Název:
Vliv kancerogenního azobarviva Sudanu I na expresi biotransformačních enzymů
Překlad názvu:
The effect of cancerogenic azo dye Sudan I on expression of biotransformation enzymes
Autoři:
Hejduková, Žaneta ; Svášková, Dagmar (vedoucí práce) ; Dračínská, Helena (oponent) Typ dokumentu: Bakalářské práce
Rok:
2010
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Sudan I je poměrně hojně používaným azobarvivem, které má schopnost vyvolat tvorbu nádorů v orgánech a tkáních experimentálních zvířat. V průběhu reakcí katalyzovaných mikrosomálními monooxygenasovými enzymovými systémy nebo cytoplazmatickými derivatizačními enzymy je Sudan I oxidován na reaktivní metabolity, které se kovalentně vážou na nukleové kyseliny a způsobují jejich poškození. Sudan I může být metabolizován i redukční cestou, např. enzymem DT-diaforasou (NQO1). Redukce Sudanu I jsou považovány za reakce detoxikační. Působení Sudanu I in vivo je v této práci zkoumáno z hlediska schopnosti indukovat expresi biotransformačního enzymu DT-diaforasy ve tkáních potkanů premedikovaných daným azobarvivem. Cílem práce bylo konkrétně kvantifikovat míru indukce na úrovni mRNA. Po provedení izolace celkové RNA z orgánů potkanů premedikovaných Sudanem I byla RNA převedena na cDNA pomocí reverzní transkripce s využitím náhodných hexamerů jako primerů. Metodou "real-time" PCR s použitím specifických sond bylo kvantifikováno zastoupení mRNA pro enzym NQO1 v orgánech premedikovaných potkanů, relativně vůči kontrolnímu genu s konstantní expresí (β-aktin). Porovnáním takto stanovených množství mRNA v jednotlivých orgánech pro premedikované a nepremedikované potkany bylo zjištěno, že Sudan I vyvolal...Sudan I is a widely used azo dye which has the ability to cause carcinomas in organs and tissues of experimental animals. During reactions catalyzed by microsomal monooxygenase enzyme systems or cytoplasmic biotransformation enzymes, Sudan I is oxidized to reactive metabolites that covalently bind to nucleic acids and cause their damage. Sudan I can also be metabolized by reduction, e. g. by a DT-diaphorase enzyme (NQO1). Reduction of Sudan I is considered to be a detoxification reaction. In this work, the in vivo action of Sudan I is examined in terms of its ability to induce an expression of the biotransformation enzyme DT-diaphorase in tissues of rats treated with the azo dye. The aim of this work was to quantify the degree of NQO1 induction at mRNA level. After the isolation of total RNA from organs of rats treated with Sudan I, the RNA was converted to cDNA by reverse transcription using random hexamers as primers. Using specific probes, the abundance of mRNA for the enzyme NQO1 in the organs of treated rats was quantified by "real-time" PCR, relatively to the control gene with a constant expression (β-actin). Through comparing thus determined amounts of mRNA in individual organs of treated and untreated rats, it has been found that Sudan I had caused a significant increase in the expression...
Klíčová slova:
Ah receptor; DT-diaforasa; exprese genu; mRNA; NQO1; Sudan I; Ah receptor; DT-diaphorase; gene expression; mRNA; NQO1; SudanI