Název: Charakterizace vlivu lidského mutovaného huntingtinu na diferenciaci nervových kmenových buněk.
Překlad názvu: Characterization of the effect of human mutated huntingtin on the neuronal stem cell differentiation.
Autoři: Budková, Kateřina ; Vodičková, Kateřina (vedoucí práce) ; Romanyuk, Natalyia (oponent)
Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok: 2022
Jazyk: cze
Abstrakt: [cze] [eng]
Huntingtonova choroba (HD) je autozomálně dominantní neurodegenerativní onemocnění způsobené expanzí repetice CAG kodonu v genu huntingtin (HTT). Tato expanze způsobuje změnu biochemických vlastností proteinu huntingtinu (HTT), jeho agregaci a buněčnou toxicitu, což vede k degeneraci neuronů mozku zejména v oblasti striata. Jako modelový systém pro in vitro modelování tohoto onemocnění mohou sloužit indukované pluripotentní buňky odvozené přímo z buněk pacientů s HD. Jelikož k neuronálním dysfunkcím dochází u pacientů s HD již roky před manifestací prvních klinických příznaků, může tento modelový systém pomoci objasnit mechanismy, které předcházejí nástupu onemocnění. Cílem této diplomové práce bylo diferencovat iPSC (odvozené z fibroblastů HD pacientů a zdravých kontrol) do nervových kmenových buněk (NSC) a následně do populací neuronálních buněk a sledovat molekulární změny v jejich diferenciaci spojené s vlivem mutovaného HTT. Proces diferenciace byl sledován na základě vybraných markerů pomocí imunofluorescence, metody western blot a qRT-PCR. Podařilo se nám vytvořit stabilní linie NSC odvozených ze 3 kontrolních a 3 HD iPSC linií. Všech 6 linií NSC bylo schopno dále diferencovat do neuronálních populací. Na transkripční úrovni jsme nalezli vyšší expresi genu ADAM10 v HD NSC liniích a vyšší... Huntington's disease (HD) is an autosomal dominant neurodegenerative disorder caused by an expansion of the CAG codon repeat in the huntingtin gene (HTT). This expansion causes a change in the biochemical properties of the huntingtin protein (HTT), its aggregation and cellular toxicity, which leads to the degeneration of brain neurons, especially in the striatum. Induced pluripotent cells (iPSC) derived directly from HD patient cells can serve as a model system for in vitro modeling of this disease. Because neuronal dysfunctions occur in HD patients years before the first clinical symptoms manifest, this model system may help elucidate the mechanisms that precede the onset of the disease. The aim of this thesis was to differentiate iPSCs (derived from fibroblasts of HD patients and healthy controls) into neural stem cells (NSCs) and subsequently into neuronal cell populations and to monitor molecular changes in their differentiation associated with the effect of mutated HTT. The differentiation process was monitored based on selected markers using immunofluorescence, western blot and qRT-PCR. We were able to generate stable NSC lines derived from 3 control and 3 HD iPSC lines. All 6 NSC lines were able to further differentiate into neural populations. At the transcriptional level, we found a higher...
Klíčová slova: diferenciace; huntingtin; Huntingtonova choroba; indukované pluripotentní buňky; nervové kmenové buňky; differentiation; huntingtin; Huntington disease; induced pluripotent stem cells; neural stem cells

Instituce: Fakulty UK (VŠKP) (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Dostupné v digitálním repozitáři UK.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/20.500.11956/176457

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-509424


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Univerzita Karlova > Fakulty UK (VŠKP)
Vysokoškolské kvalifikační práce > Diplomové práce