Název: Identifikace PHA produkujících bakterií pomocí nástrojů molekulární biologie
Překlad názvu: Identification of PHA producing bacteria employing molecular techniques
Autoři: Gajdová, Barbora ; Obručová,, Hana (oponent) ; Obruča, Stanislav (vedoucí práce)
Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok: 2017
Jazyk: cze
Nakladatel: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstrakt: [cze] [eng]
Tato diplomová práce se zabývá identifikací bakterií, které jsou schopny produkce polyhydroxyalkanoátů (PHA). Mezi testovanými bakteriemi byli převážně zástupci rodu Pseudomonas, Lactobacillus, Bifidobacterium, dále vzorky z termofilní kultury a vzorky z přírodních zdrojů. Bakterie byly testovány pomocí molekulárně biologické metody PCR. Byla analyzována amplifikace genu kódujícího PHA syntázu (phaC). V první reakci byl detekován jak phaC gen zodpovědný za syntézu PHA, tak současně i 16S rRNA, který slouží jako ověření bakteriální DNA a u neznámých vzorků z přírodních zdrojů sloužil také jako způsob identifikace konkrétního kmenu. Jednalo se o multiplexní PCR, která využívala více primerů ve směsi pro PCR. Druhou reakcí byl hledán amplikon, který je specifický pro syntázu, jež katalyzuje biosyntézu mcl-PHA (phaC1). Přítomnost genu pro tvorbu PHA syntázy byla prokázána u 11 vzorků a těmi byly Bifidobacterium breve CCM 7825T, Lactobacillus rhamnosus CCM 1825T, Lactobacillus zeae CCM 7069T, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCM 7190T, Lactobacillus plantarum CCM 7039T, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas fulva, Arthrobacter protophormiae, Curtobacterium flaccumfaciens, Mycobacterium neoaurum a Staphylococcus lentus. This diploma thesis deals with identification of bacteria which are capable of producing polyhydroxyalkanoates (PHAs). Work included testing variety of genera including Pseudomonas, Lactobacillus, Bifidobacterium, thermophilic cultures and samples gathered from natural sources. Bacteria were investigated by molecular technique polymerase chain reaction – PCR. An amplification of the PHA synthase gene (phaC) was analyzed. In the first reaction phaC and 16S rRNA genes were tested at the same time. 16S rRNA gene is used as control for bacterial DNA and as an identification tool for natural source samples. This multiplex PCR used multiple primers in PCR mix. Second reaction search for amplicon specific for catalysing biosynthesis mcl-PHA (phaC1). The presence of the PHA synthase gene was verified in 11 samples which were Bifidobacterium breve CCM 7825T, Lactobacillus rhamnosus CCM 1825T, Lactobacillus zeae CCM 7069T, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCM 7190T, Lactobacillus plantarum CCM 7039T, Pseudomonas gessardii, Pseudomonas fulva, Arthrobacter protophormiae, Curtobacterium flaccumfaciens, Mycobacterium neoaurum and Staphylococcus lentus.
Klíčová slova: bakteriální polyhydroxyalkanoáty; elektroforéza; PCR; PHA syntáza; bacterial polyhydroxyalcanoates; electrophoresis; PCR; PHA synthase

Instituce: Vysoké učení technické v Brně (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Plný text je dostupný v Digitální knihovně VUT.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/11012/65074

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-591096


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Vysoké učení technické v Brně
Vysokoškolské kvalifikační práce > Diplomové práce