Original title:
Anizotropní techniky ve studiu cytoplazmy
Translated title:
Anisotropy techniques in study of cytoplasm
Authors:
Sýkorová, Kateřina ; Obruča, Stanislav (referee) ; Mravec, Filip (advisor) Document type: Bachelor's theses
Year:
2016
Language:
cze Publisher:
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická Abstract:
[cze][eng]
Cílem této práce bylo provést srovnávací experimenty pomocí časově rozlišené anizotropie a ustálené anizotropie v bakteriích kmene Cupriavidus necator. Fluorescenční sondou pro skenování buněčného vzorku byl vybrán fluorescein, respektive jeho derivát BCECF_AM. Pomocí ověřovacího experimentu v systému glycerol/voda s přídavkem fluoresceinu, byla ověřena anizotropie a vypočítán molární hydrodynamický objem jedné molekuly fluoresceinu, který přibližně odpovídal jeho reálné hodnotě. Pomocí fluorescenční anizotropní mikroskopie byly získány obrázky bakterií s příslušnými středními hodnotami anizotropií. Skeny bakterií CN H16 a mutantů CN PHB-4, ukázaly patrné rozdíly mezi uniformitou vnitřního prostředí.
The main goal of this thesis was to compare experiments using time-resolved anisotropy and steady-state anisotropy for measuring in bacteria strain Cupriavidus necator. Fluorescent probe for anisotropy imaging was chosen BCECF_AM, which is derivate of fluorescein. Using experiment in system glycerol/water with fluorescein, anisotropy has been verified and calculated molecular hydrodynamic volume of a single fluorescein molecule, which approximately corresponded with real value. By using fluorescence imaging anisotropy microscopy, images and values of average anisotropy in cells were taken. Images of living cells (bacteria) of CN H16 and mutant CN PHB-4 showed differences, mainly in the uniformity of the inside environment.
Keywords:
Anisotropy fluorescence; fluorescein; fluorescence microscopy; fluorescence probe; steady-state anisotropy.; Anizotropie fluorescence; fluorescein; fluorescenční mikroskopie; fluorescenční sondy; steady-state anizotropie.
Institution: Brno University of Technology
(web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library. Original record: http://hdl.handle.net/11012/60365