|
|
Exprese a funkce nukleofosminu (B23) během preimplantačního vývoje skotu
Benešová, Veronika ; Kaňka, Jiří (vedoucí práce) ; Krylov, Vladimír (oponent)
Abychom mohli porozumět časné embryogenesi savců je potřeba identifikovat geny, které zahajují svou expresi v různou dobu embryonálního vývoje. Právě tyto geny hrají důležitou roli v normálním preimplantačním vývoji. Jedním z těchto genů je i nukleofosmin, gen pro multifunkční protein, který zastává mimo jiné úlohu transportního proteinu mezi cytoplasmou a jadérkem. Podílí se na duplikaci centrosomů, vytváření ribosomů a také zastává funkci chaperonového proteinu. Jeho lokalizace závisí na fázi buněčného cyklu a vlastně odpovídá průběhu tvorby jadérka. Ke studování vlivu nukleofosminu na preimplantační vývoj skotu byla použita metoda RNA interference, kdy po injikaci dlouhé dvouřetězcové RNA (dsRNA) dojde k degradaci cílové mRNA. Průměrný pokles množství mRNA u embryí injikovaných nukleofosminovou dsRNA je 86,3 % v porovnání s kontrolními neinjikovanými embryi. Pomocí imunofluorescence však nebyl zjištěn žádný rozdíl v expresi ani lokalizaci nukleofosminu mezi jednotlivými skupinami. Embrya ze všech skupin byla schopna se vyvíjet až do stádia blastocysty, i když v tomto stádiu byl signifikantní rozdíl ve vývoji do blastocysty mezi neinjikovanou kontrolní skupinou a embryi s umlčenou mRNA pro nukleofosmin. Nenalezli jsme ani defekty polymerace tubulinu, které byly pozorovány u somatických buněk.
|
|
|
Functional analysis of invertebrate (Branchiostoma floridae) promoters in heterologous systems
Gurská, Daniela ; Kozmik, Zbyněk (vedoucí práce) ; Krylov, Vladimír (oponent)
Porozumenie mechanizmov transkripčnej regulácie a obmedzeniu, ktoré sa vyskytuje v sekvencii promotoru génu, je kľúčovým krokom k porozumeniu evolučnej konzervácie transkripčnej regulácie. Regulačné oblasti s rovnakým expresným výstupom nemusia vykazovať sekvenčnú podobnosť. Najdôležitejším prvkom v regulačnej oblasti sú totiž väzbové miesta pre transkripčné faktory, ktorých premiestnenie nemá obvykle vplyv na expresný výstup. Najjednoduchšia transkripčná regulácia je charakteristická pre prevádzkové (tzv. housekeeping) gény. Pre svoju expresiu vyžadujú len základné väzbové miesta v promotore (niekedy je postačujúca len prítomnosť CpG ostrovov) a všeobecné transkripčné faktory, a preto môžu byť prepisované jednoducho a okamžite vždy keď je potreba. V tejto práci sme sa zamerali na transkripčnú reguláciu prevádzkových génov bezstavovca kopijovca (Branchiostoma floridae) v stavovcoch. Pripravili sme sadu vektorov s regulačnými oblasťami kopijovca na testovanie ich aktivity v rôznych bunkových líniách cicavcov a sadu vektorov s rovnakými regulačnými oblasťami pre pozorovanie priestorového rozpoznania vo vyvíjajúcom sa embryu ryby medaky. Polovica z testovaných regulačných oblastí kopijovca bola rozpoznaná transkripčnou mašinériou bunky stavovca, no miera ich aktivity bola závislá na bunkovom type....
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Evoluce genovou duplikací z pohledu subfunkcionalizace.
Romášek, Marek ; Reifová, Radka (oponent) ; Krylov, Vladimír (vedoucí práce)
Evoluce genovou duplikací je předním tématem biologie už několik desetiletí. Nové metody a přístupy umožnily v poslední době významný pokrok v našem porozumění tomuto fenoménu. Cílem této práce je přehledně shrnout moderní pohledy na zachování duplikovaných genů v genomu organismů a procesy, které jej doprovázejí. Dalším záměrem je posoudit význam konceptu subfunkcionalizace, tedy rozlišení ancestrálních funkcí mezi dceřiné duplikáty, vedoucí k jejich zachování.
|
|
|
Vliv EGF- like peptidů na komplexy oocyt-kumulus
Blaha, Milan ; Krylov, Vladimír (oponent) ; Němcová, Lucie (vedoucí práce)
Ovariální cyklus je u savců řízen adenohypofyzálními hormony FSH a LH. Uvádí se, že FSH je důležitý pro růst folikulů, LH zodpovídá za jejich konečný růst, syntézu estrogenů, ovulaci, počáteční vývoj žlutého tělíska a krátce (do nástupu choriového gonadotropinu) za sekreci progesteronu. Ačkoliv kumulární buňky a oocyt exprimují jen velmi málo receptorů pro luteinizační hormon, LH způsobuje v podmínkách in vivo expanzi kumulu a znovuzahájení meiózy. Účinek LH je totiž zprostředkován peptidy podobnými epidermálnímu růstovému faktoru (EGF) - amfiregulinem (AREG), epiregulinem (EREG) a betacelulinem (BTC). Prekurzory těchto peptidů jsou exprimovány v buňkách stěnové granulózy, kde jsou v důsledku LH-stimulace uvolňovány vlastní EGF-like peptidy působením metaloproteáz. Následující práce je literárním přehledem, jehož cílem je představit úlohu EGF-like peptidů v širším kontextu molekulárních mechanismů řídících pozdní fáze folikulogeneze a meiotické zrání oocytů.
|
host ::
RSS.