|
|
Mechanizmy rezistencie v terapii akútnej myeloidnej leukémie
Suchá, Simona ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Žák, Pavel (oponent) ; Matoušková, Petra (oponent)
V SLOVENSKOM JAZYKU Kandidát: Mgr. Simona Suchá Školiteľ: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Názov dizertačnej práce: Mechanizmy rezistencie v terapii akútnej myeloidnej leukémie Akútna myeloidná leukémia (AML) patrí medzi hematologické ochorenia známe pre svoju rozsiahlu heterogenitu, nedostatočnú odpoveď na liečbu a vysokú mieru relapsov. Terapia častokrát zlyháva kvôli mimoriadne rezistentným leukemickým klonom prítomným v čase diagnózy. Vďaka ich schopnosti vyhnúť sa terapii sa môže ochorenie voľne šíriť ďalej v tele. Dôkladná charakteristika týchto buniek je preto kľúčová v ich úspešnom odhalení a následnom zničení. AML bunky však dokážu nadobudnúť rezistenciu na prítomné látky i počas prebiehajúcej liečby, a to vďaka ich dlhodobému vystaveniu týmto látkam. Extrémne vysoká adaptabilita leukemických buniek im umožňuje prežiť zakaždým, keď sa stres v podobe liečiv objaví. Preto je nevyhnutné odhaliť molekulárne mechanizmy, ktoré bunky využívajú k tomu, aby sa týmto vonkajším vplyvom prispôsobili. Na základe týchto poznatkov boli stanovené dva primárne ciele tejto práce. Prvým bolo zistiť klinickú relevanciu ABC efluxných transportérov v AML a vyhodnotiť možný vplyv cielenej terapie na chemoterapiu. Dôraz bol kladený na liečivá zo skupiny FLT3 inhibítorov (midostaurin) a CDK4/6 inhibítorov...
|
|
|
The effect of the tyrosine kinase inhibitor tirabrutinib on anthracycline resistance in a tumor cell line.
Lebeková, Nikola ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Prahe, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Kandidát: Nikola Lebeková Školiteľ: prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Názov diplomovej práce: Vplyv tyrozínkinázového inhibítora tirabrutinibu na antracyklínovú rezistenciu v nádorovej bunkovej línii Nádorové ochorenia predstavujú širokú skupinu heterogénnych ochorení, ktoré sú spôsobené zmenami na genetickej a epigenetickej úrovni. Tieto zmeny nepriaznivo ovplyvňujú bunky rôznych ľudských tkanív, a tým prispievajú k rozvoju malignít. Chemoterapia je považovaná za jeden zo základných pilierov terapie nádorových ochorení. Antracyklínové chemoterapeutiká patria medzi extenzívne používané liečivá v tejto terapii. Avšak, výrazné obmedzenie v ich používaní predstavujú nežiaduce účinky vyplývajúce z mechanizmu ich účinku. Svoju rolu v rozvoji kardiotoxicity, ako jedného z nežiaducich účinkov terapie, majú aj enzýmy redukujúce karbonyl, ktoré procesom metabolickej redukcie antracyklínov produkujú toxické redukované metabolity. Zároveň tieto metabolity vykazujú mnohonásobne nižšiu protinádorovú aktivitu, čím sa podieľajú na vzniku a vývoji rezistencie, ktorá v klinickej praxi predstavuje ďalšiu významnú prekážku. Predmetom tejto diplomovej práce bolo štúdium inhibičného účinku vybraného tyrozínkinázového inhibítora...
|
|
| |
|
|
Role mikroRNA v regulaci jaterních enzymů metabolizujících léčiva
Sedlmajer, Štěpán ; Smutný, Tomáš (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Student/ka: Štěpán Sedlmajer Školitel: PharmDr. Tomáš Smutný, Ph.D. Název diplomové práce: Role mikroRNA v regulaci jaterních enzymů metabolizujících léčiva Játra jsou hlavním biotransformačním orgánem v těle. Cytochromy P450 a konjugační enzymy jsou nezastupitelné enzymy v metabolismu léčiv a dalších xenobiotik. V poslední době narůstá poznání o post-transkripční regulaci těchto enzymů pomocí molekul mikroRNA. MikroRNA jako epigenetické regulátory exprese se většinou vážou na zcela nebo částečně komplementární sekvence v 3'UTR (3' untranslated, nepřekládaných) regionech mRNA molekul. MikroRNA mají podíl na interindividuální variabilitě v expresi a aktivitě metabolizujících enzymů. Objasnění jejich role a mechanismů působení může přispět k vývoji nových léčiv a personalizaci farmakoterapie. Práce shrnuje dosavadní vybrané poznatky o regulaci převážně jaterních cytochromů P450 a konjugačních enzymů prostřednictvím mikroRNA. Popsán je také vliv RNA editací, jednonukleotiových polymorfismů a pseudogenů.
|
|
|
Vliv zanubrutinibu na rezistenci nádorových buněk k daunorubicinu způsobenou karbonyl redukujícími enzymy.
Havlíčková, Lucie ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
4 Abstrakt Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Lucie Havlíčková Školitel: Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv zanubrutinibu na rezistenci nádorových buněk k daunorubicinu způsobenou karbonyl redukujícími enzymy. Antracyklinová antibiotika (ANT) patří mezi léčiva první volby používaná na onkologická onemocnění, včetně akutní myeloidní leukémie. V chemoterapeutické léčbě se především využívá daunorubicin (DAUN) s karbonylovou skupinou v poloze 13. Působením nikotinamidadenindinukleotid-fosfát dependentních karbonyl redukujících enzymů (CRE) vzniká jeho hydroxylový metabolit. Daunorubicinol (DAUN-ol) vykazuje vyšší toxicitu na srdeční tkáň a nižší cytotoxicitu na rakovinotvorné buňky, které získávají odolnost k jeho účinkům. Nadměrná exprese enzymů, které katalyzují přeměnu antineoplasticky účinného DAUN, způsobuje postupný rozvoj rezistence na podané ANT. Z toho důvodu se hledají nové farmakoterapeutické možnosti, jak tomuto procesu zabránit, aby se podané léčivo udrželo v cílové buňce po co nejdelší dobu. Jedním způsobem je použití inhibitorů, které snižují enzymatickou aktivitu CRE a tím zabraňují nežádoucímu metabolismu DAUN na kardiotoxický a neúčinný DAUN-ol. Cílem diplomové práce bylo studium inhibice zanubrutinibu (ZANIB)...
|
|
|
Antiproliferativní a anthelmintické účinky extraktů z kapradin
Turoňová, Petra ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Petra Turoňová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, PhD. Název diplomové práce: Antiproliferativní a anthelmintické účinky extraktů z kapradin Kapradiny patří mezi vyšší výtrusné cévnaté rostliny. V této práci byly zkoumány antiproliferativní a anthelmintické účinky extraktů vybraných druhů kapradin. Antiproliferativní účinky extraktů byly testovány na buněčné linii SW480. Jedná se o buněčnou linii původně získanou z primárního adenokarcinomu tlustého střeva. Anthelmintické účinky extraktů byly studovány na larvách L3 Haemonchus contortus, což je nejrozšířenější vnitřní parazit ovcí a koz. Pro zjištění antiproliferativní aktivity extraktů byl nejprve proveden úvodní screening více druhů kapradin o dvou koncentracích. Cytotoxicita byla vyhodnocena změřením absorbance na spektrofotometru Tecan. Čtyři druhy kapradin, které vykazovaly nejslibnější antiproliferativní aktivitu byly podrobeny testování ve třech časových intervalech a čtyřech koncentracích. Larvy L3 H. contortus byly vystaveny extraktům kapradin po dobu 7 dnů a pomocí mikroskopie bylo stanoveno procento vyvinutých larev L4 z celkového množství použitých larev stádia L3. Nejvyšší antiproliferativní a anthelmintickou aktivitu vykazovaly druhy...
|
|
|
Vliv vitaminu D na expresi ABCB1 a CYP3A4 v tkáňových řezech z lidského střeva
Mazurová, Tereza ; Vokřál, Ivan (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Tereza Mazurová Školitel: PharmDr. Ivan Vokřál, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv vitaminu D na expresi ABCB1 a CYP3A4 v tkáňových řezech z lidského střeva Při perorálním podání léčiv je jejich absorpce významně ovlivněna intestinální střevní bariérou. Tato bariéra exprimuje celou řadu efluxních a uptake transportérů, ale také biotransformační enzymy první a druhé fáze. Za nejvýznamnější efluxní transportér ve střevní bariéře můžeme považovat P-glykoprotein, který má širokou substrátovou specifitu. Z biotransformačních enzymů první fáze je to pak cytochrom P450 3A4. Jejich funkce spočívá v ochraně lidského organismu před toxickým působením xenobiotik, a to včetně léčiv. Řada klinicky významných léčiv působí ve vztahu k těmto proteinům jako substráty, inhibitory nebo induktory, což může mít za následek zvýšené riziko lékových interakcí. V lékárně nalezneme nepřeberné množství doplňků stravy nebo léčivých přípravků obsahující vitamin D. Je užíván pro správný vývoj kostí a zubů, pro správnou funkci imunitního systému nebo pro léčbu osteomalacie, křivice či osteoporózy. O jeho působení na expresi P-gp a CYP3A4 v lidském tenkém střevě je dostupné omezené množství informací. Cílem této diplomové práce...
|
|
|
Optimalizace extrakce fenbendazolu z environmentálních vzorků
Brodská, Denisa ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Denisa Brodská Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultant: Mgr. Martina Navrátilová Název bakalářské práce: Optimalizace extrakce fenbendazolu z enviromentálních vzorků Anthelmintika jsou léky používané k léčbě a profylaxi infekčních onemocnění způsobených parazitickými červy. V České republice se používají především ve veterinární medicíně. Při biotransformaci účinné látky vznikají metabolity, které se vylučují spolu s parentní látkou stolicí a močí. Fenbendazol a další podobné látky se touto cestou mohou vstřebávat do půdy a následně působit na necílové organismy v prostředí. Široké využití má fenbendazol při chovu hospodářských zvířat a jelikož zvířecí exkrementy jsou často dále využívány i k hnojení, riziko obsahu léčivých látek je třeba cíleně zkoumat. Za tímto účelem bylo zapotřebí vyvinout a optimalizovat extrakční metodu a taktéž provést odpovídající validaci analytické metody, jež budou následně použitelné pro reálné vzorky v životním prostředí. Předmětem samotného výzkumu byla léčivá látka fenbendazol společně s metabolickými produkty, fenbendazol sulfoxidem a fenbendazol sulfonem. Půda byla extrahována pomocí metody QuEChERS, jenž pracuje na principu extrakce na pevné fázi. Metoda...
|
|
|
Zavedení diagnostiky gastrointestinálních hlístic pomocí RT-PCR
Bezdíčková, Kristýna ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Nguyen, Thuy Linh (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Kristýna Bezdíčková Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Zavedení diagnostiky gastrointestinálních hlístic pomocí RT-PCR Gastrointestinální hlístice mohou způsobovat různě závažná onemocnění hospodářských zvířat. Jedinci bývají často nakaženi několika druhy parazitů najednou. Vzhledem k tomu, že symptomy bývají podobné, onemocnění se nazývá jako parazitická gastroenteritida. Nejen, že hlístice ohrožují zdraví zvířat, ale také mohou mít velký dopad na ekonomiku celé farmy. Diagnostika nebývá jednoduchá. Kromě morfologických a koprologických metod je možné využít biochemickou či molekulární analýzu, která bývá citlivější a přesnější. V našem případě jsme zkoušeli diagnostikovat gastrointestinální hlístice pomocí molekulární metody RT-PCR. V diplomové práci jsme se zaměřili na 6 druhů hlístic (Haemonchus contortus, Teladorsagia circumcinta, Trichostrongylus spp., Nematodirus battus, Chabertia ovina a Ashworthius sidemi). Materiálem byly vzorky trusu od ovcí, ze kterých jsme vyizolovali gDNA. Kontrolním materiálem byla gDNA získaná z vajíček H. contortus a gDNA získaná z celých těl parazitů. Zkoušena byla RT-PCR s využitím fluorescenčního barviva SYBR Green I a TaqMan sondy....
|
|
|
Nové fungální fukosidasy a jejich syntetický potenciál
Glozlová, Michaela ; Beránek, Martin (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Michaela Glozlová Vedoucí práce: prof. PharmDr. Martin Beránek, Ph.D. Konzultantky: doc. RNDr. Pavla Bojarová, Ph.D., Mgr. Pavlína Nekvasilová Název diplomové práce: Nové fungální fukosidázy a jejich syntetický potenciál Literární rešerše se zabývá α-L-fukosidázami, jejich výskytem, funkcí a použitím v syntéze fukosylovaných sloučenin, které byly taktéž předmětem rešerše, zejména jejich výskyt v lidském těle a účast v patologických stavech. Dále jsou zkoumány oligosacharidy lidského mléka, jejich vliv na zdraví kojence a jejich syntéza, k níž se dají využít právě α-L-fukosidázy. Experimentální část zahrnuje analýzu knihovny vláknitých hub s cílem nalezení zástupce s α-L-fukosidázovou aktivitu vůči pNP-α-L-fukosidu. Na základě hledání v genetických databázích byly vybrány a připraveny rekombinantní fungální α-L-fukosidázy a byla testována možnost jejich produkce v Pichia pastoris a Escherichia coli. Produkované enzymy byly purifikovány iontově-výměnnou chromatografií, charakterizovány a byla zkoumána jejich regioselektivita a syntetický potenciál pro syntézu fukosylovaných oligosacharidů. Klíčová slova: fukosidáza, enzym, oligosacharidy, syntéza, lidské mléko
|
host ::
RSS.