|
|
Utilization of genome editing technology to knock out \kur{dnd1} gene in sturgeons
VU THI, Trang
In this study, for the first time we used CRISPR/Cas9 gene editing technology in sturgeons i.e., sterlets (Acipenser ruthenus). The sequences of sgRNA and primers were designed based on published dnd1 sterlet sequence. Each pair of sgRNA oligos after ligation ready duplex DNA fragment was cloned into vector pX330-U6-Chimeric_BB-CBh-hSpCas9 backbone and thereafter the transformation to competent cells Escherichia coli DH5 was done. The plasmid carried sgRNA was extracted for downstream applications. We diluted extracted plasmid with 10% of 2 M KCl and injection into animal pole of fertilized eggs of sterlets at one to four-cell-stage, 4 hours post fertilization (hpf). At the same time, second microinjection with 2.5% FITC-biotin-dextrans was injected into vegetal pole for labelling PGCs. In the control groups, the eggs were only injected by 2.5% FITC into vegetal pole. PGCs of sterlet were visualized and photographed using a uorescent stereo microscope Leica M165 FC. To confirm the presence or deletion/insertion occurring in the target gene, we used MCE-202 MultiNA microchip electrophoresis system for DNA analysis, in which the targeted gene after amplifying by PCR was analyzed. Mutations in both treated and control embryos of sterlet were further assessed by Sanger sequencing of the PCR product. In present study, we successfully established basic protocols such as preparation of competent cells, construction of vector carrying sgRNA and its transformation into competent cells to carry out the CRISPR/Cas9 technology in sturgeons. Less number of PGCs was observed in embryos that were treated with CRISPR/Cas9; however, sequencing did not provide us a reliable evidence for mutation of the targeted gene probably due to an unspecific PCR. Therefore, more authentication of dnd1 knockout should be done in future by more specific PCR and repeated sequencing.
|
|
| |
|
|
Optimalizace proudění vzduchu v horkovzdušném sterilizátoru
Šťastná, Veronika ; Sekora, Jiří (oponent) ; Provazník, Ivo (vedoucí práce)
Obsah tyhle práce se zabývá rozložením teplot, prouděním vzduchu a optimalizaci proudění vzduchu u lékařských a laboratorních přístrojů. A to hlavně z hlediska využití komory teplovzdušného sterilizátoru. Cílem mé bakalářské práce je obeznámení o dané problematice z co nejlepšího teoretického popisu a vysvětlení a obohacená o konkrétné obrázky popisující danou problematiku. Pro tyhle účely bylo důležité zaobírat se o správný výběr literatury a osobně jsem musela navštěvovat firmu, která se zaobírá výrobou sterilizátorů různých druhů.
|
|
|
Návrh nového kontinuálního systému měření jakosti páry
Foltová, Anežka ; Sedlák, Petr (oponent) ; Holcman, Vladimír (vedoucí práce)
Tato diplomová práce se zabývá návrhem nového kontinuálního systému měření jakosti sterilizační páry. Na začátku se seznámíme s procesem sterilizace, jejími metodami a postupy. Poté s pojmem sytá pára, jejími parametry pro sterilizaci a senzory, kterými se parametry měří. Poté je zde popsán postup současného měření kvality sterilizační páry a následné návrh nového měření kvality páry. Po návrhu proběhlo měření dat, jejich analýza a vyhodnocení.
|
|
|
Continuous measurement of the quality of steam
Rageh, Akram ; Sedlák, Petr (oponent) ; Holcman, Vladimír (vedoucí práce)
The diploma thesis deals with the measurement, analysis, and then finding the appropriate physical parameters for analyzing the quality of saturated steam sterilization. This work aims to determine the critical parameters system of steam generator to operate according to the norm CSN. Part of the project is the description of the physical sterilization, saturated steam, methods and sensors for the control of steam sterilization. Sterilization, saturated steam, the steam sterilization parameters of, measuring the quality of steam
|
|
|
Fyzikální vlastnosti sterilizační páry
Kotlánová, Markéta ; Sedlák, Petr (oponent) ; Holcman, Vladimír (vedoucí práce)
Diplomová práce se zabývá nalezením, měřením a hodnocením vhodných fyzikálních parametrů pro analýzu kvality syté sterilizační páry dle normy ČSN EN 285+A2, což je první krok pro nahrazení zastaralých procesů této analýzy moderními automatizovanými systémy. Dílčí částí projektu je popis fyzikální sterilizace, syté páry, metod a senzorů pro kontrolu sterilizační páry a samotné měření a vyhodnocení této problematiky.
|
|
|
Polymerní biokompatibilní materiály
Matlák, Jiří ; Stránský, Lubomír (oponent) ; Molliková, Eva (vedoucí práce)
Bakalářská práce je zaměřena na vybrané polymerní biokompatibilními materiály. V úvodu práce je nastíněna problematika biokompatibilních materiálů a objasněny základní pojmy. Dále je rozebíráno chemické složení, výsledné mechanické a chemické vlastnosti a příklady použití polymerních materiálů.
|
|
|
Studium vlivu teploty a UV záření na celkový sterilační účinek dielektrického bariérového výboje
Kramárová, Petra ; Grossmannová, Hana (oponent) ; Kozáková, Zdenka (vedoucí práce)
Hlavním tématem této bakalářské práce je studium vlivu teploty a UV záření na celkový sterilizační účinek dielektrického bariérového výboje. Sterilizace je proces, při kterém dochází k eliminaci všech forem života. Předložená bakalářská práce se zabývá plazmovou sterilizací, což je jedna z metod, které vyhovují požadavkům na sterilizaci teplotně senzitivních materiálů a materiálů citlivým na chemické látky. Tato sterilizační metoda je účinná na široké spektrum prokaryotních i eukaryotních mikroorganismů. Působí na ně několika mechanismy založenými na účincích UV-záření, aktivních částic a teploty. V mé práci byl pro opracování vzorků použit dielektrický bariérový výboj (DBD) pracující za atmosférického tlaku. Výboj byl generován v argonu a dusíku. Hustota výkonu dodávaného do plazmatu byla 2 562,96 mW.cm-3 (pro argon) a 2 044,44 mW.cm-3 (pro dusík), u těchto plazmových výkonů bylo v předchozích měřeních dosaženo nejlepších sterilizačních účinků. Jako modelové mikroorganismy byly použity spory plísně Aspergillus niger. Nosným materiálem byl papír typu Whatman No. 1. Každá série vzorků byla opracovávána vždy v časech 5, 10, 20, 40, 60, 120 a 180 sekund. Vliv UV záření byl studován v plazmatu pomocí křemenného skla propouštějící toto záření. Při opracování byla část vzorků zakrytá křemenným sklíčkem a část ponechána volně. Dielektrický bariérový výboj pronikající přes křemenné sklíčko měl nižší sterilizační účinek než výboj působící přímo na vzorek, jelikož na vzorky bez sklíčka působily kromě UV záření a teploty i aktivní částice. Výsledky nám ukázaly i to, že sterilizační účinek DBD roste s délkou expozičního času. Při srovnávání výsledků získaných při stejných podmínkách v argonu a dusíku byl vyšší sterilizační účinek pozorován v argonu. Účinky UV záření a teploty byly studovány odděleně. Při studiu teplotní inaktivace byla pomocí termočlánku proměřena teplota působící mezi elektrodami, poté byly v termostatu vzorky vystaveny teplotě shodné s teplotou v plazmatu. Takto získané výsledky byly srovnány s výsledky dosaženými při přímé expozici plazmatem. Na základě srovnání lze konstatovat, že vliv teploty při sterilizaci v DBD byl zcela zanedbatelný. Pomocí optické emisní spektroskopie byla provedena spektrální analýza plazmového výboje.
|
|
|
Studium sterilizačního účinku diafragmového výboje v kapalinách
Holíková, Lenka ; Slámová, Jitka (oponent) ; Kozáková, Zdenka (vedoucí práce)
Hlavním cílem této bakalářské práce je studium sterilizačního účinku diafragmového výboje v kapalinách. Sterilizace je proces, při kterém dochází k eliminaci všech forem života. Obecně se sterilizace dělí na fyzikální a chemické. Plazmová sterilizace je řazena do fyzikálních metod, ačkoliv se v ní uplatňuje i působení chemických procesů. Využívá se při ní vlivů UV záření, volných radikálů a teploty. Jako modelové mikroorganismy jsou v této práci využívány spóry plísně Aspergillus niger F8189 a spóry bakterie Bacillus subtilis. Aspergillus niger je vhodný mikroorganismus pro jeho odolnost vůči změnám pH, je životaschopný v širokém rozmezí hodnot pH. Bacillus subtilis je vybrán kvůli dobré teplotní rezistenci. Diafragmový výboj je jedním z možných typů elektrických výbojů buzených v kapalinách. Jedná se o nízkoteplotní plazma, které je generováno pomocí vysokého stejnosměrného napětí. V plazmových kanálcích („streamerech“) vznikají různé fyzikální a chemické procesy. Mezi chemické procesy patří hlavně generace aktivních látek a částic, které iniciují chemické reakce a atakují spóry plísní a bakterií obsažených v kapalinách. Do fyzikálních procesů se řadí rázové vlny, silné elektrické pole a ultrafialové záření. Pokusy byly prováděny v reaktoru s odděleným katodovým a anodovým prostorem. V nevodivé přepážce byla uchycena PET diafragma s otvorem velikosti špendlíkové dírky (počáteční průměr 0,4 mm). Bylo pozorováno zvětšení otvoru v důsledku degradace materiálu na hraně dírky vlivem výboje. Odbourávání spór bylo pozorováno v závislosti na čase a na výkonu. Dalšími měřenými veličinami byly pH, vodivost a teplota. Nebylo prokázáno odlišné působení v katodovém a anodovém prostoru. Hlavním činitelem odstranění spór plísně Aspergillus niger byla pravděpodobně teplota, protože u teplotně odolnějšího mikroorganismu Bacillus subtilis nebyl pozorován prokazatelný sterilizační účinek působení diafragmového výboje. Byl také proveden pokus, při kterém byl zkoumán pouze vliv teploty na spóry plísně Aspergillus niger. Vzorky byly umístěny v termostatu, kde byl simulován stejný teplotní nárůst jako ve výboji. Experiment měl podobný průběh jako pokus ve výboji.
|
|
|
Dobrovolná sterilizace žen v Evropě: Studie č. 5.314
Lovětínský, Vojtěch ; Mylková, Petra
Práce se zabývá komparací právních úprav vybraných evropských států týkajících se možností provedení lékařského zákroku sterilizace na žádost pacientky jako formy antikoncepční metody. Zhruba od 70. let dochází k postupnému přijímání zákonů, které umožňují podstoupit sterilizaci na základě dobrovolné a svobodné vůle pacientky. Komparace srovnává zejména podmínky, na jejichž splnění právní úpravy vážou možnost provedení tohoto zákroku. Právní úprava v České republice v porovnání s úpravami ostatních zpracovaných zemí zakotvuje poměrně přísné požadavky a omezení, za nichž může být sterilizační zákrok proveden, zatímco jiné, zejména severské země, volí výrazně liberálnější přístup a ponechávají toto rozhodnutí na pacientce samotné. Společným znakem většiny úprav je pak zvýšená ochrana mladistvých či právně nezpůsobilých pacientek při podávání žádostí o provedení sterilizačního zákroku.
Plný text:  PDF
|
host ::
RSS.