Original title:
In vitro characterization of the spinal cord progenitor cells
Translated title:
Charakterizace míšních progenitorových buněk in vitro
Authors:
Vitásková, Martina ; Klíma, Jiří ; Vodička, Petr ; Motlík, Jan Document type: Papers Conference/Event: Morphology 2006, 43. Mezinár. anatomický kongres a Histochemické symposium, Praha (CZ), 2006-09-03 / 2006-09-06
Year:
2006
Language:
eng Abstract:
[eng][cze] We performed in vitro studies with the spinal cord of mice and miniature pig. Employing papain dissociation system we isolated neural progenitor cells and cultured them in DMEM/F12 HEPES, Ala-Glu, gentamicin, heparin, B27 supplement without vitamin A, N2 supplement, EGF (Epidermal Growth Factor) and bFGF (Basic Fibroblast Growth Factor). We added retinoic acid and 10% fetal bovine serum into cultivation media to induce cell differentiation. Using immunocytochemistry we confirmed cell capability to differentiate into neurons (βIII-tubulin, Map 2A - Microtubule Associated Protein), astroglia (GFAP – Glial Fibrillary Acidic Protein), and oligodendroglia (CNPase - 2',3'-cyclic nucleotide 3'-phosphodiesterase). Cells can keep non-differentiated status for a longer period of time when cultured in low adhesion culturing flask or by addition of LIF (Leukemia Inhibitory Factor) to the cultivation media.Nervové progenitorové buňky jsme izolovali z míšní tkáně myši respektive miniaturního prasete za pomoci disociačního systému s papainem. Buňky jsme kultivovali v mediu s DMEM/F12 HEPES, Ala-Glu, gentamicinem, heparinem, suplementem B27 bez vitaminu A, N2 suplementem, EGF (epidermální růstový faktor) a bFGF (základní růstový faktor fibroblastů). K navození diferenciace jsme do kultivačního media přidávali kyselinu retinovou a 10% fetální sérum. Imunocytochemicky jsme potvrdili schopnost buněk diferencovat se v neurony (βIII-tubulin, Map 2A – protein asociovaný s mikrotubuly), astroglii (GFAP – kyselý fibrilární protein glie) a oligodendroglii (CNPase - 2',3'-cyklická nucleotid 3'-fosfodiesteráza). Buňky si ponechávají svůj nediferencovaný stav po delší dobu, pokud jsou kultivovány v kultivačních lahvích s nízkou adhezivitou a nebo přidáním LIF (faktor inhibující leukemii) do kultivačního media.
Keywords:
spinal cord Project no.: CEZ:AV0Z50450515 (CEP), 1M0538 (CEP) Funding provider: GA MŠk Host item entry: Morphology 2006
Institution: Institute of Animal Physiology and Genetics AS ČR
(web)
Document availability information: Fulltext is available at the institute of the Academy of Sciences. Original record: http://hdl.handle.net/11104/0138984