Název: Využití molekulárně biologických in vitro metod pro interpretaci mechanizmů vybraných lékových interakcí warfarinu
Překlad názvu: Study of selected drug-drug interactions of warfarin at the molecular level
Autoři: Rulcová, Alice ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok: 2009
Jazyk: cze
Abstrakt: [cze] [eng]
1 Abstrakt Při biotransformaci xenobiotik jaterními enzymy cytochromu P450 může dojít k farmakokinetickým lékovým interakcím, kdy jedna látka zvyšuje aktivitu biotransformačních enzymů podílejících se na metabolismu jiného léčiva a urychlit tak jeho eliminaci. Zásadní roli v tomto mechanizmu má pregnanový X receptor (PXR), který prostřednictví transkripční aktivace indukuje řadu biotransformačních enzymů I. i II. fáze biotransformace včetně nejdůležitějšího enzymu CYP3A4. Cílem této experimentální diplomové práce je studium interakcí warfarinu a jeho enantiomerů s pregnanovým X nukleárním receptorem při transkripční regulaci cytochromu CYP3A4 na úrovni hepatocytů nebo hepatocytární buněčné linie HepG2 in vitro. Cytotoxicitu warfarinu na buněčné linii HepG2 jsme testovali pomocí metody MTT, cytotoxické působení warfarinu se v testovaných koncentracích neprojevilo. S využitím metod gene reporter assay a two-hybrid assay jsme zjistili, že R-warfarin indukuje expresi genu CYP3A4 prostřednictvím nukleárního receptoru PXR. Pomocí metody RT-PCR jsme pozorovali indukční vliv warfarinu a jeho enantiomerů na expresi genu CYP3A4 v izolovaných hepatocytech dvou dárců. Závěrem lze proto konstatovat, že warfarin aktivací PXR může způsobit farmakokinetické lékové interakce s farmaky metabolizovanými CYP3A4. Xenobiotics are metabolized by hepatic biotransformation enzymes of cytochrome P450. Drug-drug interactions, where one substance increases the activity of biotransformation enzymes involved in the metabolism of other drug and accelerate its elimination, often occure in xenobiotics metabolism. The pregnane X receptor is a ligand-activated nuclear receptor, which plays central role in induction of numerous genes involved in the phase I. and II. of biotransformation including the most important hepatic enzyme CYP3A4. The aim of the diploma thesis was to examine interaction of warfarin and its enantiomers with PXR in terms of transactivation of CYP3A4 gene in hepatoma cell line HepG2 or in primary human hepatocytes. The cytotoxicity of warfarin was tested on cell line HepG2 using the MTT assay. Cytotoxic activity of warfarin didn't become evident in tested concentrations. Using the methods gene reporter assay and two-hybrid assay, we found that R-warfarin induces CYP3A4 gene expression through nuclear receptor PXR. Using the method RT-PCR, we observed induction effect of warfarin and its enantiomers on the CYP3A4 gene expression in isolated hepatocytes of two donors. I can conclude that activation of PXR by warfarin may cause pharmacokinetic drug-drug interactions of pharmaceuticals metabolized by CYP3A4.

Instituce: Fakulty UK (VŠKP) (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Dostupné v digitálním repozitáři UK.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/20.500.11956/24182

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-279062


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Univerzita Karlova > Fakulty UK (VŠKP)
Vysokoškolské kvalifikační práce > Diplomové práce