produktů metateze kardanolů pomocí metody HPLC-MS/MS
Flenerová, Zuzana ; Čabala, Radomír (vedoucí práce) ; Vrkoslav, Vladimír (oponent)
Kardanoly jsou v dnešní době stále více používanými látkami v průmyslu polymerů, barviv, brzdných materiálů, ad. Tyto látky podobné lipidickým sloučeninám podléhají za správných podmínek metatezi. Hlavním cílem diplomové práce je analýza produktů metateze kardanolů metodou HPLC-MS/MS. Pro kvantitativní HPLC analýzu byl připraven standard 3,3'-hexadec-8-en-1,16-diyldifenol, který je při metatezi kardanolů jedním z hlavních produktů. Tento standard byl připraven ve dvou krocích. Prvním krokem byla ethenolýza kardanolů za vzniku 3-(non-8-en-1-yl)fenolu. Druhým krokem přípravy byla homometateze 3-(non-8-en-1-yl)fenolu. Standard byl charakterizován pomocí metod HPLC/MS, EI-MS, ESI-MS/MS, UV/VIS, IR, Ramanovy a NMR spektroskopie. Druhá část práce je věnována studii mechanismu lokalizace dvojné vazby na dlouhých uhlovodíkových řetězcích metodou acetonitrilové APCI-MS. S pomocí jednoduchých modelových alkenů byla metodami MS a MS/MS zkoumána tvorba aduktů [M + 55]+ , které v této metodě hrají klíčovou roli. Nakonec byla navržena struktura a mechanismus vzniku aduktů [M + 55]+ a způsob jejich fragmentace. Klíčová slova: Kardanol, metateze olefinů, HPLC-MS, lokalizace dvojných vazeb, APCI, acetonitril
|
|
|
Targeted analysis and metabolism of fatty acids in mice and humans
Oseeva, Marina ; Kuda, Ondřej (vedoucí práce) ; Cahová, Monika (oponent) ; Vrkoslav, Vladimír (oponent)
Sedavý životní styl a nezdravé stravovací návyky v posledních několika desetiletích vedly k dramatickému nárůstu počtu lidí trpících obezitou, cukrovkou 2. typu a kardiovaskulárními chorobami. Studium těchto patologických stavů odhalilo, že tyto poruchy často způsobuje narušení metabolické rovnováhy. Výzkum lipidového metabolismu významně přispěl k určení mechanismů, které jsou základem metabolických poruch. Omega-3 mastné kyseliny jsou zajímavým tématem pro lipidomické studie, neboť se ukázalo, že snižují riziko kardiovaskulárních onemocnění a podílejí se na metabolismu lipidů. V této práci jsem optimalizovala postupy extrakce lipidů a jejich chemické modifikace za účelem analýzy profilu mastných kyselin ve vzorcích tkání a krve pomocí metody komplexní dvourozměrné plynové chromatografie spojené s hmotnostní spektrometrií (GCxGC-MS). Nejprve jsem hodnotila relativní množství omega-3 mastných kyselin v červených krvinkách (index Omega-3) lidí žijících v České republice buď v hlavním městě (n = 476), a nebo na venkově (n = 388). Pro tento rozsáhlý projekt jsem extrahovala fosfolipidy z membrán červených krvinek (RBC), transesterifikovala je na methylestery mastných kyselin (FAME) a změřila jejich profil pomocí GCxGC-MS. Průměrný index Omega-3 byl 3,56 mol% a nezjistila jsem žádný významný rozdíl v...
|
|
| |
|
|
Lokalizace poloh dvojných a trojných vazeb u methylesterů mastných kyselin pomocí HPLC/APCI-MS2
Horká, Petra ; Vrkoslav, Vladimír ; Cvačka, Josef
Poloha a počet dvojných vazeb v alifatickém řetězci ovlivňuje fyzikální, chemické a biologické vlastnosti lipidů, avšak jednoznačné určení poloh těchto násobných vazeb je problematické. V roce 2012 byla publikována metoda kapalinové chromatografie s chemickou ionizací za atmosférického tlaku s hmotnostní detekcí (HPLC/APCI-MS) [1] vhodná pro analýzu polohy dvojných vazeb využívající tvorby molekulových aduktů [M + C3H5N]+. při APCI za přítomnosti acetonitrilu. Methylestery mastných kyselin (FAMEs) byly analyzovány HPLC/APCI-MS2 se 100% acetonitrilem jako mobilní fází. Při APCI docházelo v plynné fázi k tvorbě reaktivních částic, vznikajících ze složek mobilní fáze, které se vázaly na násobné vazby v alifatickém řetězci FAMEs za vzniku aduktu [M + C3H5N]+.. Kolizně indukovanou disociací (CID) aduktu [M + C3H5N]+., se získaly diagnostické fragmenty určující polohu (polohy) násobných vazeb. Zmíněná metoda byla evaluována pro běžně analyzované polynenasycené FAMEs s tradiční polohu dvojných vazeb (methylene-interrupted).
|
|
|
Structural characterization of fatty acids with triple bond and unusual double bond positions by HPLC/APCI-MS2
Horká, Petra ; Vrkoslav, Vladimír ; Cvačka, Josef
Fatty acid methyl esters (FAMEs) were analyzed by reversed-phase HPLC coupled to atmospheric pressure chemical ionization (APCI) mass spectrometry. Acetonitrile was used as mobile phase. The gas-phase reactions of acetonitrile and unsaturated FAMEs in the APCI source provided [M + C3H5N]+• adducts. Subsequent MS/MS analysis of these ions gave diagnostic fragments. The formation and fragmentation of the acetonitrile-related adducts were utilized for the structural characterization of FAME with isolated double bonds in (Z)-9,19-hexacosadienoic acid methyl ester, FAME with conjugated double bonds in (Z)-9,11-octadecadienoic acid methyl ester and FAME with a triple bond in 9-octadecynoic acid methyl ester.
|
host ::
RSS.