Název: Rekombinantní exprese potkaního NK buněčného receptoru Clr-b v přítomnosti fluorovaných analogů monosacharidů
Překlad názvu: Recombinant expression of rat NK cell receptor Clr-b in the presence of fluorinated analogues of monosaccharides
Autoři: Urbanová, Zuzana ; Vaněk, Ondřej (vedoucí práce) ; Černá, Věra (oponent)
Typ dokumentu: Bakalářské práce
Rok: 2022
Jazyk: cze
Abstrakt: [cze] [eng]
NK buňky jsou buňkami nespecifické imunity, které kromě likvidace tělu vlastních poškozených buněk také produkují chemokiny a cytokiny, kterými zasahují i do imunity specifické, stojí tedy na pomezí obou těchto druhů imunity. NK buňky na svém povrchu exprimují aktivační a inhibiční receptory, jejichž rovnováha udržuje buňku v inaktivovaném stavu, narušení této rovnováhy spustí cytotoxické mechanismy buňky. Dvěma z potkaních inhibičních receptorů NK buněk jsou receptory NKR-P1B a NKR-P1D, jejichž ligandem je protein Clr-b, což je receptor z rodiny proteinů podobných lektinům typu C. Cílem práce bylo rekombinantně připravit tento protein v prostředí sedmi fluorovaných analogů monosacharidů jakožto potenciálních inhibitorů N-glykosylace proteinu. Protein byl úspěšně exprimován v buněčné linii HEK293T ve formě konstruktu obsahujícího kromě extracelulární části Clr-b také Fc fragment lidského IgG a histidinovou kotvu, a to několikrát, pokaždé v prostředí jednoho ze sedmi fluorovaných analogů monosacharidů. Vzhledem k tomu, že glykosylace proteinů má výrazný vliv na jejich funkčnost, se inhibice glykosylace se jeví jako vhodné terapeutické řešení mnoha nemocí včetně například roztroušené sklerózy či rakoviny. Cílem zde bylo posoudit vliv fluorovaných analogů monosacharidů na přirozenou N-glykosylaci... NK cells are part of innate immunity that, besides eliminating damaged cells, also produce chemokines and cytokines, which affect the cells of adaptive immunity. NK cells express activating and inhibitory receptors on their surface. The balance between them keeps the NK cells inactive. When the balance is disrupted, the cytotoxic mechanisms of the cell are activated. Receptors NKR-P1B and NKR-P1D are two rat NK cell inhibitory receptors whose ligand is protein Clr-b, a receptor belonging to the C-type lectin-like receptor family. This work aimed to recombinantly produce Clr-b in the presence of seven fluorinated analogues of monosaccharides as potential inhibitors of N-glycosylation. The protein was successfully expressed in the HEK293T cell line as a construct containing the extracellular part of Clr-b, the Fc fragment of human IgG, and a histidine tag multiple times, each time in the presence of one of the compounds. As glycosylation plays a major role in the functionality of many proteins, inhibition of glycosylation appears to be a promising way of treatment of different diseases such as cancer or multiple sclerosis. The aim here was to assess the effect of fluorinated analogues of monosaccharides on the native N-glycosylation of the HEK293T cell line using the Clr-b construct as a model...
Klíčová slova: buněčná linie HEK293T; fluorované analogy monosacharidů; inhibice glykosylace; N-glykosylace; NK buňky; protein Clr-b; rekombinantní exprese proteinů; fluorinated analogues of monosaccharides; HEK293T cell line; inhibition of glycosylation; N-glycosylation; NK cells; protein Clr-b; recombinant protein expression

Instituce: Fakulty UK (VŠKP) (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Dostupné v digitálním repozitáři UK.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/20.500.11956/177130

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-510544


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Univerzita Karlova > Fakulty UK (VŠKP)
Vysokoškolské kvalifikační práce > Bakalářské práce