Název:
Izolace vakuol ze suspenzních kultur Scutellaria baicalensis Georgii
Překlad názvu:
Isolation of vacuoles from Scutellaria baicalensis Georgii suspension cultures
Autoři:
Ševčíková, Šárka ; Martin, Jan (vedoucí práce) ; Dušek, Jaroslav (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2008
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Šárka Ševčíková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Heyrovského 1203, 500 05 Hradec Králové Izolace vakuol ze suspenzních kultur Scutellaria baicalensis GEORGII Diplomová práce Vedoucí práce: Pharm.Dr. Jan Martin, Ph.D. Počet stran: 52 Cílem práce bylo vyvinout metodiku izolace vakuol ze suspenzních kultur šišáku bajkalského - Scutellaria baicalensis Geoorgii z čeledi Lamiaceae. Výchozí metodou byl interní postup pracoviště Leiden University, Division of Pharmacognosy z Holandska. Metoda se ukázala jako nevyhovující. Po seznámení s publikacemi pojednávajícími o metodách izolace vakuol z různých rostlinných druhů a po řadě provedených experimentů, se nám podařilo vyvinout vlastní metodu izolace vakuol využívající ficollový gradient. V literatuře uvedené metody izolace vakuol se navzájem lišily v údajích týkajících se lyzačních enzymů, doby inkubace, složení lyzačního roztoku a také hustotního gradientu. Jednotlivé kroky se nám podařilo optimalizovat a vakuoly izolovat. Výsledná metoda umožňuje izolovat vakuoly v poměrně krátkém čase a v dostatečné kvalitě pro další experimenty. Klíčová slova: šišák, Scutellaria, vakuoly, flavonoidy, ficoll, gradient, izolace vakuol10. ABSTRACT Šárka Ševčíková Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové, Heyrovského 1203, 500 05 Hradec Králové Isolation of vacuoles from Scutellaria baicalensis Georgii suspension cultures Diploma thesis Supervisor: Pharm.Dr. Jan Martin, Ph.D. Page Count: 52 The goal of the thesis was to develop methodology for isolation of vacuoles from suspension cultures of Scutellaria baicalensis Georgii of the Lamiaceae family. The original concept was based on a method used at the Division of Pharmacognosy, Leiden University, Holland. This method proved unsuitable. After getting acquainted with available papers concerning methods of isolation of vacuoles from miscellaneous plant species and after performing a series of experiments, we have managed to introduce such method of our own which utilizes Ficoll gradient. Preexisting methods of isolation of vacuoles varied in data on lytic enzymes, incubation time, lytic solution composition and density gradient, too. We managed to optimize the individual steps, which led to successful isolation of vacuoles. The resulting method makes it possible to isolate vacuoles in a relatively short time and in sufficient quality for further experiments. Keywords: Baikal Skullcap, Scutellaria, vacuoles, flavonoids, ficoll, gradient, isolation of vacuoles