|
|
Porovnání ESI a APCI ionizace při vývoji UHPLC-MS/MS metodiky pro stanovení fenolických kyselin
Pecha, Stanislav ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Stanislav Pecha Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Porovnání ESI a APCI ionizace při vývoji UHPLC-MS/MS metodiky pro stanovení fenolických kyselin. Fenolické kyseliny jsou aromatické sekundární metabolity široce rozšířené v celé rostlinné říši. Tato práce byla zaměřena na vývoj metody pro stanovení skupiny fenolických kyselin pomocí ultra vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostním spektrometrem typu trojitého kvadrupólu. K separaci analytů byla použita kolona BEH C18 (1,7 µm; 2,1 x 100 mm). V rámci této práce byly optimalizovány parametry hmotnostního spektrometru s využitím ionizace elektrosprejem a chemické ionizace za atmosférického tlaku. Na závěr byla hodnocena citlivost, linearita a opakovatelnost metody. Nejprve byl proveden základní sken směsi analytů a byly vybrány vhodné prekurzorové ionty. Následovala optimalizace iontového zdroje (ionizace ESI- a APCI- ). Dalším krokem bylo provedení skenu produktových iontů a výběr vhodných iontových přechodů pro kvantifikační mód SRM a optimalizace jejich kolizních energií. Po optimalizaci nastavení byla změřena opakovatelnost (RSD < 1% pro retenční čas; RSD < 10% pro plochu píků, kromě...
|
|
|
Využití UHPLC-MS/MS metody pro hodnocení vlivu ochucovadel na obsah katechinů v čajích a na matricové efekty
Pavlík, Jakub ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Jakub Pavlík Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph. D. Název diplomové práce: Využití UHPLC-MS/MS metody pro hodnocení vlivu ochucovadel na obsah katechinů v čajích a na matricové efekty Tato diplomová práce vychází z poznatků uveřejněných v časopise Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis [1], ve kterém je popsán výskyt matricových efektů v několika vzorcích ochucených čajových nálevů. Naměřené matricové efekty nebyly příliš vysoké (od -5.3 % do +10,4 %), stejně jako počet hodnocených vzorků. V rámci výzkumu v této diplomové práci k analýze komerčně dostupný čajů, přičemž se jednalo o čaj sáčkový (Pickwick) a sypaný (Basilur). Sypaný čaj byl použit pro tvorbu vlastních lépe definovaných směsí. Pro výzkum bylo použito 11 různých ochucovadel, která jsou běžně využívána. Jednalo se o: plod brusinky, list máty, plod šípku, citrónovou kůru, pomerančovou kůru, kořen zázvoru, květ růže, skořicovou kůru, citrónovou trávu, květ jasmínu a vanilku. Analýza probíhala na přístroji ACQUITY Ultra Performance LC (Waters) s kolonou - ACQUITY CSH C18 2,1 x 100 mm, 1,7 μm (Waters)a s využitím podmínek popsaných v článku [1]. Byl hodnocen obsah katechinů a matricové efekty, a to v ochucených i...
|
|
|
Hodnocení vlivu rozpouštědel na uchovávání kolon pro superkritickou fluidní chromatografii
Lidvinová, Kateřina ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Khalikova, Maria (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Kateřina Lidvinová Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení vlivu rozpouštědel na uchovávání kolon pro superkritickou fluidní chromatografii Diplomová práce se zabývá hodnocením vlivu rozpouštědel na uchovávání kolon pro superkritickou fluidní chromatografii. Práce byla zaměřena zejména na stárnutí kolon, které se projevuje zkrácením retence, popřípadě změnou selektivity kolony při jejím skladování. Experimenty byly prováděny na SFC přístroji ACQUITY UPC2 s PDA detektorem a detekce probíhala při vlnové délce 225 nm pro směs neutrálních látek a při 230 nm pro směs látek s acidobazickou aktivitou. Jako stacionární fáze byly použity kolony ACQUITY UPC2 BEH 1,7 µm a ACQUITY UPC2 BEH 2-EP 1,7 µm o rozměrech 3,0 x 100 mm (Waters, USA). Tyto kolony byly vždy po separaci uloženy do různých rozpouštědel, konkrétně do CO2, isopropanolu, acetonitrilu a hexanu, ve kterých byly skladovány až do dalšího použití. Jako mobilní fáze byl pro směs neutrálních látek použit CO2, do nějž byl přidáván organický modifikátor metanol. Pro směs látek s acidobazickou aktivitou byl také použit CO2 s metanolem a navíc bylo přidáno aditivum 20 mM mravenčan amonný. Rychlost průtoku...
|
|
|
Analýza historických léčivých přípravků naloxonu, adrenalinu a efedrinu.
Nováková, Lucie ; Nesměrák, Karel (vedoucí práce) ; Červený, Václav (oponent)
Cílem diplomové práce byla analýza historických léčivých přípravků, zahrnující stanovení obsahu léčivé látky a identifikaci jejích případných degradačních produktů. Historický léčivý přípravek naloxonu byl analyzován hmotnostní spektrometrií. Historické léčivé přípravky adrenalinu a efedrinu byly analyzovány pomocí UHPLC-MS a kvantifikovány metodou kalibrační přímky. V historické injekční formě naloxonu, "NARCAN", datované kolem roku 1980, nebyly pozorovány žádné degradační produkty a naměřené hmotnostní i UV spektrum odpovídalo spektrům pro naloxon. Analyzovaný vzorek naloxonu byl stabilní i po 35 letech skladování. V analyzované historické injekční formě adrenalinu, "Adrenalin Hydrochlor., Dr. Heisler" (datované mezi léty 1917 a 1938) bylo stanoveno 5,26 ± 0,11 % deklarovaného množství adrenalinu. V naměřených spektrech byly patrné degradační produkty, které však zatím nebyly v literatuře popsány a jejich identifikace byla nad rámec této práce. Analyzovaný vzorek adrenalinu byl v průběhu cca devadesáti let téměř kompletně degradován. Stabilitní test prováděný se čtyřmi roztoky standardu adrenalinu prokázal vliv kyslíku, světla, teploty i času na degradaci adrenalinu. V historické injekční formě efedrinu, "Ephedrin" (datovaném mezi léty 1945 a 1948), bylo stanoveno 107,58 ± 0,39 % deklarovaného množství...
|
|
|
Vývoj postupu extrakce pro izolaci pravastatinu a jeho metabolitu z biologického materiálu pomocí SPE
Rabatinová, Martina ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Martina Rabatinová Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj postupu extrakce pro izolaci pravastatinu a jeho metabolitu z biologického materiálu pomocí SPE Statiny jsou skupinou léčiv používaných ke snižování hladin cholesterolu. Jde o inhibitory 3-hydroxy-3-metylglutaryl-koenzym A reduktázy. Tato práce se zabývá vývojem metody pro kvalitativní a kvantitativní analýzu pravastatinu a pravastatinu laktonu v potkaní moči. Metoda byla využita pro farmakokinetickou studii. Extrakce z biologického materiálu byla provedena na SPE kolonce Discovery DSC-18. Promývací i eluční činidla byla složena z vhodných poměrů acetonitrilu a 10 mM pufru octanu amonného, pH 4,5. Množství extrakčních kroků bylo optimalizováno tak, aby došlo k eliminaci většiny matricových nečistot. Jako separační a detekční technika byla využita ultravysokoúčinná kapalinová chro- matografie ve spojení s hmotnostně spektrometrickým detektorem typu trojitého kva- drupólu. Separace byla provedena na koloně BEH C18 2, 1 × 100 mm s částicemi o ve- likosti 1, 7 µm. Jako mobilní fáze byla vybrána směs acetonitrilu a 0, 5 mM roztoku octanu amonného o pH 4,0. Analýza probíhala při podmínkách gradientové eluce...
|
|
|
Nezaměstnanost v regionu Vrchlabí
Nováková, Lucie ; Tichá, Milena (vedoucí práce) ; Kubišová, Zuzana (oponent)
Cílem této práce je analyzovat na základě teoretických poznatků nezaměstnanost v regionu Vrchlabí. Práce je rozdělena do dvou hlavních kapitol. První část charakterizuje podstatu nezaměstnanosti, její příčiny, dopady na společnost a zhodnocení způsobu měření míry nezaměstnanosti. Druhá část se věnuje nezaměstnanosti v regionu Vrchlabí a to ve zkoumaném období od roku 2005 až do roku 2011. Na základě teoretických východisek jsou zde analyzována kvantitativní data, na základě kterých jsou navrhnuta řešení dané situace v regionu.
|
|
|
Vývoj rychlé a citlivé UHPLC-MS/MS metody pro stanovení kyseliny salicylové a jejích derivátů
Sušánková, Iva ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Iva Sušánková Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj rychlé a citlivé UHPLC-MS/MS metody pro stanovení kyseliny salicylové a jejích derivátů Cílem diplomové práce byl vývoj metody pro stanovení kyseliny salicylové (SAL) a jejích derivátů, kyselin 2,3- a 2,5- dihydroxybenzoových (DHBA) za použití UHPLC ve spojení s MS/MS. Tato metoda umožní nepřímé stanovení volných hydroxylových radikálů. Vzhledem k vysoké reaktivitě je jejich přímé stanovení je obtížné a nepřesné. Při této nepřímé metodě jsou stanovovány látky, které vznikají adicí hydroxylových radikálů. Příkladem jsou kyseliny 2,3- a 2,5- dihydroxybenzoové, které vznikají adicí radikálů na kyselinu salicylovou. Jedná se o stabilní produkty, které mohou být snadno detekovány a kvantifikovány. Tyto sloučeniny mohou být použity pro in vitro i in vivo stanovení hydroxylových radikálů. Spojení ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie (UHPLC) s tandemovou hmotnostní spektrometrií (MS/MS) poskytuje mnoho výhod: zrychlení analýzy a zvýšení selektivity a citlivosti metody. Byly testovány dvě chromatografické kolony. První, Acquity BEH Shield RP18 , poskytovala nevyhovující výsledky. Druhá, Acquity BEH C18, naopak...
|
|
|
Brittle tectonics in the NE Bohemian Massif as related to recent tectonic movements indicated by GPS measurement
Nováková, Lucie
[in Czech] Pro severovýchodní část Českého masívu je charakterická řada zlomů ve směru SZ-JV. Sudetské okrajové zlomové pásmo (SMFZ) a Hronovsko-Poříčské zlomové pásmo (HPFZ) představují hlavní seismicky aktivní poruchy v oblasti. S cílem vytvořit robustní, geologické realitě odpovídající, model tektonické situace studované oblasti byl proveden terénní strukturně-geologický průzkum zaměřený na křehké porušení hornin. V průběhu průzkumu bylo na 116 lokalitách, na přirozených výchozech i v lomech, změřeno téměř 5000 zlomů a puklin. V zóně SMFZ jsou dvě základní skupiny zlomů orientovány ve směru S-J a Z-V. Tyto zlomy většinou strmě upadají pod úhlem 80-90ř. Lineace nalezené na zlomech přitom obvykle směřují k JZ a Z. Pro jednotlivé typy zlomů byla provedena analýza četnosti orientací zlomových ploch. Zlomy byly pomocí paleonapěťové analýzy rozděleny do šesti různých tektonických fází, v nichž vznikaly nebo byly reaktivovány, a fáze byly seřazeny podle relativního stáří. V oblasti SMFZ byly identifikovány následující tektonické fáze (od nejmladší po nejstarší): strike-slip režim s maximální kompresí (σ1) ve směru SSZ-JJV, kompresní režim s σ1 ve směru ZSZ - VJV, dva následující extenzní režimy s minimální kompresí (σ3) ve směru VSV- ZJZ (s lišícími se kvazi-vertikálními σ1), strike-slip režim s...
|
|
|
Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení skupiny statinů a jejich metabolitů
Svoboda, Pavel ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Novák, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Pavel Svoboda Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení skupiny statinů a jejich metabolitů Tato diplomová práce se zabývá vývojem metody pro stanovení skupiny statinů a jejich metabolitů pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem typu trojitého kvadrupólu. V rámci diplomové práce byly optimalizovány chromatografické podmínky a parametry hmotnostního spektrometru. Na závěr byla hodnocena citlivost, linearita a opakovatelnost metody. Pro separaci byla zvolena kolona BEH C18 (50 x 2,1 mm; 1,7 µm). Výběr kolony byl proveden při použití UV spektrofotometrického detektoru. Mobilní fáze pro gradientovou eluci byla tvořena 0,1 mM octanem amonným o pH = 4 a acetonitrilem v počátečním poměru 70:30. Optimalizace parametrů hmotnostního spektrometru byla započata výběrem prekurzorových iontů po přímé infuzi standardů. Následně byly podrobeny optimalizaci parametry iontového zdroje. Po výběru produktových iontů byly optimalizovány iontové přechody. Optimalizace iontových přechodů byla doplněna hodnocením vlivu aditiv na ionizaci. Všechny zmíněné kroky byly hodnoceny jak v pozitivním, tak...
|
|
|
Optimalizace kroku přípravy vzorku biologického materiálu pro UHPLC-MS/MS analýzu atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů
Pilařová, Veronika ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Veronika Pilařová Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace kroku přípravy vzorku biologického materiálu pro UHPLC- MS/MS analýzu atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů. Cílem této diplomové práce bylo optimalizovat UHPLC-MS/MS metodu určenou pro stanovení koncentrace atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů v biologickém materiálu a dále vyvinout a optimalizovat metodu pro přípravu vzorku biologického materiálu technikou MEPS, t. j. mikroextrakcí pomocí tuhého sorbentu, a tuto metodu zvalidovat. K separaci analytů byla využita kolona Acquity BEH C18 (50 x 2,1 mm, 1,7 µm, Waters). Ionizace analytů byla provedena elektrosprejem v pozitivním i v negativním módu. Jako detektor byl použit trojitý kvadrupól. U každého analytu byl zvolen prekurzorový ion, ion fragmentu a optimalizována kolizní energie a napětí na vstupním kuželu pro každou látku zvlášť. Kvantifikace látek byla provedena pomocí SRM (monitorování vybrané reakce). Pro rosuvastatin lakton, který byl stanovován v pozitivním módu, byla prekurzorovým iontem zvolena protonovaná molekula [M+H]+ . Pro zbylé statiny byl v negativním módu vybrán prekurzorový ion [M-H]- , který měl největší...
|
host ::
RSS.