Original title: Stanovení autenticity potravinářských výrobků s ovocnou složkou
Translated title: Analysis of autenthicity of food products with fruit component
Authors: Prachárová, Adriana ; Mikulíková, Renata (referee) ; Márová, Ivana (advisor)
Document type: Master’s theses
Year: 2021
Language: slo
Publisher: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract: [slo] [eng]
Cieľom predloženej diplomovej práce bolo stanovenie autenticity detských ovocných výživ pomocou molekulárnych a inštrumentálnych metód. V experimentálnej časti boli vykonané izolácie rastlinných DNA z listov ovocia (broskyne, marhule, slivky a jablka) a plod banánovníka. Izolácia bola vykonaná aj z piatich komerčných výrobkov, a z modelových zmesí, ktoré boli pripravené obsahovo identicky ku komerčným zmesiam. Izolovaná DNA bola charakterizovaná a overená qPCR s primermi ITS2 špecifickými pre rastlinnú DNA. Boli vybraté tri trojice párov primerov, u ktorých bola zhodnotená ich špecifickosť pre multiplex PCR. Táto metóda umožňuje diagnostikovať viac druhov ovocia v jednej reakcii, čím sa znižujú ekonomické aj časové nároky potrebné pre detekciu. Keďže pre marhuľu nebol dostatočne špecifický žiaden z vybratých párov primerov, ďalej sa pokračovalo len v dôkaze slivky a broskyne pomocou duplex PCR. Pre lepšie rozoznanie typu DNA bola použitá vysokorozlišovacia analýza kriviek topenia. Následne bola vykonaná elektroforéza na agarózovom géle, ktorá odhalila dĺžku fragmentov. Ďalej bola snaha identifikovať špecifické fenolové látky v komerčných a modelových pyré pomocou HPLC, ale keďže tieto látky sú pri nevhodných skladovacích podmienkach degradabilné, nepodarilo sa dokázať prítomnosť individuálnych látok touto metódou. The aim of this thesis was to determine the authenticity of fruit food for infants using molecular and instrumental methods. In the experimental part, plant DNA isolations from fruit leaves (peaches, apricots, plums and apples) and bananas were performed. Further, DNA was isolated also from five commercial products, and from model mixtures that were prepared in terms of content identical to the commercial mixtures. The isolated DNA was characterized and verified by qPCR with plant DNA-specific ITS2 primers. Three triple primer pairs were selected, and their specificity was evaluated when performing multiplex PCR. This method makes it possible to detect more types of fruit in one reaction, reducing the economic and time requirements for detection. As none of the selected primer pairs were sufficiently specific for the apricot, the evidence from the plum and peach was further realized using duplex PCR. High resolution melting curve analysis was used for better DNA type recognition. Subsequently, agarose gel electrophoresis was performed to analyse the fragment lengths. Furthermore, experiments have been made to identify some specific phenolic substances in commercial and model fruit mixtures by HPLC. Since phenolic substances are degradable under unsuitable storage conditions, the presence of individual compounds was not detected by this method.
Keywords: baby food; detection of food adulteration; DNA isolation; electrophoresis; food authenticity; multiplex PCR; qPCR; qPCR-HRM

Institution: Brno University of Technology (web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library.
Original record: http://hdl.handle.net/11012/201565

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-607712


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Brno University of Technology
Academic theses (ETDs) > Master’s theses