|
|
Studium interakce antimikrobiálních peptidů s tkáňovými kulturami
Kroupová, Hilda ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Votruba, Ivan (oponent)
Česky Práce se zabývá studiem nových antimikrobiálních peptidů (AMP) Halictinů (HAL- 1, GMWSKILGHLIR-NH2 a HAL-2, GKWMSLLKHILK-NH2) a jejich strukturních analogů izolovaných z jedových váčků divokých včel Halictus sexcinctus. Struktura a antimikrobiální aktivita těchto peptidů byly popsány dřive [1]. Cílem práce bylo nalézt takový peptid, který by byl silně toxický pouze pro rakovinné buňky a netoxický vůči normálním buňkám a pomocí fluorescenčně značených peptidů získat informace o mechanismu účinku studovaných peptidů. Toxicita HAL-1 a HAL-2 a jejich analogů byla stanovována vůči 2 normálním buněčným liniím (lidské endotheliální buňky pupečníkové vény, HUVEC, a krysím střevním epiteliálním buňkám, IEC) a 2 nádorovým liniím (nádorové buňky děložního čípku, HeLa-S3a buňky karcinomu tlustého střeva, CRC SW 480) metodou MTT (stanovení hodnoty IC50). V prvé řadě jsme testovali peptidy s vysokou antimikrobiální aktivitou a nízkou hemolytickou aktivitou, pro kontrolu jsme stanovovali toxicitu i méně aktivních analogů. Zjistili jsme, že nejcitlivější vůči těmto peptidům jsou buňky HeLa S3. Nejtoxičtější peptidy (HAL-1/9, HAL-1/18, HAL-2/2) usmrcují 50% buněk v testu již v koncentracích 2,5 - 10 µM. Vůči ostatním liniím buněk je třeba k docílení stejného efektu 5-10 krát vyšší koncentrace peptidů. Peptidy...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Studium aktivačního a detoxikačního metabolismu protinádorového léčiva ellipticinu systémem cytochromů P450 in vitro a in vivo…
Kotrbová, Věra ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Hansíková, Hana (oponent) ; Souček, Pavel (oponent)
RNDr. Věra Kotrbová Cíl disertačnípráce cÍLDIsERTačnÍpnÁcn |. Cílem předkládané disertačnípráce bylo rozšířenísoučasných znalostí l " oblasti metabolismu protinádorového léčivaellipticinu jako zásadníhoI I faktoru determinujícího mechanismus působenía cíloýúčinektohoto léčiva. V rámci disertačnípráce byly řešeny následující problematiky: . Metabolismus ellipticinu cytochromy P450 jaterních mikrosomů modelových organismů . Metabolismus ellipticinu purifikovanými cytochomy P450 . Studium indukčníhopotenciálu ellipticinu vůčicytochromům P450 podrodiny lA . Vliv cytochromu b5 na oxidaci ellipticinu katalyzovanou cýochromy P450 lAl atA2 . objasnění mechanismu působenícytochromu b5 na cytochromy P450 lAl a lA2 . Příprava a charakterizace majoritního aduktu ellipticinu s DNA tvořeného jeho metabolitem, l3-hydroxyellipticinem, s deoxyguanosinem
|
|
|
Úloha glykokonjugátů v buněčné signalizaci - CEACAMI a Fcε R1
Dudková, Lenka ; Šmíd, František (vedoucí práce) ; Stiborová, Marie (oponent) ; Bílková, Zuzana (oponent)
CEACAM1 je lidský membránový glykoprotein. První části této práce se zabývá izolací CEACAM1 ze žluče, následným stanovením jeho čistoty a výtěžností použité metody. Je zde popsána imunoafinitní chromatografie CEACAM1 na hydrazidové celulose s orientovaně vázanou monoklonální protilátkou anti-CEA F34-187. Principem této metody je orientovaná vazba oxidované protilátky na aktivovaný hydrazidový matrix. Hrubý proteinový extrakt ze žluči byl aplikován na afinitní kolonu a CEACAM1 byl eluován 6 M guanidinem-HCl. Imunopozitivní zóna CEACAM1 (85 kDa) byla detekována western blotem s anti-CEA protilátkou. Pravděpodobně z důvodu značné glykosylace molekuly nebylo možné použít obvyklé metody detekce proteinů, kromě detekce s konkanavalinem AHRP.
|
host ::
RSS.