Název:
Výskyt purinergních receptorů P2 a jejich úloha v intracelulární vápníkové signalizaci neonatálních hypofyzárních buněk
Překlad názvu:
Expression of purinergic P2 receptors and their role in intracellular calcium signaling of neonatal pituitary cells
Autoři:
Šprláková, Katarína ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Ryšlavá, Helena (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2014
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Tato diplomová práce je zaměřena na studium výskytu purinergních receptorů P2X a P2Y v buňkách neonatální adenohypofýzy. Purinergní receptory jsou aktivovány navázáním extracelulárního ATP a jejich aktivace vede k zvýšení intracelulární koncentrace vápenatých iontů. Cílem této práce bylo metodou mikrofluorimetrie zjistit, jestli neonatální hypofyzární buňky obsahují purinergní receptory. Také byl sledován vliv různých agonistů a antagonistů purinergních receptorů na intracelulární koncentraci iontů Ca2+ v buňkách neonatální hypofýzy. Radioimunologickým měřením byl sledován účinek extracelulárního ATP na sekreci luteinizačního hormonu a porovnán s účinkem hormonu GnRH. V práci bylo zjištěno, že neonatální buňky hypofýzy jsou na přítomnost extracelulárního ATP méně citlivé než buňky dospělé hypofýzy, ale relativní citlivost k dalším agonistům purinergních receptorů je podobná jako u dospělé hypofýzy. Ve smíšené populaci neonatálních hypofyzárních buněk byly identifikovány purinergní receptory P2X citlivé k ATP a 2 MeSATP, jako i receptory P2Y citlivé k ADP. Dále byly identifikovány receptory P2X7 citlivé k BzATP, receptory P2X2 reagující na PPADS a receptory P2X4 reagující na BDBD. Nakonec bylo prokázáno, že extracelulární ATP může i v nepřítomnosti hormonu GnRH zvyšovat bazální sekreci...This diploma thesis focuses on study of the expression of purinergic receptors P2X and P2Y in the cells of neonatal adenohypofysis. Purinergic receptors are activated by binding of extracellular ATP and their activation leads to an increase in intracellular concentrations of calcium ions. The aim of this thesis was to determine by microfluorimetry method whether neonatal pituitary cells contain purinergic receptors. In addition, the influence of various agonists and antagonists of purinergic receptors on intracellular concentrations of ions Ca2+ in neonatal pituitary cells was monitored. The influence of extracellular ATP on secretion of a luteinizing hormone was observed by radioimmunoassay and it was compared with the effect of a hormone GnRH. It was found that neonatal pituitary cells are less sensitive to extracellular ATP than adult pituitary cells, but the relative sensitivity to other agonists of purinergic receptors is similar to the one of adult pituitary cells. In the mixed population of neonatal pituitary cells there were identified ATP- and 2 MeSATP- sensitive purinergic receptors P2X, as well as ADP-sensitive receptors P2Y. Further, the BzATP-sensitive receptors P2X7, PPADS-sensitive receptors P2X2 and BDBD-sensitive receptors P2X4 were identified. Finally, it was proved that...
Klíčová slova:
extracelulární ATP; intracelulární koncentrace iontů Ca2+; neonatální hypofyzární buňky; purinergní receptory P2X a P2Y; extracellular ATP; intracellular concentrations of ions Ca2+; neonatal pituitary cells; purinergic receptors P2X and P2Y