Název:
Charakterizace perinukleárních aktinových vláken a jejich funkce v buněčné migraci
Překlad názvu:
Characterization of perinuclear actin fibers and their role in cell migration
Autoři:
Hlaváčková, Tereza ; Vomastek, Tomáš (vedoucí práce) ; Binarová, Pavla (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2022
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Fyziologické a patologické jevy jako je hojení ran, embryonální vývoj, imunitní odpověď nebo rozsev nádorových buněk primárního nádoru, úzce souvisí s buněčnou migrací. Tento děj je spojený s procesy polarizace buňky, translokace jádra a přestavby buněčného cytoskeletu. Významnou roli zde hraje aktinový cytoskelet. Součástí aktinového cytoskeletu, zatím s málo prozkoumanou funkcí, jsou perinukleární aktinová vlákna tvořící nad jádrem strukturu aktinové čepičky. Vlákna jsou nad jádrem asociována s LINC komplexem a přichycena na obou koncích fokálními adhezemi, čímž tvoří nad jádrem kopulovitou strukturu. Předpokládá se, že tato vlákna mohou generovat síly regulující pohyb jádra při buněčné migraci. Cílem práce bylo objasnění mechanizmu, který se podílí na přichycení perinukleárních aktinových k LINC komplexu a jádru a reguluje tak vznik perinukleární aktinové čepičky. Dalším cílem bylo zavedení metody pro kvantifikaci perinukleárních aktinových vláken pomocí nově vyvinutého digitálního nástroje. Pro experimenty byly využité potkaní fibroblasty, protože obsahují dobře vyvinutá perinukleární vlákna. Inaktivací genů pro specifické proteiny nespriny, které jsou součástí LINC komplexu, jsme chtěli lépe porozumět buněčné migraci s absencí perinukleární aktinové čepičky. Nicméně se ukázalo, že inaktivace...Cell migration is crucial for such physiological and pathological processes as wound healing, emryonal development, immune response, and methastasizing of the cancer cells. It is tightly coupled with cell polarization, nuclear traslocation, and turnover of actin cytoskeleton. Substantial, but so far poorely explored, part of actin cytoskeleton is perinuclear actin cap - dome-like structure above the nucleus costructed from perinuclear actin fibers. At the apical side of the nucleus perinuclear actin fibers are associated with LINC complex through nesprin proteins; at the edges of the cell they are anchored to focal adhesions. In the literature there were assumptions that this type of actin fibers can generate traction forces for nuclear reorientation during cell migration. The aim of this thesis is to elucidate the mechanism involved in the attachment of perinuclear actin to the LINC complex and the nucleus, thereby regulating the formation of the perinuclear actin cap. In addition, we aimed to establish a semi- automatic tool for perinuclear actin fibers quantification. Rat2 fibroblasts were used as the model cell line because they contain well-developed perinuclear actin cap. We focused on the inactivation of LINC complex components, namely Giant nesprin proteins (nesprin 1 and nesprin 2) and...
Klíčová slova:
aktin; fokální adheze; invazivita; LINC; metastázy; migrace; polarizace; stresová vlákna; actin; focal adhesions; invasion; LINC; metastasis; migration; polarization; stress fibers