Original title: pH citlivé fluorescenční sondy
Translated title: pH sensitive fluorescence probes
Authors: Marková, Kateřina ; Obruča, Stanislav (referee) ; Mravec, Filip (advisor)
Document type: Bachelor's theses
Year: 2016
Language: cze
Publisher: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract: [cze] [eng]
Cílem této práce bylo navrhnout vhodnou metodu pro měření pH bakteriálního cytosolu v bakteriích kmene Cupriavidus necator. Pro získání skenu bakterií byla zvolena fluorescenční mikroskopie a časově rozlišené fluorescence pro získání kalibrační křivky. Nejideálnější sondou, kterou bylo možno využít, byl BCECF-AM. Bylo navrženo, že pro prokaryotický typ buněk je vhodnější použít externí kalibraci než interní. Bakterie s označením H16 vykazují dlouhou dobu života pouze na granulích s obsahem PHB, zatímco u bakterií typu PHB-4 se nejdelší doba života vyskytuje náhodně v celé buňce. The goal of this thesis was to suggest the suitable method for measuring bacterial cytosolic pH in bacteria strain Cupriavidus necator. Fluorescent microscopy was chosen to obtain scan of bacteria and time-resolved fluorescence was chosen to obtain a calibration curve. BCECF-AM was used as a pH-sensitive fluorescent probe. It was suggested that the external calibration is more suitable than internal one for the prokaryotic type of cells. Bacteria H16 shows a long fluorescence lifetime only on the granules containing PHB, while in PHB-4 the longest fluorescence lifetime occurs randomly throughout the cell.
Keywords: BCECF; FLIM; fluorescence lifetime; Intracellular pH; laser scanning microscopy; prokaryotic cell; time-resolved fluorescence; BCECF; doba života fluorescence; FLIM; Intracelulární pH; laserová skenovací mikroskopie; prokaryotická buňka; časově rozlišená fluorescence

Institution: Brno University of Technology (web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library.
Original record: http://hdl.handle.net/11012/58889

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-241023


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Brno University of Technology
Academic theses (ETDs) > Bachelor's theses