Název:
Oxidační poškození rohovky a čočky
Překlad názvu:
Radical injury of cornea and lens
Autoři:
Mahelková, Gabriela ; Novotná, Jana (vedoucí práce) ; Filouš, Aleš (oponent) ; Čejková, Jitka (oponent) Typ dokumentu: Disertační práce
Rok:
2010
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Studovali jsme, zda expozice hypoxii vyvolá v rohovce radikálové poškození a změny v kolagenolytické aktivitě. Neprokázali jsme rozdíl v elektroforetickém profilu kolagenních bílkovin rohovky mezi zvířaty vystavenými hypoxii a kontrolními. Zároveň jsme nezjistili žádné známky radikálového poškození. Po expozici hypoxii nedošlo ke změnám ve vaskularizaci rohovek. Hypoxie s 10% O2 nezpůsobila ve tkáni rohovky radikálové poškození a nezvýšila aktivitu kolagenolytických enzymů. Zjišťovali jsme efekt kultivačního podkladu a kultivačních podmínek na proliferaci buněk epitelu čočky a expresi -aktinu hladkých svalových buněk (-SMA). V primárních kulturách jsme neprokázali rozdíly v proliferaci LEC na kolagenu a polystyrenových miskách. Buňky hůře proliferovaly na podložních sklech.Buňky sekundárních kultur adherovaly lépe na kolagen typu I a IV. Kultivační podklad ovlivnil úroveň proliferace buněk i expresi -SMA. Buňky proliferovaly lépe, pokud bylo 4. den vyměněno celé medium, než pokud bylo kultivační medium pouze doplněno. Buňky se v žádné fázi růstu nebarvily na -, - ani -krystalin. Při hodnocení faktorů ovlivňujících proliferaci LEC a expresi -SMA je nutné standardizovat kultivační podmínky jako jsou buněčná densita, kultivační podklad, suplementaci sérem a režim výměny kultivačního media. Bylo prokázáno, že...We studied whether hypoxia of corneal tissue increases the collagenolytic activity due to release of reactive oxygen and nitrogen species. We found no differences in the corneal tissue in the gel electrophoretic profile of collagenous proteins and gelatinolytic activity between normoxic and hypoxic rats. We did not find any sign of radical tissue injury. There were no changes in the vascularization of corneas after exposition to hypoxia. The environmental 10 % hypoxia does not induce radical tissue injury and an increase of collagenolytic activity in the rat cornea. We studied the effect of several culture substrates and culture conditions on lens epithelial cells (LEC) proliferation and -smooth muscle actin (-SMA) expression. There was no difference in growth characteristics of primary cultures on different collagen substrates and plastic dishes. The cells growth worse on the glass. In secondary cultures, LECs adhered better to collagen-coated surfaces. The culture substrate influenced LEC proliferation and -SMA expression. The proliferation was greater when the medium was changed than when extra medium was added on the 4th day. The cells did not synthesize -, - or -crystallin. It is necessary to consider the effects of the medium exchange protocol, serum supplementation, cell density and other cell...
host ::
