Název:
HPLC: NOVÝ PŘÍSTUP K ANALÝZE ALIFATICKÝCH UHLOVODÍKŮ S DLOUHÝM ŘETĚZCEM
Překlad názvu:
HPLC: NEW APPROACH TO THE ANALYSIS OF ALIPHATIC HYDROCARBONES WITH LONG CHAIN
Autoři:
Vít, Martin ; Vrkoslav, Vladimír (vedoucí práce) ; Schwarzová, Karolina (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2015
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Diplomová práce se zaměřuje na vývoj vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi (RP-HPLC) pro analýzu uhlovodíků s dlouhým alifatickým řetězcem a její optimalizaci. V teoretické části je popsán výskyt a vlastnosti uhlovodíků, použité separační metody a použité detektory - odpařovací detektor rozptylu světla (ELSD) a ionizace laserem za účasti matrice s analyzátorem doby letu (MALDI-TOF). V experimentální části je popsána izolace kutikulárních uhlovodíků masařky Neobellieria bullata, experimentální podmínky separace a detekce. Byla provedena důkladná optimalizace podmínek RP-HPLC - složení mobilní fáze, gradient, průtok mobilní fáze a teplota kolony. Optimalizace byla prováděna za použití ELSD. Jako vhodná mobilní fáze gradientové eluce byla zvolena kombinace rozpouštědel acetonitril : ethyl acetát, průtok mobilní fáze 0,8 ml/min a teplota separace 50řC. Vyvinutá metoda byla aplikována na analýzu kutikulárních uhlovodíků mouchy druhu Neobellieria bullata. Během separace byly jímány frakce a poté byly frakce analyzovány za využití techniky MALDI-TOF. Bylo identifikováno 37 uhlovodíků s alifatickým řetězcem obsahujícím 25 až 47 uhlíků a 0 až 3 dvojné vazby.The aim of this diplom thesis was development of the reverse phased high performance liquid chromatography (RP-HPLC) for analysis the aliphatic hydrocarbons with long chain and optimalization of this method. In theoretical part is described occurrence and properties of a hydrocarbons, also used separation methods and detectors - evaporative light scattering detector (ELSD) and matrix assisted laser desorption ionization with time of flight analyzer. In experimental part is described izolation of cuticular hydrocarbons from a fly Neobellieria bullata. It was study experimental conditions of separation and detection izolated hydrocarbons. It was performed deep optimalization of conditions on RP-HPLC - composition of mobile phase, gradient, mobile phase flow rate and column temperature. Method optimalization was done by ELSD. It was used kombination of two solvents to mobile phase - acetonitrile : ethylacetate, mobile phase stream 0,8 ml/min and column temperature 50řC were found as optimal conditions for analytical separation. This method were aplicated for analysis cuticular hydrocarbons from fly specie Neobellieria bullata. During separation were collected fractions and then fractions were determined on MALDI-TOF. It was found 37 aliphatic hydrocarbons which included 25 up to 47 carbons and 0 to 3...
Klíčová slova:
alifatické uhlovodíky; hmotnostní spektrometrie; HPLC; aliphatic hydrocarbones; HPLC; mass-spectrometry