Original title: Role železa ve virulenci Acanthamoeba castellanii
Translated title: The role of iron in the virulence of Acanthamoeba castellanii
Authors: Šimáčková, Aneta ; Šuťák, Róbert (advisor) ; Krijt, Matyáš (referee)
Document type: Master’s theses
Year: 2022
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Železo je nezbytná živina pro všechny živé organismy. Má zásadní úlohu ve virulenci patogenních bakterií i parazitických eukaryot. I když je železo hojným prvkem v organismu hostitele, není pro parazita snadné ho získat. Schopnost parazitů vyvolat onemocnění závisí z velké části na tom, jak účinné mechanismy pro zisk železa vyvinuli. Tato práce se zabývá vlivem železa na virulenci Acanthamoeba castellanii. Je to volně žijící améba, která za výjimečných situací může u člověka vyvolat smrtelné zánětlivé onemocnění mozku nebo člověku poškodit zrak. Kultivací se savčími buňkami se nám povedlo prokázat vliv železa na virulenci améby za využití průtokové cytometrie. Na základě fluorescenčního značení jsme lokalizovali protein AC_IDIP (Iron-Deprivation Induced Protein) v cytosolu. Tento protein byl také izolován a byla proti němu vytvořena polyklonální protilátka, která byla použita ke sledování vlivu dostupnosti železa na hladinu AC_IDIP. Pomocí komparativní proteomické analýzy jsme byli schopni sledovat změny v proteomu A. castellanii v závislosti na zdroji živin. Identifikovali jsme velké množství proteinů, jež měly změněnou hladinu za podmínky, kde zdrojem živin byly savčí buňky. Jednalo se zejména o cytoskeletální proteiny. Oproti tomu zastoupení proteinů obsahujících železo, nebo se na jeho... Iron is an essential nutrient for all living organisms. It plays a crucial role in the virulence of pathogenic bacteria as well as parasitic eukaryotes. Although iron is an abundant element in the host organism, it cannot be easily obtained by the parasite. The ability of parasites to induce disease depends largely on how efficient the mechanisms for iron acquisition have evolved. This thesis deals with the effect of iron on the virulence of Acanthamoeba castellanii. It is a free-living amoeba that, in exceptional situations, can cause fatal inflammatory brain disease or damage a person's vision. Culturing with mammalian cells allowed us to demonstrate the effect of iron on amoeba virulence using flow cytometry. Based on fluorescent labeling, we localized the protein AC_IDIP (Iron-Deprivation Induced Protein) in the cytosol. This protein was also isolated and a polyclonal antibody was raised against it and used to monitor the effect of iron availability on the AC_IDIP level. Using comparative proteomic analysis, it was possible to monitor changes in the A. castellanii proteome depending on the nutrient source. Altered levels of many proteins were detected under conditions where mammalian cells were the nutrient source. These were mainly cytoskeletal proteins. In contrast, the proportion of proteins...

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/173014

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-505948


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Master’s theses