Home > Academic theses (ETDs) > Doctoral theses > Biologické chování a vybrané molekulární charakteristiky epiteliálních buněk propagovaných in vitro z normální a nádorové tkáně mléčné žlázy žen
Original title:
Biologické chování a vybrané molekulární charakteristiky epiteliálních buněk propagovaných in vitro z normální a nádorové tkáně mléčné žlázy žen
Translated title:
název v anglickém jazyce není uveden
Authors:
Krásná, Luboslava ; Veselý, Pavel (advisor) ; Křepela, Evžen (referee) ; Červinka, Miroslav (referee) Document type: Doctoral theses
Year:
2006
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Byla vyvinuta kultivační metoda, která dovoluje pravidelně z normální i nádorové tkáně mléčné žlázy žen získávat a in vitro propagovat heterogenní populace epiteliálních buněk. Metoda využívá feeder-layer tvořený ozářenými 3T3 buňkami, který umožňuje klonální růst i jednotlivých izolovaných epiteliálních buněk. Dosahuje proto vysokého procenta úspěšnosti při zakládání kultur ze vzorků všech velikostí, včetně vzorku získaného perkutánní biopsií tenkou jehlou, jehož objem je 0.01 cm3. Kultivované buňky mají vysokou proliferační kapacitu. Profilem exprimovaných cytokeratinů i expresí EMA a ESA proteinů potvrzují příslušnost к luminální a myoepiteliální frakci epiteliálních buněk mléčné žlázy. V kulturách dochází к diferenciaci buněk, která se projevuje změnou jejich morfologie, změnou exprese proteinů a organizací buněk do třírozměrných struktur. Karcinomy mléčné žlázy jsou tvořeny téměř výhradně buňkami fenotypově shodnými s diferencovanými luminálními buňkami, vyznačujícími se především silnou expresí K19. Popsaný kultivační systém jako první umožnil proliferaci luminálních buněk z normální i nádorové mamární tkáně ve více pasážích in vitro, a to i v přítomnosti myoepiteliálních buněk. Bylo zjištěno, že kultivačními podmínkami lze ovlivnit rovnováhu mezi luminálními a myoepiteliálními buňkami, dočasně...An in vitro cultivation technique has been developed that allows to reproducibly obtain and propagate a heterogenous population of epithelial cells from samples of normal mammary glands, breast tumours and subcutaneous metastases of breast cancer. The epithelial origin of cultured cells was proved by their cytokeratin profile, and EMA and ESA protein expression. The technique uses a feeder layer of irradiated NIH 3T3 cells to support clonal growth of even single isolated cells. Cultures were successfully established from 96% of surgical tumour biopsy specimens (69 out of 72, volume of sample about 1 cm3) and 67% of true-cut biopsy specimens (28 out of 42, volume 0.01 cm3). Two and more in vitro passages were obtained with 74% (53 out of 72) of surgical specimens and 31% (13 out of 42) of truecut biopsy specimens. This is the first report of successful in vitro propagation of cells obtained from breast cancer via true-cut biopsy. In cell populations analyzed for the growth properties, the culture lifetime, related to the number of colony-forming cells, varied for cells from benign tumours between 22 and 40 cell populations and for malignant tumours between 21 and 51. The population doubling time varied betwen 18 and 62 hours for benign cultures and 10 and 127 hours for malignant cultures, with average 32...
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/3305