Název:
Studium faktorů ovlivňujících účinnost transformace konopí setého (Cannabis sativa L.)
Překlad názvu:
Study of factors influencing efficiency of Canabis sativa transformation
Autoři:
Širl, Marek ; Ovesná, Jaroslava (vedoucí práce) ; Vondráková, Zuzana (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2014
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Konopí seté (Cannabis sativa L.) je všestranně využitelná rostlina, která poskytuje vlákno, celulózu, pazdeří pro průmyslové zpracování, semena pro přípravu olejů, biomasu pro přeměnu na energeticky využitelné suroviny a produkuje sekundární metabolity využitelné ve farmaceutickém průmyslu. Pro celkovou odolnost vůči stresům, schopnost akumulace těžkých kovů a nízké nároky na kultivaci je potencionálně využitelná pro fytoextrakce. Současný výzkum směřuje k zpracování účinného kultivačního protokolu, který by umožňoval transformaci kalusových kultur následovanou regenerací celistvé rostliny. V této práci bylo několik odrůd konopí setého převedeno do in vitro a byla testována jejich schopnost tvořit kalus. Nejlepších výsledků bylo dosaženo použitím hypokotylových segmentů na živném médiu obohaceném o 1 mg/L kyseliny naftyloctové a jednoho ze dvou syntetických cytokininů 0,5 mg/L thidiazuronu nebo 5 mg/L 6-benzylaminopurinu. Žádný průkazný rozdíl v použití těchto dvou cytokininů nebyl pozorován. Žádný z explantátů na čtyřech různých testovaných médií pro regeneraci prýtů se nepodařilo úspěšně zregenerovat. Transformace konopí byla testována pomocí dvou metod. Podařilo se izolovat transformované protoplasty z listů konopí po agroinfiltraci, tato metoda však pro konopí nemá příliš využití. U explantátů...Hemp (Cannabis sativa L.) is a multi-use crop, able to provide fibre celulose a hurds for industrial treatment seeds for oil preparation biomass for energy conversion and produces secondary metabolites useful for pharmaceutical application. For its resistence to stress ability to accumulate high concentration of heavy metals and low cultivations demands, it can also be used for phytoextractions. Current research is focused on establishment of cultivation protocol, which allows transformation of callus cultures, and their regeneration with high efficiency. In this thesis, several varieties of hemp were transferred to in vitro conditions and were tested for their ability to form callus. The best results were achieved using the hypocotyl segments in a nutrient medium supplemented with 1 mg/L of naphtylacetic acid and one of these two synthetic cytokinins 0,5 mg/L of thidiazuron or 5 mg/L of 6-benzylaminopurine. No significant difference in the use of these two cytokinins were observed. None of the explants on four different test media for regeneration of shoots were able to succesfully regenerate. Transformation of hemp was tested using two different methods. Transformed protoplasts from hemp leafs after agroinfiltration were isolated. This method turn out to be unsuitable for use with hemp due to its...
Klíčová slova:
Agrobacterium tumefaciens; Cannabis sativa; in vitro; kalus; mikropropagace; transformace; Agrobacterium tumefaciens; callus; Cannabis sativa; in vitro; micropropagation; transformation