Original title: Endokrinní disruptory a jejich vliv na expresi cytochromu P450 1A2
Translated title: The influence of endocrine disruptors on the expression of cytochrome P450 1A2
Authors: Orlovská, Ľubica ; Dračínská, Helena (advisor) ; Ječmen, Tomáš (referee)
Document type: Bachelor's theses
Year: 2017
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Termín "endokrinní disruptor" se používá pro sloučeniny, které napodobují nebo antagonizují účinky endogenních hormonů, mění syntézu a metabolismus přirozených hormonů nebo modifikují hladiny hormonálních receptorů. Syntetický estrogen 17α- ethinylestradiol (EE2) a karcinogenní látka znečišťující životní prostředí, benzo[a]pyren (BaP), patří do skupiny chemikálií, které jsou označeny jako exogenní sloučeniny s endokrinní destrukcí, zatímco estrogenový hormon 17β-estradiol (EST) je přírodní endogenní endokrinní disruptor. V bakalářské práci byl studován vliv těchto endokrinních disruptorů a jejich kombinací na expresi a specifickou aktivitu CYP1A2. V rámci této práce byla izolována RNA z plic potkanů nepremedikovaných a premedikovaných uvedenými endokrinními disruptory. Metodou reverzní transkripce byla RNA převedena na cDNA. Relativní zastoupení CYP1A2 bylo kvantifikováno metodou kvantitativní PCR v játrech, ledvinách a plicích. Ve vzorcích mikrosomální frakce jater byla stanovena míra exprese CYP1A2 metodou Western blot s následnou imunodetekcí. Nakonec byla v játrech stanovena specifická aktivita CYP1A2 měřením O-demethylace 7-methoxyresorufinu. Bylo potvrzeno, že BaP indukuje genovou expresi CYP1A2 v játrech, ledvinách a plicích, a to i v kombinaci s EE2 a EST. Oba estrogeny nicméně snižují... The term endocrine disruptor is used for chemical compounds which imitate or antagonize the effects of endogenic hormones, alter hormone synthesis and metabolism or modify levels of hormonal receptors. Synthetic estrogen 17α-ethinylestradiol (EE2) and carcinogenic substance benzo[a]pyrene (BaP) belong to the group of chemicals described as exogenic compounds with endocrine destruction, while estrogenic hormone 17β- estradiol (EST) figures as natural endogenic endocrine disruptor. The bachelor thesis focuses on study of the influence of these endocrine disruptors and their combinations on expression and specific activity of CYP1A2. RNA was isolated from the lungs of rats treated with the endocrine disruptors and from untreated rats. RNA was converted to cDNA by reverse transcription. Relative amount of CYP1A2 in livers, kidneys and lungs was quantified by real-time PCR. The protein expression of CYP1A2 was studied using the Western blot with consecutive immunodetection. Finally, the specific activity of hepatic CYP1A2 was determined by measuring 7-methoxyresorufin O- demethylation. It was confirmed that BaP induces gene expression of CYP1A2 in livers, kidneys and lungs, even in combination with EE2 and EST. However, both estrogens decrease the induction potential of BaP. When given individually,...
Keywords: 17α-ethinylestradiol; 17β-estradiol; benzo[a]pyrene; CYP1A2; endocrine disruptors; expression; specific activity; 17α-ethinylestradiol; 17β-estradiol; benzo[a]pyren; CYP1A2; endokrinní disruptory; exprese; specifická aktivita

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/90332

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-364929


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Bachelor's theses