Název:
Myozin I a aktin vazebné proteíny v jadře
Překlad názvu:
Myosin I and actin binding proteins in cell
Autoři:
Krásna, Hana ; Hozák, Pavel (vedoucí práce) ; Motlík, Jan (oponent) ; Pěknicová, Jana (oponent) Typ dokumentu: Disertační práce
Rok:
2013
Jazyk:
slo
Abstrakt: [eng][cze] Many studies have established the presence and essenciality of actin in the nucleus. Recently, actin has been associated with processes in the nucleus ranging from chromatin remodeling to transcription, splicing or nuclear transport. To ensure the dynamics of the nuclear processes, actin is coupled with one of the main motor protein such as myosin. This study demonstrates a structural role of actin and the nuclear myosin I (NMI) take in the transcription of ribonuclear genes by RNA polymerase I (Pol l). We suppressed the transcription Pol I in vitro by microinjections of antibodies anti actin and anti MNI. The series of in vitro experiments confirm transcript Pol I inhibition after applying antibodies anti actin and MNI on pure DNA as well as on pre-assembled chromatine template. The co-immunoprecipitation experiments reveal direct bound between actin, NMI and rRNA genes and transcription complex Pol I. As actin binds to the primer and elonged Pol I molecule, NMI interacts with subunit of Pol I and is capable of assembling into productive initiation complex by binding up to TIF-IA, transcriptional factor responsible for regulation rRNA synthesis. There are known number of hypothesis on the form of nuclear actin. Recent research suggests actin exists in equilibrium between its monomeric and...Existuje množství prací, které dokazují přítomnost a důležitost aktinu v jádře. Aktin se v buněčném jádře pojí s procesy od chromatinového remodelingu přes transkripci, splicing, až po jaderný transport. Pro zabezpečení dynamiky jaderných procesů se aktin spojuje s jedním ze základních motor proteinů, kterým je myozin. Poukazuji na úlohu aktinu a jaderného myozinu I (NMI) v transkripci ribozomálních genů pomocí RNA polymerázy I (Pol I). Mikroinjekcí protilátek proti aktinu a NMI jsme potlačili transkripci Pol I in vivo. Skupina in vitro pokusů potvrzuje inhibici transkripce Pol I po použití protilátek proti aktinu a NMI na čisté DNA i upraveném chromatinovém templátu. Koimunoprecipitační pokusy odhalují fyzické spojení aktinu a NMI s rRNA geny a s transkripčním komplexem Pol I. Zatím co se aktin váže na iniciační a elongační Pol I molekulu, NMI interaguje se subpopulací Pol I zodpovědnou za iniciaci vázanou na TIF-IA, tedy bazální transkripční faktor zodpovědný za regulaci rRNA syntézy. V současnosti je známých několik hypotéz o formě jaderného aktinu. Nedávné výzkumy poukazují na pravděpodobnou dynamickou rovnováhu mezi monomerní a polymerní formou. V této práci prezentuji ultrastrukturální rozložení šesti aktin vazebných proteinů (-aktinin, filamin, spektrin, paxilin, p190RhoGAP a tropomyozin)...