Název:
Vývoj a optimalizace přípravy řezových preparátů pulců X. tropicalis pro studium migračního a diferenciačního potenciálu testikulárních kmenových buněk
Překlad názvu:
Development and optimalization of sectioning technique for the study of migration and differentiation potential of testicular stem cells in X. tropicalis tadpoles
Autoři:
Bláhová, Monika ; Krylov, Vladimír (vedoucí práce) ; Pšenička, Martin (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2019
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Mesenchymální kmenové buňky (MSC) díky svým vlastnostem diferencovat v jiné buněčné typy a migrovat do místa poranění našly široké využití v regenerativní medicíně. Jejich snadná dostupnost spolu se schopností modulovat imunitní systém je předurčuje k léčbě autoimunitních onemocnění nebo obnově poraněných tkání. Stejně jako MSC i Sertoliho buňky (SeC) nacházející se ve varleti mají velmi podobné vlastnosti. V laboratoři školitele byla založena buněčná kultura testikulárních kmenových buněk z varlat juvenilních samců drápatky tropické (Xenopus tropicalis) (XtTSC). Kvůli jejich vizualizaci in vivo byla tato kultura buněk vykazující vlastnosti MSC a SeC transformována plasmidovým vektorem kódujícím červený fluorescenční protein RFP. Cílem této diplomové práce bylo zkoumat chování transformovaných XtTSC v živém organismu. Z tohoto důvodu byly buňky transplantovány do pulců X. tropicalis ve stádiu 41. Následně byl vyhodnocen jejich migrační potenciál. Aby bylo možné studovat také diferenciační potenciál těchto buněk, bylo nezbytné zavést spolehlivou techniku přípravy řezových preparátů. Na základě provedených experimentů se podařilo zjistit, že buněčná kultura XtTSC obsahuje prekurzory SeC a peritubulárních myoidních buněk, avšak in vivo buňky zřejmě přechází do dediferencovaného stavu podobného MSC,...Thanks to their ability to differentiate into variable cell types and migrate to the site of an injury mesenchymal stem cells (MSC) are broadly used in regenerative medicine. Their relative easy availability together with the property to control the immune system determines them as a cure of autoimmune diseases or a recovery of wounded tissues. Similar features posses Sertoli cells which take place in the seminiferous tubule of testis. Cell culture of testicular stem cells from juvenile male testes of X. tropicalis (XtTSC) was established in supervisor's laboratory. This cell culture showing both MSC's and SeC's properties was transformed to carry red fluorescent protein RFP. The aim of this diploma thesis was to investigate an behavior of transformed XtTSC in living organism, therefore cells were transplanted into the X. tropicalis tadpoles in stage 41. Subsequently, their migration potential was explored. To study of XtTSC's differentiation potential it was necessary to introduce a reliable sectioning techniques for the subsequent immunohistochemical analysis. Based on our experiments, we found that the XtTSC's cell culture contains precursors of SeC and peri-tubular myoid cells, however in vivo these cells turned into the dedifferentiated MSC-like state allowing a strong migration through the...
Klíčová slova:
diferenciace; testikulární kmenové buňky; Xenopus tropicalis; differentiation; testicular stem cells; Xenopus tropicalis