Název:
Role proteinu ARPC2 v rostlinné buňce
Překlad názvu:
The role of ARPC2 in plant cells
Autoři:
Šlajcherová, Kateřina ; Schwarzerová, Kateřina (vedoucí práce) ; Klíma, Petr (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2013
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Lokalizace proteinu ARPC2 v rostlinné buňce Kateřina Šlajcherová 1 Abstrakt Aktinový cytoskelet je všudypřítomný a plní mnohé nezastupitelné role. Na nukleaci aktinu se u rostlin vedle forminů podílí také ARP2/3 komplex (actin-related protein), složený ze sedmi podjednotek (ARP2, ARP3, ARPC1-C5) a aktivovaný proteinovým komplexem SCAR/WAVE. ARP2/3 komplex je vázán na membránu, vedle nukleace též větví existující mikrofilamenta a mutanti v ARP2/3 komplexu u většiny organismů vykazují vážné poruchy. Rostlinní mutanti mají však mírné fenotypy, např. mutant Arabidopsisi thaliana postrádající ARPC2 (dis2-1) má deformované trichomy a buňky listové epidermis, jeho viabilita však není zasažena. Cílem této práce bylo zmapovat lokalizaci proteinu ARPC2 v rostlinné buňce a detailněji prozkoumat roli ARP2/3 komplexu v morfogenezi rostlinné buňky. Tabáková podjednotka ARPC2 (NtARPC2) byla vizualizována pomocí fúzního proteinu i imunofluorescenčně pomocí protilátek v rostlinách Arabidopsis a byly provedeny experimenty s cílem kolokalizovat ji s aktinovým i mikrotubulárním cytoskeletem, s mitochondriemi a membránovými organelami. Vizualizace byly provedeny na konfokálním i TIRF mikroskopu. Bylo zjištěno, že protein GFP-NtARPC2 má v rostlině podobu motilních teček, jejichž pohyb, nikoli však existence, je závislá na...ARPC2 protein localization in a plant cell Kateřina Šlajcherová 1 Abstract Actin cytoskeleton is an ubiquitous structure which plays numerous irreplacable roles. Actin nucleation is, beside formins, performed by ARP2/3 complex (actin-related protein), comprising of seven subunits (ARP2, 3, C1-C5) and activated by protein SCAR/WAVE complex. ARP2/3 complex is attached to the membrane and branches existing microfilaments, apart from nucleating them de novo. ARP2/3 mutants in most organisms show severe defects. However, plant mutants exhibit only mild phenotype, for example, Arabidopsis thaliana ARPC2 mutant (dis2-1) has deformed trichomes and leaf epidermal cells, but its viability is not impaired. The aim of the thesis is to map ARPC2 localization within the cell and broaden our understanding of ARP2/3 complex role in plant cell morphogenesis. Tobacco ARPC2 (NtArpC2) subunit was visualized in Arabidopsis plants, using the GFP fusion protein as well as imunofluorescence and anti-ARPC2 antibody. Experiments were undertaken to collocalize the subunit with actin and microtubular cytoskeleton, with mitochondrions, endosomes and other membrane organelles. The specimens were observed in confocal and TIRF microscope. The GFP-NtARPC2 protein shows as motile dots; their movement, but not their existence, is dependent...
Klíčová slova:
3 komplex; aktin; ARP2; ARPC2; rostlinná buňka; 3 complex; actin; ARP2; ARPC2; plant cell