|
|
Chelatační vlastnosti experimentálně zkoušených chelátorů železa
Morkusová, Michaela ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Michela Morkusová Školitel: PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Název diplomové práce: Chelatační vlastnosti experimentálně zkoušených chelátorů železa Železo je životně důležitý prvek. Zastává mnoho důležitých funkcí. Pro organismus je nebezpečný jak jeho nedostatek, tak jeho nadbytek. Organismus není vybaven exkreční cestou pro železo, proto se za určitých okolností může přebytečné železo hromadit ve tkáních. K nadbytku železa dochází zejména při častém podávání krevních transfúzí nebo při geneticky vázaných onemocnění spojených s přetížení železem (hemochromatóza). Přetížení železem se léčí chelátory železa. Tyto látky ale mohou mít širší terapeutické využití, např. u akutního infarktu myokardu nebo nádorů. Cílem této diplomové práce byla snaha o stanovení stechiometrického poměru komplexu dvou experimentálně používaných chelátorů salicylaldehydisonikotinoylhydrazon (SIH) a ethylendiaminotetraoctové kyseliny (EDTA) s železnatými i železitými ionty při čtyřech různých patofyziologicky významných pH (4.5, 5.5, 6.8 a 7.5) za pomoci spektrofotometrie. Při vyhodnocování byly využity různé nové matematické přístupy ke stanovení stechiometrie komplexu a porovnány se standardní Jobovou metodou....
|
|
|
Optimalizace diagnostických metod oxidačního stresu
Mercová, Miroslava ; Macáková, Kateřina (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
66 ABSTRAKT Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky a ekologie Kandidát: Mgr. Miroslava Mercová Konzultant: Ing. Kateřina Macáková, PhD. Konzultant - specialista: doc. RNDr. Miroslav Pohanka, PhD. Název rigorózní práce: Optimalizace diagnostických metod oxidačního stresu Bylo vyvinuto mnoho metod pro detekci oxidačního stresu, ovšem dosud pouze malá pozornost byla věnována jejich optimalizaci pro zacházení se vzorkem. Zpracování vzorku a jeho skladování může mít dopad na stabilitu stanovovaných markerů a tím ovlivňovat získané výsledky. V této práci jsme se zabývali studiem vlivu několika cyklů zmrazování - rozmrazování na stabilitu vybraných markerů oxidačního stresu. Cílem bylo zhodnotit proces opakovaného zmrazování jako potenciální rizikový faktor, který může narušit přesnost měření. Homogenáty tkání potkanů kmene Wistar (mozek, játra, srdce, ledviny, slezina) byly pětkrát zmrazeny (-80 řC) a opětovně rozmrazeny na pokojovou teplotu. Hodnoty TBARS, FRAP, DPPH-testu, hladina redukovaného glutathionu a aktivita glutathion reduktasy byly měřeny po každém cyklu. Naměřená data ukazují změny v hladinách sledovaných markerů. Jejich stabilita byla ovlivněna ve všech testovaných vzorcích, a to již po prvním cyklu. V mnoha případech jsme nalezli mezi počtem...
|
|
|
The impact of SIRT1 inhibition on zebrafish morphology and behavior
Faustová, Zuzana ; Červený, Lukáš (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Zuzana Faustová Školitel: Prof. Doutor Jorge Miguel de Ascenção Oliveira PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D Název diplomové práce: Vliv inhibice SIRT1 na morfologii a chování Dánia pruhovaného Po objevu spojitosti mezi Silent Information Regulator 2 (Sir2) a jeho schopností ovlivnit délku života v kvasinkách, se Sir2 a jeho sedm savčích ortologů stalo velice zajímavým cílem. Byly nazvány sirtuiny a patří do rodiny histon deacetyláz. Funkce sirtuinů je jedinečná, jako kofaktor mají nikotinamid adenin dinukleotid a jejich aktivita může být ovlivněna vnějšími faktory. Cílem této práce bylo zjistit více o Sirtuinu 1 (SIRT1), který by měl být ze všech savčích sirtuinů nejvíce podobný Sir2 kvasinek. Nejprve jsme testovali vliv inhibice SIRT1 na raný vývoj embrya a larvy Dánia pruhovaného (Danio rerio). Zjistili jsme, že SIRT1 je důležitý pro normální vývoj a že jeho nedostatek způsobí poruchy kardiovaskulárního charakteru, zpoždění ve vývoji až smrt. Dále jsme se snažili zjistit více o spojitosti SIRT1 s Parkinsonovou chorobou, tím že jsme kombinovali netoxické dávky EX527, inhibitoru SIRT1, a 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP+ ), látkou využívanou k indukci symptomů Parkinsonovy choroby. Nicméně...
|
|
|
Stanovení permeace kofeinu přes kůži in vitro s využitím statických difúzních cel Franzova typu
Ostrovská, Lucie ; Vopršalová, Marie (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
Práce se věnuje stanovení metodiky pro analýzu dermální permeace a absorpce kofeinu in vitro. Zajištění standardních postupů při provádění experimentu je zásadní pro správné vyhodnocení a interpretaci výsledků. V první části se práce věnuje možnostem a způsobu transportu látek přes kožní bariéru. S narůstajícími výhodami, které poskytuje transdermální podání léčiv, se navyšuje počet studií zabývajících se možnostmi podání léčiv právě touto cestou. Na druhé straně lze také sledovat nebo předvídat riziko intoxikace po vystavení jedince různým druhům chemikálií. K získání reprodukovatelných výsledků je zapotřebí stanovit standardní metodiku. V této práci byl zvolen za modelovou hydrofilní sloučeninu kofein. Kožní bariéru představovala dermatomovaná kůže prasete o dvou rozdílných tloušťkách z oblasti břicha a ucha. Za použití Franzových cel bylo provedeno celkem 8 pokusů s různými typy kůže a to ve variantách finite a infinite dávkování. Experimentální část práce se zaměřuje na vlastní stanovení prostupu kofeinu. Měření se provádělo jak ve vlastní receptorové tekutině, tak v jednotlivých vrstvách kůže a na jejím povrchu. Ke stanovení bylo použito metod spektrofotometrie a HPLC. Byla potvrzena schopnost kofeinu permeovat všemi vrstvami kůže a získané výsledky jsou interpretovány jako množství...
|
|
|
Srovnání železo redukčních vlastností flavonolů a flavanonů
Kyjovská, Veronika ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Karlíčková, Jana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Veronika Kyjovská Školitel: PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Název diplomové práce: Srovnání železo-redukčních vlastností flavonolů a flavanonů Cílem této diplomové práce bylo srovnat železo-redukční vlastnosti flavonolů a flavanonů v různých koncentracích, v různých patofyziologických pH a v nepufrovaném prostředí. K tomuto cíli byla využita spektofotometrická metoda s indikátorem železnatých iontů, ferrozinem. Výsledky v pH 4,5 a v nepufrovaném prostředí byly téměř srovnatelné, zatímco v pH 5,5 flavonoidy neprokázaly téměř žádnou redukční aktivitu. Při pH 6,8 a 7,5 flavonoidy neredukovaly železité ionty vůbec. Zástupci s největší redukční aktivitou patří převážně do skupiny flavonolů (kvercetin, kaempferol, morin, myricetin). Pouze jeden zástupce flavanonů - taxifolin projevil stejnou redukční aktivitu jako jmenovaní zástupci flavonolů. Je to zřejmě způsobeno přítomností 3-hydroxyskupiny v C kruhu. Ostatní zástupci flavanonů tuto skupinu neobsahují a vykazují minimální redukční schopnosti. Sníženou redukční aktivitu má také zástupce flavonolů - rutin, který má tuto 3-hydroxyskupinu substituovanou cukerným zbytkem. Redukční vlastnosti flavonoidů mohou vést k potenciaci Fentonovy reakce,...
|
|
|
Patofyziologické hodnoty myokardu potkana po aktuní expozici izoprenalinu
Kostinková, Veronika ; Semecký, Vladimír (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Veronika Kostinková Školitel: Doc. RNDr. Vladimír Semecký, CSc. Název diplomové práce: Patofyziologické hodnoty myokardu potkana po akutní expozici isoprenalinu Kardiovaskulární choroby zůstávají i přes výrazné pokroky v medicíně jednou z hlavních příčin úmrtnosti. K objasnění patogeneze akutního infarktu myokardu (AIM) a výzkumu kardioprotektivních látek se využívá modelové poškození myokardu laboratorních zvířat navozené isoprenalinem (ISO). Hlavním cílem v provedeném experimentu bylo sledování včasných histopatologických změn objevujících se v myokardu laboratorního potkana po 2 hodinách od aplikace 100 mg.kg-1 ISO s.c. Histologické výsledky byly dále ve spolupráci s Katedrou farmakologie a toxikologie doplněny o funkční parametry a biochemické markery stanovené také po 2 hodinách od aplikace. Zjištěné změny byly porovnávány oproti kontrolní skupině, které bylo aplikováno pouze rozpouštědlo. Histopatologická analýza odhalila změny, které byly četnější a výraznější v subendokardiální oblasti. V myokardu a to zejména v oblasti hrotu bylo pozorováno edematózní rozšíření, fragmentace svalových vláken a kulatobuněčná infiltrace. Funkční parametry v podobě tepové frekvence a krevních...
|
|
|
Stanovení chelatace iontů železa 4-acyl-5-pyrazolony přímou spektrofotometrií
Jarkovská, Stanislava ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmakologie a Toxikologie Kandidát: Mgr. Stanislava Jarkovská Konzultant: PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Název rigorózní práce: Stanovení chelatace iontů železa 4-acyl-5-pyrazolony přímou spektrofotometrií. Chelátory železa jsou racionální léčbou řady vrozených a získaných hematologických poruch a onemocnění, při kterých je organismus přesycen nebezpečným železem. Nejčastěji se s touto patologickou odchylkou setkáváme u pacientů s anemiemi, kteří jako symptomatickou léčbu dostávají opakované krevní transfuze. Kumulace železa signifikantně zvyšuje morbiditu a mortalitu těchto pacientů, pokud není léčena. V současnosti se intenzivně studují i další možnosti využití chelátorů železa, a to zejména při léčbě akutního infarktu myokardu, některých typů rakoviny či malárie. V prvních dvou zkoušených indikací hraje pokles pH významnou roli. Předmětem této rigorózní práce je ověření železo-chelatační aktivity vybraných látek ze skupiny 4-acyl-5-pyrazolonů s využitím přímé UV-VIS spektrofotometrie při různých patofyziologicky významných pH. Byly vybrány dvě látky z této skupiny - fenyl- a thienylderivát základní struktury, jejichž chelatační vlastnosti byly předem úspěšně ověřeny screeningovou ferrozinovou metodou. Obě testované...
|
|
|
Srovnání chelatačních účinků klinicky používaných perorálních chelátorů a 8-hydroxychinolinů
Zárubová, Pavla ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Pavla Zárubová Konzultant: PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Název práce: Srovnání železo chelatačních účinků klinicky používaných perorálních chelátorů a 8-hydroxychinolinů Železo je esenciálním prvkem účastnícím se na celé řadě životně důležitých procesů. Avšak nadbytečné železo může být pro organismus toxické v důsledku katalýzy tvorby volných radikálů. Nejčastější příčinou přetížení organismu železem (tzv."iron overload") je dlouhodobé podávání transfuzí u různých typů anémií. Každá transfuze představuje přívod 200-250 mg železa do organismu, což při vylučování 1- 2 mg denně vede ke hromadění železa v organismu. Důsledkem je vznik komplikací, jako jsou např. srdeční poškození a fibróza jater. Riziko vzniku těchto vážných komplikací lze snížit podáváním chelátorů železa. K chelatační terapii u chronického přesycení organismu železem se tradičně používá deferoxamin, k jeho nevýhodám ale patří nutnost částé parenterální aplikace. V současné době jej lze nahradit modernějšími perorálně podávanými chelátory (deferasirox, deferipron). Nabízí se ale také celá řada potenciálních nových indikací (záněty, nádory, kardiovaskulární a neurodegenerativní onemocnění). Ve všech těchto stavech...
|
|
|
Ovlivnění modelu isoprenalinového poškození myokardu potkana vybranými látkami s kardioprotekivním potenciálem.
Koulová, Jana ; Semecký, Vladimír (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Jana Koulová Školitel: Doc. RNDr. Vladimír Semecký, CSc. Název diplomové práce: Ovlivnění modelu isoprenalinového poškození myokardu potkana vybranými látkami s kardioprotektivním potenciálem. Kardiovaskulární choroby jsou jednou z hlavních příčin úmrtnosti. K objasnění pato- geneze akutního infarktu myokardu (AIM) a výzkumu kardioprotektivních látek se využívá modelové poškození myokardu laboratorního potkana navozené isoprenali- nem (ISO). Tato práce hodnotila kardioprotektivní potenciál intravenózně podaného rutinu v jednorázové dávce 11,5 mg/kg na myokard potkana, kterému byla později subkutánně podána jednorázová dávka ISO (100 mg/kg). Hlavním cílem v provede- ném experimentu bylo sledování funkčních, biochemických a histologických změn objevujících se v myokardu laboratorního potkana po 2 hodinách od aplikace u ISO skupiny a u skupiny rutinu s ISO. Sledované změny byly porovnávány mezi sebou a také oproti kontrolní skupině, které bylo intravenózně aplikováno pouze rozpouště- dlo NaHCO3 v jednorázové dávce 4,6 ml/kg. Funkční parametry v podobě tepové frekvence a krevních tlaků vykázaly po 2 hodi- nách od aplikace předpokládaný vývoj shodný s dosud provedenými studiemi ISO. Došlo...
|
|
|
Železo-chelatační vlastnosti vybraných nových chelátorů ze skupiny 4-acyl-5-pyrazolonů II
Břečková, Anna ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Hašková, Pavlína (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Anna Břečková Školitel: PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Název diplomové práce: Železo-chelatační vlastnosti vybraných nových chelátorů ze skupiny 4-acyl-5-pyrazolonů II Nedostatek i nadbytek železa v organismu hraje důležitou roli v patofyziologii některých onemocnění. Podání chelátorů železa je vhodnou terapií při nadbytku železa, zejména v terapii hematologických onemocnění, u kterých dochází vlivem dlouhodobého podávání krevních transfuzí k chronickému přetížení organismu železem. Chelatační terapie se jeví jako nadějná i u jiných onemocnění (akutní infarkt myokardu, nádorová onemocnění apod.). Podle předpokládaného využití je pak třeba mimo jiné zohlednit: 1) perorální účinnost, 2) aktivitu v kyselém prostředí a 3) schopnost redukce železitých iontů na železnaté (riziko prooxidačního působení). Cílem této diplomové práce bylo pomocí ferrozinové spektrofotometrické zkoušky ověřit železo-chelatační aktivitu vybraných látek ze skupiny 4-acyl-5-pyrazolonů. Z této skupiny byly vybrány čtyři sloučeniny: p-nitrofenyl- a p-terc- butylfenylderivát základní struktury a dva deriváty značené jako H2Q3Q a H2QPy, které představují zdvojené molekuly základní struktury 4-acyl-5-pyrazolonu. Všechny...
|
host ::
RSS.