Název:
Vliv sulfanu na stárnutí prasečích oocytů in vitro
Překlad názvu:
Effect of hydrogen sulphide on aging of porcine oocytes in vitro
Autoři:
Krejčová, Tereza ; Petr, Jaroslav (vedoucí práce) ; Ješeta, Michal (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2010
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Prasečí oocyty, dozrálé v in vitro podmínkách, které nejsou oplozeny nebo partenogeneticky aktivovány, podléhají procesu, označovanému jako stárnutí. Během stárnutí oocytů dochází ke komplexu strukturních a funkčních změn, které u prasečích oocytů mohou vyústit ve spontánní partenogenetickou aktivaci, fragmentaci či lýzu. V našich kultivačních podmínkách po 3 dnech stárnutí zůstává 23% oocytů ve stádiu metafáze II, 48% je spontánně partenogeneticky aktivováno, 26% oocytů podléhá fragmentaci a 3% oocytů lyzují. Kultivací oocytů v médiu s přídavkem donoru sulfanu Na2S v koncentracích 150 µM a 300 µM dochází k úplnému potlačení fragmentace oocytu během stárnutí prasečích oocytů. Inhibicí enzymů katalyzujících v oocytu syntézu sulfanu (cystathionin-β-syntázy a cystathionin-γ-lyázy) dochází v průběhu stárnutí k časnějšímu nástupu fragmentace oocytů. Efekt obou inhibitorů lze kompletně zvrátit použitím donoru sulfanu Na2S. Proces stárnutí u prasečích oocytů významně ovlivňuje i úspěšnost aktivačních postupů. U prasečích oocytů, které nebyly vystaveny stárnutí, došlo k partenogenetické aktivaci u 94 % z nich. Po vystavení prasečích oocytů 24 hodinám stárnutí poklesl podíl aktivovaných oocytů na 80%. Vystavení prasečích oocytů 24 hodinám stárnutí v přítomnosti donoru sulfanu vyvolalo další pokles v podílu...Unfertilized or parthenogenetically non-activated porcine oocytes matured in vitro conditions are subjected to a process known as aging. During such development, porcine oocytes undergo the complex of the structural and functional changes, which can result in spontaneous parthenogenetic activation, fragmentation or lysis. After three days of culture in our condition, 23% of oocytes remained at the stage of metaphase II, 48% of oocytes were spontaneously parthenogenetically activated, 26% of oocytes were subjected to fragmentation and 3% of oocytes were lysed. The complete suppression of porcine oocyte fragmentation during the process of aging occurred during oocytes cultured in medium with sulphide donor Na2S in concentrations 150 µM and 300 µM. Inhibition of enzymes catalyzing the synthesis of hydrogen sulfide in the oocytes during the process of aging (cystathionine-gamma-lyase and cystathionine beta-synthase), iniciates earlier onset of oocytes fragmentation. The effect of both inhibitors could be completely reversed by using sulphide donor Na2S. The process of aging in porcine oocytes significantly reduces the success of the activation processes. Parthenogenetic activation occurred in 94% of pig oocytes, which were not subjected to aging. The proportion of activated oocytes after exposure to 24...
Klíčová slova:
oocyt; prase; stárnutí; sulfan; aging; oocyte; pig; sulphide