|
|
Porovnání různých druhů stacionárních fází v HPLC analýze léčivého přípravku Diklofenak emulgel
Poláčková, Jitka ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Karlíček, Rolf (oponent)
Cílem této rigorózní práce je porovnání různých druhů stacionárních fází při analýze léčiva Diklofenak emulgel. Při řešení problematiky vývoje metodiky HPLC, validací a volby stacionárních fází analytických kolon je nutné vzít v úvahu mnoho odborných materiálů počínaje lékopisy, směrnicemi ICH, odbornými vědeckými časopisy. Dalším možným zdrojem jsou rešeršní databáze. Bylo sledováno několik typů stacionárních fází, na kterých se testovaly podmínky separace léčivých látek, obsažených v léčivém přípravku Diclofenac emulgel. Nejlepších výsledků bylo dosaženo na kolonách Discovery HS-F5 (15 cm x 4,6 mm, 5 m) s časem analýzy pod 4 min; Zorbax SB - CN (4,6 x 150 mm, 5 m) s časem analýzy pod 5 min a na koloně Chromolith Performance RP - 18e (100 - 3 mm) s časem analýzy pod 3 min.
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metody pro separaci a stanovení účinných látek v léčivém přípravku Valetol
Ullrichová, Jana ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Vývoj a validace HPLC metody pro separaci a stanovení účinných látek v léčivém přípravku Valetol Jana Ullrichová Abstrakt Byly zpracovány nalezené literární údaje týkající se stanovení paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu pomocí metody HPLC. Byla upravena a validována metoda HPLC určená pro stanovení paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu v perorálním přípravku Valetol. Byly nalezeny tyto optimální chromatografické podmínky metody HPLC s UV detekcí pro stanovení paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu: Kolona - ODS Hypersil, 250x4,6mm, velikost částic 5m Detekce - UV 273 nm Složení mobilní fáze - voda : 2-propanol : diethylamin : methanol (50 + 15 + 3 + 32) upraveno kys. fosforečnou na pH 7,5 Dávkovaný objem - 5l Rychlost průtoku mobilní fáze - 0,5 ml/min. Teplota - laboratorní Izokratický režim Všechny sledované parametry validace metody vyhovují požadavkům na ně kladeným. Tato metoda může být používána při rutinní kontrole a hodnocení kvality přípravku Valetol.
|
|
|
Vývoj extrakce a HPLC stanovení vitamínů A a D v léčivém přípravku Infadolan
Košvancová, Tereza ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Název diplomové práce: Vývoj extrakce a HPLC stanovení vitamínů A a D v léčivém přípravku Infadolan Tereza Košvancová Školitel : PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Byly nalezeny vhodné chromatografické podmínky pro stanovení obsahu vitamínů A a D v masti Infadolan® za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Optimálních výsledků bylo dosaženo na analytické koloně Onyx Monolithic C18 (50 x 4,6 mm) s předkolonou (5 x 4,6 mm). Jako mobilní fáze byla použita směs acetonitril : methanol : voda v poměru 49 : 49 : 2 (v/v/v) při průtokové rychlosti 2 ml/min, nastřikovaném objemu 20 µl, izokratickém režimu a laboratorní teplotě. K detekci byl použit UV detektor s vlnovými délkami 265 a 290 nm. Vnitřním standardem se stal vitamín E acetát. Látky byly eluovány v pořadí: vitamín A acetát, vitamín D a vitamín E acetát. Během hledání vhodných extrakčních činidel pro vývoj metody byla vyzkoušena extrakční schopnost mnoha základních analytických rozpouštědel. Látky s nejvhodnějšími vlastnostmi byly použity v pěti vícestupňových extrakcích. Získané výsledky byly porovnány a navržen další postup.
|
|
|
Využití HPLC v analýze nutraceutik s obsahem chlorogenových kyselin
Majorová, Michaela ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Michaela Majorová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Využití HPLC v analýze nutraceutik s obsahem chlorogenových kyselin V této práci byla vyvinuta a validována analytická UHPLC metoda pro stanovení isochlorogenových kyselin a jejich disubstituovaných derivátů a následně byla aplikována u doplňků stravy Kilostop (Astina Pharm, a.s.), Zelená káva Extra (Medicura natural), Maxivitalis Zelená káva (Simply You Pharmaceuticals), Vieste Zelená káva Premium (Volt Retail), Zelená káva bylinný extrakt (Topvet), Zelená káva (VITO LIFE) a Kyselina chlorogenová (VITO LIFE). K analýze byla použita kolona Ascentis Express® RP- Amide (100 x 2,1 mm; 2,7 µm) s využitím gradientové eluce o složení mobilní fáze acetonitril a 5%-ní vodný roztok kyseliny mravenčí s průtokovou rychlostí 0,9 ml/min a detekce provedena detektorem diodového pole při vlnové délce 325 nm a konstantní teplotě 30řC. Klíčová slova: UHPLC, kyselina chlorogenová, extrakt zelené kávy, kolona RP- Amide, doplňky stravy
|
|
|
Optimalizace a validace HPLC metody pro stanovení diklofenaku sodného a jeho degradačního produktu v tabletách
Birková, Agáta ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Agáta Birková Školitel: PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace a vývoj HPLC metody pro stanovení diklofenaku sodného a jeho degradačního produktu v tabletách V této diplomové práci byla optimalizována a validována HPLC metoda pro stanovení diklofenaku sodného (DF) a jeho degradačního produktu 1-(2,6-dichlorfenyl)indolin-2-onu (DPI) v tabletách. DF je nesteroidní antiflogistikum s analgetickými, protizánětlivými a antipyretickými účinky. Degradační produkt DPI vzniká v lékových formách při delším skladování, zejména po expozici světlem a teplem. Pří vývoji metody se vycházelo z metody vyvinuté na Farmaceutické fakultě Univerzity Karlovy pro stanovení DF, jeho degradačního produktu a konzervačních látek v topickém emulgelu. Metoda byla optimalizována pro stanovení v tabletách. Byla zvolena monolitická kolona Chromolith® Performance RP-18e (100×3 mm, Merck) a vnitřní standard flurbiprofen. Mobilní fázi představovala směs methanolu a vodného roztoku kyseliny fosforečné o pH 2,5 v poměru 65:35 s průtokem 1 ml/min. Detekce probíhala při 254 nm UV detektorem. Byla testována účinnost chromatografického systému a metoda byla validována. Byly ověřeny tyto parametry: přesnost...
|
|
|
Úprava biologického materiálu před HPLC analýzou - stanovení alfa tokoferolu v erytrocytární membráně
Pospíchalová, Naďa ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
α-Tokoferol je hlavním antioxidantem buněčných membrán savců, jeho účinky však nespočívají pouze v antioxidační aktivitě. Řada studií poukazuje na to, že hladiny α-tokoferolu v membráně erytrocytů vypovídají lépe o jeho saturaci organismu než hladiny plasmatické. Tato diplomová práce se zabývá stanovením α-tokoferolu pomocí HPLC-UV s využitím diferenciální ultracentrifugace a extrakce tuhou fází (SPE) v přípravě vzorku. Vzorky erytrocytů byly ultracentrifugovány (288 000 g, 3 minuty, 4 řC) v přítomnosti butylhydroxytoluenu (BHT), D-mannitolu, HEPES a CaCl2. Poté byl α-tokoferol extrahován z membrán erytrocytů hexanem pomocí extrakce na tuhou fázi za použití kyseliny askorbové a vnitřního standardu tokoferol acetátu. Extrakt, rozpuštěný v methanolu, byl separován na monolitické koloně Chromolith Performance RP-18e (100 4,6 mm) 100% methanolovou mobilní fází. Absorbance byla změřena při 295 nm.
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení amilorid-hydrochloridu v léčivém přípravku
Sohrová, Barbora ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Kujovská Krčmová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Barbora Sohrová Konzultant: PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení amilorid-hydrochloridu v léčivém přípravku Obsahem diplomové práce je vývoj metody pro HPLC stanovení amilorid- hydrochloridu v léčivém přípravku. Léčivý přípravek obsahující amilorid-hydrochlorid se používá při terapii cystické fibrózy jako magistraliter připravený roztok pro inhalaci. Při vývoji byly vyzkoušeny různé stacionární a mobilní fáze a pro vlastní měření byla vybrána kolona HS F5 (150x2,1 mm, 3 µm) a jako mobilní fáze směs acetonitrilu a kyseliny fosforečné 0,085%, které bylo pH upraveno triethylaminem na hodnotu 3,0, v poměru 75:25. Roztok standardů obsahoval amilorid-hydrochlorid, Nečistotu A jako rozkladný produkt a vnitřní standard butylparaben. Vyvinutá metoda byla kompletně validována. Z validace metody bylo zjištěno, že vyvinutá metoda je pro analýzu uvedeného přípravku vhodná a poskytuje přesné a správné výsledky. Jedním ze zjištění validace byla skutečnost, že léčivý přípravek obsahující amilorid-hydrochlorid není dostatečně stabilní. Proto je nutná vždy příprava těsně před použitím.
|
|
|
Stanovení methanolu v lihovinách metodami molekulové spektrometrie (rešeršní práce)
Dominiková, Šárka ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Téma mojí předkládané bakalářské práce se zabývá použitím dvou metod vibrační spektrometrie a to infračervené ( IR) a Ramanovy, použitých při analýzách u stanovení methanolu v lihovinách. Spektroskopické metody mohou velice efektivně pomoci v případech kontroly neznámých, či podezřelých lihovin. Stanovení nebezpečného methanolu v jednotkách až desítkách procent je velice rychlé a pro daný účel i dostatečně přesné. V praktické části bylo připraveno několik vzorků s různými objemovými koncentracemi methanolu v ethanolu tak, aby výsledná objemová koncentrace alkoholů (methanol a ethanol) byla 40 objemových % a byla změřena jejich spektra výše uvedenými metodami. Pro kvantitativní stanovení byly vybrány hodnoty absorbance v charakteristických oblastech pro methanol. Dále byl pro ilustraci proměřen neznámý vzorek čisté a kontaminované lihoviny. Pro vyhodnocení spekter bylo využito spektroskopických programů společnosti Thermo Scientific : OMNIC a TQ Analyst Klíčová slova : FT-IR spektrometrie, Ramanova spektrometrie, Omnic a TQ Analyst.
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení homatropinu a skopolaminu v očních kapkách
Sohrová, Barbora ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Kujovská Krčmová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Barbora Sohrová Konzultant: PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení homatropinu a skopolaminu v očních kapkách Byla vyvinuta a validována metoda pro stanovení homatropin-hydrobromidu a jeho degradačního produktu- skopolamin-hydrobromidu v očních kapkách o koncentraci 1% (s chloridem sodným), 2% (s chloridem sodným) a 2% (s pufrem F 6,45) účinné látky. V průběhu vývoje metody byly testovány různé mobilní i stacionární fáze. Pro validaci byla použita kolona Ascentis Express F5 (100 x 4,6 mm, 2,7 µm). Mobilní fázi tvořila směs acetonitrilu a fosfátového pufru v poměru 9:91 (V/V). Fosfátový pufr obsahoval 3,12% vodný roztok dihydrogenfosforečnanu sodného dihydrátu a 200 µl triethylaminu. PH pufru bylo upraveno kyselinou fosforečnou 85% na hodnotu 2,5. Na kolonu bylo dávkováno 5 µl analyzovaného roztoku, analýza probíhala při průtokové rychlosti 1,1 ml/min a detekci v UV oblasti při 210 nm. Čas analýzy nepřesáhl 6,5 minuty. Analyzovaný roztok obsahoval roztok standardu homatropin-hydrobromidu o koncentraci 25 mg/100 ml a jeho degradační produkt skopolamin-hydrobromid o koncentraci 0,5 mg/100 ml. Vyvinutá metoda byla kompletně validována a byl...
|
|
|
Těkavé metabolity potravinových aditiv a doplňků stravy - rešerše
Beránková, Petra ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Řešitel: Petra Beránková Vedoucí: doc. RNDr. Dalibor Šatínský Ph.D. Konzultantka: Mgr. Kseniya Dryahina Ph.D. Název bakalářské práce: Těkavé metabolity potravinových aditiv a doplňků stravy Většina potravin dostupných v obchodních řetězcích obsahuje potravinová aditiva dodávaná pro zlepšení vzhledu, vůně a chuti. Přídatné látky v lidském organismu procházejí metabolismem a mohou ovlivňovat zdravotní stav jedince. Cílem této práce je prozkoumat možnosti stanovení těkavých metabolitů přítomných v lidském dechu, které vznikají metabolismem potravinových aditiv a doplňků stravy. Experimenty se zaměřily na kvantitativní farmakokinetiku těkavých metabolitů po požití vybrané látky ze skupiny umělých sladidel a potravinových doplňků. Jako modelový příklad bylo zvoleno potravinové sladidlo aspartam (E 951) používané pro dosažení sladké chuti v potravinách a nápojích. V lidském těle se aspartam přeměňuje na methanol, kyselinu mravenčí a fenylalanin. Proto jsme u zdravých dobrovolníků sledovali obsah methanolu v dechu. Analýza dechu byla provedena metodou SIFT-MS (selected iont flow tube mass spectrometry) pomocí přístroje Profile 3. Výsledky práce prokázaly přítomnost methanolu v dechu a zvýšení jeho koncentrace v...
|
host ::
RSS.