|
|
HPLC separace p-aminofenolu, paracetamolu, kofeinu a propyfenazovu na polární stacionární fázi
Maroušková, Alena ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
V této práci byly nalezeny optimální chromatografické podmínky pro separaci p-aminofenolu, paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu pomocí metody HPLC. Jde o látky vzájemně se lišící lipofilitou a acidobazickými vlastnostmi. Použití klasických kolon s reverzní fází je pro jejich společné stanovení problematické. PEG kolona se ukázala jako vhodná pro efektivní separaci látek s odlišnou polaritou, tedy s různým chromatografickým chováním. Výhodou výsledné metody je především zkrácení doby analýzy, což hraje významnou roli zejména při analýzách velkých sérií vzorků. V rámci optimalizace chromatografických podmínek: byl vyzkoušen široký výběr mobilních fází (různá organická rozpouštědla, různý poměr zastoupení organické složky ke složce vodné) bylo testováno pH mobilní fáze v rozmezí 4 - 7 byly testovány různé pufry bylo vyzkoušeno chování látek na koloně při zvýšené teplotě byly testovány dvě PEG kolony s rozdílnými délkami Byly nalezeny optimální chromatografické podmínky, při kterých dojde k separaci výše uvedených látek a které současně vyhovují požadavkům na jednoduchost a časovou nenáročnost při zachování vysoké spolehlivosti metody. Konečné chromatografické podmínky: Stacionární fáze: Supelco Discovery HS PEG kolona (15 x 4 mm, 3 µm) Mobilní fáze: octanový pufr o pH 4,5 s obsahem 0,04%...
|
|
| |
|
|
Vývoj a optimalizace kroku úpravy vzorku pro rychlé chromatografické analýzy
Pilařová, Veronika ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Bednář, Petr (oponent) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát Mgr. Veronika Pilařová Školitel doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název disertační práce Vývoj a optimalizace kroku úpravy vzorku pro rychlé chromatografické analýzy Hlavním cílem dizertační práce je vývoj moderních extrakčních metod pro přečištění vzorků a pro izolování a zakoncentrování analytů z různého biologického materiálu, včetně biologických tekutin (plazma, sérum, poševní výplachy) a rostlinného materiálu. Moderní techniky pro přípravu vzorku přináší celou řadu výhod jako je snížení objemu vzorku a rozpouštědel, urychlení extrakce, či lepší přečištění vzorků, odstranění molekul matrice a snížení vlivu matricových efektů. Extrakty získáné moderními mikroextrakčními přístupy lze obvykle analyzovat separačními metodami jako jsou ultra-vysokoúčinná kapalinová chromatografie a superkritická fluidní chromatografie ve spojení s hmotnostní detekcí. Tyto separační metody umožňují rychlou analýzu s citlivou a selektivní detekcí a zvyšují také prostupnost vzorků laboratoří. Jednotlivé projekty ukazují možnost využití moderních trendů v oblasti úpravy vzorku, kde pro extrakci analytů byly využity metody mikroextrakce pomocí plněného tuhého sorbentu (MEPS), mikroextrakce na tuhou fázi pomocí plněných...
|
|
|
Testování a optimalizace on-line SPE HPLC podmínek pro stanovení mykotoxinu patulinu v jablečných nápojích
Holznerová, Anežka ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Solich, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Anežka Holznerová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Testování a optimalizace on-line SPE HPLC podmínek pro stanovení mykotoxinu patulinu v jablečných nápojích. K vývoji metody, kterou by bylo možno detekovat mykotoxin patulin v jablečných nápojích a džusech, bylo využito vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) ve spojení s on-line extrakcí na tuhou fázi (SPE) pomocí techniky přepínání kolon pro úpravu vzorku. Vzorek džusu o objemu 250 µl byl přímo dávkován do systému. Po nástřiku vzorku došlo k extrakci patulinu z matrice džusu na extrakční předkoloně. Kovová extrakční předkolona o rozměrech 25 x 3 mm, byla naplněna Supel MIP Patulin sorbentem, který je specifickým "molekulárně vtištěným polymerem" (MIP) určeným pro selektivní extrakci patulinu z jablečné matrice. Jako promývací fáze pro odstranění balastní matrice byl vybrán 1% roztok NaHCO3, který protékal MIP kolonkou rychlostí 2 ml/min po dobu 2,5 minuty. Po uplynutí této doby došlo k přepnutí ventilu a zbytkové látky matrice zachycené na extrakční předkoloně společně s patulinem byly dále separovány na analytické koloně Kinetex Biphenyl 150 x 4,6 mm (velikost částic 5µm). Mobilní fáze o složení 20 %...
|
|
| |
|
|
Quantum-Dots částice jako zesilovače při chemiluminiscenčním stanovení v SIA systému
Bártová, Zuzana ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Zuzana Bártová Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Quantum-Dots částice jako zesilovače při chemiluminiscenčním stanovení v SIA systému Quantum-Dots částice (QDs) byly testovány jako zesilovače chemiluminiscenčního (CL) signálu pomocí sekvenční injekční analýzy (SIA). K testování bylo využito CL reakce, při které byl luminol (5-aminoftalylhydrazid) v bazickém prostředí oxidován peroxidem vodíku, QDs vystupovaly jako zesilovač CL signálu. Při reakci byly vyzkoušeny následující koncentrace roztoků: peroxid vodíku v rozsahu 1.10-1 až 1.10-7 mol.l-1 , a to bez QDs a s QDs s emisními maximy 520, 575, 603 a 636 nm a ředěním 10 µl/10 ml (0,1% roztok), 200 µl/10 ml (2% roztok) a 200 µl/1 ml (20% roztok). CL signál byl detekován dvěma způsoby. Pro reakce s koncentrovanějším roztokem peroxidu vodíku (1.10-1 až 1.10-3 mol.l-1 ) byla použita CL cela navržená na Katedře analytické chemie FaF UK v HK - a jako detektor fotonásobič Hamamatsu (Japonsko), který umožňuje sledovat CL signál od začátku chemické reakce včetně jeho časového záznamu. Pro reakce se zředěnějším roztokem peroxidu vodíku (1.10-3 až 1.10-7 mol.l-1 ) fotonásobič fluorimetru Schoeffel (Německo) se spirální...
|
|
|
Využití moderních chromatografických přístupů a úprav vzorků v analýze biologicky aktivních látek
Brabcová, Ivana ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Karlíček, Rolf (oponent) ; Tolarová, Jitka (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Ivana Brabcová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název disertační práce: Využití moderních chromatografických přístupů a úprav vzorků v analýze biologicky aktivních látek Předkládaná disertační práce se zabývá moderními trendy v kapalinové chromatografii v analýze biologicky aktivních látek. Kapalinová chromatografie je významnou analytickou technikou, která umožňuje rychlou separaci a kvantifikaci látek. Trendy v kapalinové chromatografii se v současnosti týkají především vývoje nových stacionárních fází a zlepšení jejich stávajících vlastností. Dále se zabývají miniaturizací chromatografických systémů a tak zvanou "zelenou" chromatografií, která se snaží o přístup šetrnější k životnímu prostředí. Vlastní chromatografické analýze předchází příprava vzorku. Jedná se o významný krok, na kterém závisí správnost výsledku celé analýzy. V současné době dochází k vývoji mnoha nových moderních technik úpravy vzorků. Vývoj těchto technik směřuje především k miniaturizaci, automatizaci a mnohonásobnému zakoncentrování cílových analytů. Teoretická část disertační práce je rozdělena do několika okruhů, ve kterých se zabývá výše popsanými trendy. V první části jsou popsány trendy v oblasti...
|
|
|
Vývoj GC metody pro stanovení acetátu vitamínu E v potravních doplňcích
Kymlová, Helena ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Helena Kymlová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, PhD. Název rigorózní práce: Vývoj GC metody pro stanovení acetátu vitamínu E v potravních doplňcích Byla vyvinuta GC metoda pro stanovení obsahu vitamínu E acetátu v potravních doplňcích. Metoda byla optimalizována a validována. Pro analýzu byla použita kolona Capillary GC, Equity Columns, Equity TM - 5 poly (5 % bifenyl / 95 % dimethylpolysiloxan); 0,32 mm ID x 30 m; 1,0 mm dr. Jako nosný proud bylo použito helium. Dělicí poměr byl 1 : 100. K detekci byl použit plamenoionizační detektor. Optimální podmínky pro analýzu: teplota kolony 340 řC, teplota nástřiku 340 řC, teplota detektoru 320 řC, průtoková rychlost 2 ml/min. Jako vnitřní standard byl zvolen fenoxykarb. Metoda byla využita pro analýzu vitamínu E acetátu v potravních doplňcích Geladrink Forte práškový nápoj - ananas a Chondrotin MSM 2600. Stanovený obsah vitamínu E acetátu byl přepočítán na obsah vitamínu E, který deklaruje výrobce.
|
|
|
Hodnocení vybraných obsahových látek v ovoci metodou HPLC-DAD-CAD
Košková, Stanislava ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Stanislava Košková Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Konzultant: Ing. Radek Vávra, Ph.D. (VŠÚO Holovousy) Název diplomové práce: Hodnocení vybraných obsahových látek v ovoci metodou HPLC-DAD-CAD Tato diplomová práce byla zaměřena na stanovení obsahu sedmi fenolických látek, konkrétně kyseliny gallové, kyseliny chlorogenové, epikatechinu, rutinu, floridzinu, kvercetinu a floretinu v jablkách 20 odrůd, které byly dodány Výzkumným a šlechtitelským ústavem ovocnářským Holovousy s.r.o. K tomuto účelu byla použita HPLC separace v reverzním módu využívající kolonu Luna Omega Polar C18 (150 mm x 4,6 mm; 5 µm). Jako mobilní fáze byla použita směs ultra čisté vody okyselené kyselinou octovou na pH 2,8 a acetonitrilu. Byl zvolen lineární gradient s postupným zvyšováním podílu organické složky z počátečních 10 % na 50 % během 10 min separace. Následovala ekvilibrace kolony - do 12,50 min při 10 % organické složky. Celková délka separace byla 12,5 min při průtokové rychlosti 1 ml/min. Teplota kolonového prostoru byla nastavena na 30 řC. Detekce byla provedena pomocí DAD (254, 280, 320 nm) a CAD detektoru (teplota nebulizéru 25 řC). Součástí této práce je test způsobilosti chromatografického systému,...
|
|
| |
host ::
RSS.