|
|
Vliv vybraných léků na kostní metabolismus
Karešová, Iva ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Bayer, Milan (oponent) ; Horák, Pavel (oponent)
Souhrn Vzhledem ke stárnutí populace a prodlužující se délce života představuje osteoporóza závažný celosvětový zdravotní problém. V současné době se odhaduje, že osteoporózou trpí více než 200 milionů lidí. Zlomeniny v důsledku osteoporózy jsou hlavní příčinou morbidity a mortality starších lidí (Compston et al., 2019). Řada důkazů naznačuje souvislost mezi antiepileptiky a kostními abnormalitami. Prevalence osteoporózy a osteopenie u dlouhodobě léčených epileptiků je vysoká. Více než 50 % pacientů s epilepsií má nízkou hodnotu kostní minerální denzity (BMD) (Ko et al., 2020). Cílem této disertační práce bylo posouzení vlivu orchidektomie a vybraných nových antiepileptik (zonisamid, gabapentin, pregabalin, levetiracetam) na kostní metabolismus u mladých potkanů kmene Wistar. Byl potvrzen negativní vliv provedené orchidektomie potkanů na kostní tkáň po 12 týdnech. Orchidektomie vedla k statisticky významnému snížení BMD a měla negativní vliv na mechanickou odolnost kostí. Naše výsledky potvrzují, že mladý potkan po provedené orchidektomii může být považován za vhodný zvířecí model pro studium osteopenie. Po 12 týdnech podávání nových antiepileptik (zonisamid, gabapentin, pregabalin, levetiracetam) nebyl potvrzen statisticky významný vliv na BMD u orchidektomovaných potkanů ani u gonadálně intaktních...
|
|
|
Epigenetic Regulation of Adhesive Molecules in High-grade Serous Ovarian Carcinoma
Baranová, Ivana ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
4 Souhrn Název: Epigenetická regulace adhezivních molekul u high-grade serózního ovariálního karcinomu Nedostatek účinných biomarkerů pro screening a včasnou detekci ovariálního karcinomu je v současné době považován za jeden z nejnaléhavějších problémů onkogynekologie. Vzhledem k tomu, že k epigenetickým změnám dochází již v počátcích karcinogeneze, mohly by být tyto změny využity jako screeningové markery u rizikové populace. Epigenetické mechanismy se mimo jiné podílejí i na regulaci adhezivních molekul, které sehrávají důležitou roli při rozvoji nádoru a tvorbě metastáz. Hlavním cílem této práce byla analýza změn v metylaci u vybraných kadherinů a kateninů v ovariální nádorové tkáni v porovnání s kontrolní tkání. Vyšetřovaný soubor tvořilo 68 pacientek s high-grade serózním ovariálním karcinomem (HGSOK) a 46 kontrolních pacientek. Pro stanovení oblastí s nejvýznamnějšími změnami v metylaci ve vybraných genech bylo využito masivně paralelního sekvenování. Pro potvrzení metylačních změn v místech s největším potenciálem byla použita metylačně-sensitivní vysokorozlišovací analýza křivek tání a metylačně-specifická kvantitativní polymerázová řetězová reakce. Dalším cílem práce bylo vytvoření panelu biomarkerů, který by mohl být v budoucnu využit při screeningu HGSOK. Vybrané kadheriny byly proto hodnoceny...
|
|
|
Bioanalytické hodnocení nových inhibitorů acetylcholinesteráz
Mžik, Martin ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Maier, Vítězslav (oponent) ; Kučera, Radim (oponent)
5 SOUHRN Bioanalytické hodnocení je základním pilířem preklinického výzkumu nových léčiv, které zahrnuje zkoumání jejich farmakokinetiky a metabolismu. Využití moderních analytických přístupů je v této oblasti téměř nezbytné, proto se v současnosti uplatňují techniky založené především na chromatografii a hmotnostní spektrometrii. Validace analytických metod dle aktuálních doporučení je naprostou nutností pro získání spolehlivých kvantitativních výsledků, na jejichž základě lze nové léčivo hodnotit. Předložená disertační práce se v teoretické části zabývá úvodem do problematiky Alzheimerovy demence a stručně popisuje nové strategie léčby. V dalších kapitolách je věnována pozornost tématům, které se bezprostředně týkají experimentální práce - kapalinové chromatografii, hmotnostní spektrometrii, úpravě biologických vzorků, validaci metod a farmakokinetice. Experimentální část je koncipována jako soubor pěti publikovaných článků s komentářem, které jsou tematicky rozděleny do tří kapitol: I. bioanalytické hodnocení látek PC-37 a PC-48 - nových duálních inhibitorů cholinesteráz odvozených od 7-methoxytakrinu a donepezilu, II. studium vlivu struktury donepezilu a jeho strukturálních částí na transport přes hematoencefalickou bariéru, III. bioanalytické hodnocení látek S-K1025 a S-K1026 - nových duálních...
|
|
|
Bioanalytické hodnocení nových inhibitorů acetylcholinesteráz
Mžik, Martin ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
5 SOUHRN Bioanalytické hodnocení je základním pilířem preklinického výzkumu nových léčiv, které zahrnuje zkoumání jejich farmakokinetiky a metabolismu. Využití moderních analytických přístupů je v této oblasti téměř nezbytné, proto se v současnosti uplatňují techniky založené především na chromatografii a hmotnostní spektrometrii. Validace analytických metod dle aktuálních doporučení je naprostou nutností pro získání spolehlivých kvantitativních výsledků, na jejichž základě lze nové léčivo hodnotit. Předložená disertační práce se v teoretické části zabývá úvodem do problematiky Alzheimerovy demence a stručně popisuje nové strategie léčby. V dalších kapitolách je věnována pozornost tématům, které se bezprostředně týkají experimentální práce - kapalinové chromatografii, hmotnostní spektrometrii, úpravě biologických vzorků, validaci metod a farmakokinetice. Experimentální část je koncipována jako soubor pěti publikovaných článků s komentářem, které jsou tematicky rozděleny do tří kapitol: I. bioanalytické hodnocení látek PC-37 a PC-48 - nových duálních inhibitorů cholinesteráz odvozených od 7-methoxytakrinu a donepezilu, II. studium vlivu struktury donepezilu a jeho strukturálních částí na transport přes hematoencefalickou bariéru, III. bioanalytické hodnocení látek S-K1025 a S-K1026 - nových duálních...
|
|
|
Epigenetic Regulation of Adhesive Molecules in High-grade Serous Ovarian Carcinoma
Baranová, Ivana ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
4 Souhrn Název: Epigenetická regulace adhezivních molekul u high-grade serózního ovariálního karcinomu Nedostatek účinných biomarkerů pro screening a včasnou detekci ovariálního karcinomu je v současné době považován za jeden z nejnaléhavějších problémů onkogynekologie. Vzhledem k tomu, že k epigenetickým změnám dochází již v počátcích karcinogeneze, mohly by být tyto změny využity jako screeningové markery u rizikové populace. Epigenetické mechanismy se mimo jiné podílejí i na regulaci adhezivních molekul, které sehrávají důležitou roli při rozvoji nádoru a tvorbě metastáz. Hlavním cílem této práce byla analýza změn v metylaci u vybraných kadherinů a kateninů v ovariální nádorové tkáni v porovnání s kontrolní tkání. Vyšetřovaný soubor tvořilo 68 pacientek s high-grade serózním ovariálním karcinomem (HGSOK) a 46 kontrolních pacientek. Pro stanovení oblastí s nejvýznamnějšími změnami v metylaci ve vybraných genech bylo využito masivně paralelního sekvenování. Pro potvrzení metylačních změn v místech s největším potenciálem byla použita metylačně-sensitivní vysokorozlišovací analýza křivek tání a metylačně-specifická kvantitativní polymerázová řetězová reakce. Dalším cílem práce bylo vytvoření panelu biomarkerů, který by mohl být v budoucnu využit při screeningu HGSOK. Vybrané kadheriny byly proto hodnoceny...
|
|
|
Bioanalytické hodnocení nových inhibitorů acetylcholinesteráz
Mžik, Martin ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Maier, Vítězslav (oponent) ; Kučera, Radim (oponent)
5 SOUHRN Bioanalytické hodnocení je základním pilířem preklinického výzkumu nových léčiv, které zahrnuje zkoumání jejich farmakokinetiky a metabolismu. Využití moderních analytických přístupů je v této oblasti téměř nezbytné, proto se v současnosti uplatňují techniky založené především na chromatografii a hmotnostní spektrometrii. Validace analytických metod dle aktuálních doporučení je naprostou nutností pro získání spolehlivých kvantitativních výsledků, na jejichž základě lze nové léčivo hodnotit. Předložená disertační práce se v teoretické části zabývá úvodem do problematiky Alzheimerovy demence a stručně popisuje nové strategie léčby. V dalších kapitolách je věnována pozornost tématům, které se bezprostředně týkají experimentální práce - kapalinové chromatografii, hmotnostní spektrometrii, úpravě biologických vzorků, validaci metod a farmakokinetice. Experimentální část je koncipována jako soubor pěti publikovaných článků s komentářem, které jsou tematicky rozděleny do tří kapitol: I. bioanalytické hodnocení látek PC-37 a PC-48 - nových duálních inhibitorů cholinesteráz odvozených od 7-methoxytakrinu a donepezilu, II. studium vlivu struktury donepezilu a jeho strukturálních částí na transport přes hematoencefalickou bariéru, III. bioanalytické hodnocení látek S-K1025 a S-K1026 - nových duálních...
|
|
|
Epigenetic Regulation of Adhesive Molecules in High-grade Serous Ovarian Carcinoma
Baranová, Ivana ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent) ; Friedecký, David (oponent)
4 Souhrn Název: Epigenetická regulace adhezivních molekul u high-grade serózního ovariálního karcinomu Nedostatek účinných biomarkerů pro screening a včasnou detekci ovariálního karcinomu je v současné době považován za jeden z nejnaléhavějších problémů onkogynekologie. Vzhledem k tomu, že k epigenetickým změnám dochází již v počátcích karcinogeneze, mohly by být tyto změny využity jako screeningové markery u rizikové populace. Epigenetické mechanismy se mimo jiné podílejí i na regulaci adhezivních molekul, které sehrávají důležitou roli při rozvoji nádoru a tvorbě metastáz. Hlavním cílem této práce byla analýza změn v metylaci u vybraných kadherinů a kateninů v ovariální nádorové tkáni v porovnání s kontrolní tkání. Vyšetřovaný soubor tvořilo 68 pacientek s high-grade serózním ovariálním karcinomem (HGSOK) a 46 kontrolních pacientek. Pro stanovení oblastí s nejvýznamnějšími změnami v metylaci ve vybraných genech bylo využito masivně paralelního sekvenování. Pro potvrzení metylačních změn v místech s největším potenciálem byla použita metylačně-sensitivní vysokorozlišovací analýza křivek tání a metylačně-specifická kvantitativní polymerázová řetězová reakce. Dalším cílem práce bylo vytvoření panelu biomarkerů, který by mohl být v budoucnu využit při screeningu HGSOK. Vybrané kadheriny byly proto hodnoceny...
|
|
|
Epigenetic Alternations in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma: Potential Biomarkers
Kovaříková, Helena ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Friedecký, David (oponent) ; Pešta, Martin (oponent)
4 1 Summary CZE Dlaždicobuněčné nádory hlavy a krku jsou skupinou heterogenních tumorů vznikajících v epiteliálních buňkách aerodigestivního traktu a jsou charakteristické složitou diagnostikou, léčbou a prognózou onemocnění. Konzumace alkoholu, kouření a infekce vysoce rizikovými lidskými papillomaviry jsou velmi dobře popsané rizikové faktory výskytu nádorů hlavy a krku. Sinonasální karcinomy jsou skupinou nádorů vznikajících v dutině nosní a vedlejších dutinách nosních. Karcinomy orofaryngu jsou nádory vznikající v oblasti krku za ústní dutinou. mikroRNA (miRNA) jsou krátké (~23 nukleotidů) nekódující molekuly RNA účastnící se regulace genové exprese. Primární rolí mikroRNA molekul je negativní regulace translace jako součást komplexu RISC (komplex umlčující geny indukovaný RNA) pomocí represe translace a mRNA degradace. miRNA se účastní regulace procesů u mnoha onemocnění, jako jsou neurodegenerativní choroby, metabolické poruchy a malignity. Kromě toho jsou miRNA rozeznávány jako klíčové molekuly účastnící se kancerogeneze a progrese u různých typů nádorových onemocnění. Ve své výzkumné práci v rámci doktorského studia jsem se zaměřila na výzkum relativní exprese několika dříve vytipovaných mikroRNA s využitím real-time PCR. A dále jsme zkoumali korelaci jejich expresních profilů se zaznamenanými...
|
|
|
Laboratorní vyšetření funkce ledvin
Šálek, Tomáš ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Jabor, Antonín (oponent) ; Průša, Richard (oponent)
Souhrn Laboratorní vyšetření funkce ledvin Ve své práci jsem se věnoval především problematice glomerulární filtrace (GFR). GFR je hlavní ukazatel funkce ledvin. Její pokles je asociován se zvýšenou morbiditou a mortalitou. Při poklesu GFR pod 1,0 ml/s/1,73m2 po dobu delší než 3 měsíce mluvíme o chronickém onemocnění ledvin (CKD). Pacientům s CKD je redukována dávka farmakoterapie s farmakokinetikou renálního vylučování a je podávána nefroprotektivní terapie. Proto je nutné včas zjistit tento pokles GFR. Práce porovnává odhady glomerulární filtrace ze sérového kreatininu (eGFRcreatinine) a cystatinu C (eGFRcystatinC) u čtyř různých kohort pacientů: 101 pacientů s monoklonální gamapatií neurčeného významu (MGUS), 13 intoxikovaných metanolem, 1515 diabetiků a 352 pacientů s CKD. Kreatinin byl u všech pacientů stanoven enzymaticky s návazností měření na mezinárodní certifikovaný referenční materiál NIST SRM 967. Cystatin C byl analyzován imunoturbidimetrickou standardizovanou metodou s návazností na DA ERM 471. Pouze u skupiny pacientů s MGUS, což byla první studovaná skupina, nebyla ještě standardizovaná metoda k dispozici. Pro odhad GFR byly použity nejaktuálnější validované rovnice. U pacientů s MGUS byla pro odhad eGFRcreatinine použita MDRD rovnice, pro eGFRcystatinC Grubbova rovnice. U pacientů...
|
|
|
Změny v metylaci DNA u pacientek s ovariálním karcinomem
Chmelařová, Marcela ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Vávrová, Jiřina (oponent) ; Bouda, Jiří (oponent)
Souhrn V naší práci jsme se zabývali studiem změn v metylaci DNA u ovariálního karcinomu. Vzhledem k agresivitě tohoto onemocněni je velice důležité podrobně zmapovat molekulárně biologické parametry včetně těch epigenetických, jež by později mohly být využity jak v diagnostice, tak léčbě ovariálního karcinomu. Nejprve jsme se zaměřili na zavedení a zoptimalizování technik vhodných pro analýzu metylace DNA izolované z parafínových bločků. Dalším krokem byla analýza vybraných CpG míst především tumor supresorových genů. Tkáňové vzorky ovariálních adenokarcinomů a normální ovariální tkáně fixované formalínem, zalité parafínem byly získány od 109 žen (69 pacientek s ovariálním karcinomem, 40 pacientek s nenádorovými ovárii) léčených na Porodnické a gynekologické klinice, Fakultní nemocnice Hradec Králové. Vzorky nenádorových ovárií byly získány od pacientek operovaných pro nemaligní diagnózu. DNA byla izolována použitím Qiagen DNA extrakčního kitu. Zavedli a zoptimalizovali jsme dvě metodiky - MSP (metylačně specifickou PCR) a MS-MLPA (Methylation Specific Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification). Zjistili jsme, že pro analýzu metylace málo kvalitní DNA izolované z parafínových bločků je vhodnější MS-MLPA než MSP. Tato skutečnost je dána především tím, že MS-MLPA nevyžaduje poměrně agresivní...
|
host ::
RSS.